中国河南西峡晚白垩世恐龙蛋化石基因分离序列分析

从河南省西峡晚白垩世一枚恐龙蛋白石内腔絮状内含物及外壳提取ＤＮＡ样品，并用一段特异引物与６碱基随机引物进行ＰＣＲ扩增、基因克隆和序列分析。结果表明这对引物从蛋腔絮状内含物样品中扩增到一段１５０ｂｐ的ＤＮＡ片，推测氨基酸序列与ＥＭＢＬ库中书籍蛋白质氨基酸序列进行了序列同源性分析，结果表明所克隆到的这段基因与非洲爪蟾表皮钙粘着蛋白前体及脑细胞粘着蛋白、牛及人胎盘胞钙粘着蛋白在氨基酸水平有显著的序列同源     

一种非洲番茄黄化曲叶病毒DNA的克隆

用ＰＣＲ获得了非洲塞内加尔番茄黄化曲叶病毒（ＴＹＬＣＶ－ＳＥＮ）的全长ＤＮＡＡ，并进行了克隆和部分序列分析，ＤＮＡ序列分析的序列并１３５９ｂｐ，包括外壳蛋白基因，ＡＶ１基因，基因间区（ＩＲ）及部分复制酶基因，计算机分析显示：ＴＹＬＣＶ－ＳＥＮ与其他亚组ＩＩＩ及生理病毒相比，外壳蛋白氨基酸同源性为６７％～８３．４％，ＡＶ１基物氨基酸同源性为６１％～８４％，ＩＲ最大同源性为６０％～６８％，且与非洲和中     

马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因克隆和结构分析

以马铃薯基因组ＤＮＡ为模板并基于天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因的ｃＤＮＡ序列所设计的两个引物，通过ＰＣＲ扩增得到６６６ｂｐ的天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因编码区，并将此片段克隆到ｐＵＣ１８的ＳｍａＩ位点．序列分析结果表明该基因除去末端一终止密码子外其可译框架编码２２１个氨基酸残基，前导肽包括３２个氨基酸残基，故该抑制剂的成熟蛋白由１８９个氨基酸组成，第６７位的精氨酸为抑制胰蛋白酶的活性中心．与ｃＤＮＡ相比核苷酸的同源性为９４．３％，氨基酸的同源性为９０％．基因ＤＮＡ无内含子．     

斜纹夜蛾NPVp74基因的克隆及部分序列分析

以含ｐ７４基因的ＡｃＮＰＶＥｃｏＲⅠ－Ｐ片段作探针,与ＳｌＮＰＶ基因组在非严格条件下进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交,将ＳｌＮＰＶｐ７４基因定位于４９００ｂｐ的ＳｌＮＰＶＸｈｏⅠ－Ｐ片段．对ＳｌＮＰＶＸｈｏⅠ－Ｐ片段中的一段９４０ｂｐ的ＤＮＡ片段进行序列测定,通过ｉｎｔｅｒｎｅｔ经ＢＬＡＳＴ与Ｇｅｎ－Ｂａｎｋ中的ｄａｔａｂａｓｅ比较分析发现,序列中的一段２４３ｎｔ序列与ＡｃＮＰＶｐ７４基因有６０％的同源性,一段８１ｎｔ序列与ＡｃＮＰＶｐ７４基因的同源性高达７９％．与ＣｆＮＰＶｐ７４相比,２段２６４ｎｔ和１００ｎｔ序列分别有６０％和７１％的同源性．测得序列中的部分序列与ＢｍＮＰＶ、ＯｐＮＰＶｐ７４基因也有高达５８％～７８％的同源性．同时,这部分序列编码的氨基酸与ＡｃＮＰＶ及ＯｐＮＰＶＰ７４蛋白的氨基酸序列也有很高的同源性．结果表明所测序列的一部分为ＳｌＮＰＶＰ７４蛋白Ｃ－端的编码序列．     

苹果褪绿叶斑病毒库尔勒香梨分离物外壳蛋白基因的序列分析

利用RT-PCR，获得苹果褪绿叶斑病毒库尔勒香梨分离物外壳蛋白基因的cDNA克隆。序列分析结果表明，库尔勒香梨分离物外壳蛋白基因由582个核苷酸组成，编码一个由193个氨基酸组成的蛋白质。与已报道的P863、P205、A-Ball分离物序列比较，核苷酸序列同源性为80．0％～86．1％，推导的氨基酸序列同源性为84．9％～89．6％。     

河南西峡恐龙18srDNA片段质疑

按照ｒＤＮＡ的结构特点，将ＤＡ１８Ｓ１，７与其他８种生物的ｒＤＮＡ序列进行排列比较，结果表明这２个序列不是恐龙ｒＤＮＡ片段，ＤＡ１８Ｓ７看来更接近一种植物ｒＤＮＡ片段（与金虎尾的同源性达９４％以上），而ＤＡ１８Ｓ１与２种参与比较的真菌ｒＤＮＡ序列有很高的同源性（８８．３％和８９％），它们与脊椎动物ｒＤＮＡ的同源性分别只在６７．８％～７４．１％之间。     

无瓣海桑Sonneratia apertala钙调蛋白基因的克隆及序列分析

用高等植物钙调蛋白的保守序列设计两端引物，以红树植物海桑属无瓣海桑Sonneratia apertala总DNA为模板，扩增出无瓣海桑钙调蛋白基因，并以之构建重建质粒pT-ACaM。经测序分析比对，发现无瓣海桑钙调蛋白基因全长1418bp，其中第1外显子76bp，第2外显子371bp，中间为一946bp的内含子所隔开。编码148氨基酸的蛋白质，其编码区序列与已知的其他高等植物的钙调蛋白基因核苷酸序列同源性高达85％以上。而蛋白质序列同源性达95％以上。     

甜菊钙调蛋白基因的克隆及结构分析

钙调蛋白（Calmodulin）是生物细胞内一种重要的调控蛋白，通过其与靶酶的相互作用控制细胞正常的生长发育及细胞对外界环境变化的反应，我们从甜菊顶芽和花芽中提取总RNA，逆转录合成cDNA第一链，以此为模板，参考GenBank上已发表植物的钙调蛋白基因序列合成5′端和3′端引物，利用多聚酶链式反应（PCR）扩增并克隆得到了甜菊钙调蛋白基因的两个异型基因，序列分析表明，它们均由450个核苷酸组成，编码148个氨基酸，在核苷酸序列上与迄今已知的多种植物钙调蛋白均有很高的同源性，同源率在83％以上，编码的氨基酸序列同源性更同，同源率高达95％以上，这两个基因之间存在差异，其核苷酸序列同源率为85％，编码区的氨基酸序列的同源率为99％，仅在第122个氨基酸由ALA代替了VAL。     

黄瓜花叶病毒小青菜分离物RNA3全长序列分析

对侵染十字花科小青菜的黄瓜花叶病毒YN分离物（CMV-YN）RNA3进行全长克隆和序列分析．CMV-YNRNA3全长2220nt，分别编码279个氨基酸的3a蛋白和218个氨基酸的CP．序列同源性比较结果如下；CMV-YNRNA3核苷酸及其编码蛋白的氨基酸序列与亚组IA株系CMV-Fny、亚组IB株系CMV-Nt9、亚组Ⅱ株系CMV-Q的同源性，RNA3序列分别为92．7％、96．7％、74．2％，3a蛋白氨基酸序列分别为96．4％、98．6％、83．2％，CP氨基酸序列分别为97．7％、98．2％、83．1％．该结果表明CMV-YN与亚组IB株系CMV-Nt9的同源关系更密切．对CP核苷酸序列的系统进化树分析表明：CMV-YN归属于亚组IB，本研究为首次报道侵染我国十字花科植物的CMV基因组序列．     

中国河南西峡恐龙蛋化石中18SrDNA部分片段的克隆及序列分析

本文从河南省西峡晚白垩世的一枚保存方式特殊的恐龙蛋化石中提取ＤＮＡ，经过￣３２Ｐ同位素标记和电泳分析，发现在蛋内腔的絮状物样品中确有ＤＮＡ片段存在。它们的大小约在１０００ｂｐ至几十ｂｐ之间，大多数片段在４００ｂｐ以下。用１８ＳｒＤＮＡ特异引物，以上述ＤＮＡ为模板进行了ＰＣＲ扩增，经电泳分析得到约２００ｂｐ的ＰＣＲ产物。经过连接、转化到大肠杆菌，最终筛选出６个阳性克隆。测序分析和同源性比较发现这６个克隆的序列与两栖类、爬行类、鸟类及人类等的１８ＳｒＤＮＡ具有很高的同源性，但是与原核生物没有发现同源性，而且没有检索出与该基因完全相同的已知序列。     

恐龙骨骼化石保护材料研究

自贡恐龙化石埋藏丰富、分布广泛、保存完整,具有非常重要的科学价值.为更好保护已出土恐龙化石,本文以甲基丙烯酸甲酯和丙烯酸丁酯为主要原料,采用核壳聚合制备聚合物乳液,与纳米SiO2共混后应用于恐龙化石保护.结果表明:乳液分散均匀、涂层热稳定性高、涂膜附着力好(一级);经乳液涂覆的恐龙化石具有优良耐紫外线、耐酸碱性和耐水性;同时,涂膜透明性好,不影响恐龙化石外观;纳米复合乳液有望在化石保护中广泛应用.     

Dinosaur locomotion from a new trackway

Ardley Quarry in Oxfordshire, UK, contains one of the most extensive dinosaur-trackway sites in the world, with individual trackways extending for up to 180 metres. We have discovered a unique dual-gauge trackway from a bipedal theropod dinosaur from the Middle Jurassic in this locality, which indicates that these large theropods were able to run and that they used different hindlimb postures for walking and running. Our findings have implications for the biomechanics and evolution of theropod locomotion.     

两种恐龙化石保护材料性能探讨

研制一种易于施工和保存、环境友好、透明性佳的恐龙化石保护新材料.与传统保护材料(硝基清漆)的对比表明:涂覆传统保护材料的围岩吸水质量分数为1.91%,而涂覆新型保护材料的吸水质量分数为1.42%,后者能进一步阻止水分的渗入,提高化石疏水性.用0.5%H2SO4浸泡,传统材料的起泡时间为48 h,新型材料为96 h;经0.5%pH3的NaCl溶液盐雾腐蚀,传统材料经4 h起泡,新型材料40 h才起泡,表明新型保护材料具有良好耐蚀性.实验中两种材料附着力均为1级,而新型材料的柔韧性为1 mm,优于传统材料的3mm,因而与化石基体间的结合性更好.新型材料具有30 d的紫外老化性能,优于传统材料的10 d.     

恐龙化石的人工加速腐蚀研究

为了深入探讨恐龙化石的风化原因,为恐龙化石新型保护材料的研制提供理论支持,项目采用0.5,1,2mol/L硫酸溶液,二氧化碳饱和液与5%碳酸氢钠溶液对自贡出土恐龙化石进行人工加速腐蚀实验;利用失重法、XRD、XRF和显微法表征.结果表明:3种介质对化石腐蚀速率依次为硫酸溶液24.213 6g/(m2·h),二氧化碳0.663 7g/(m2·h),碳酸氢钠0.126 3g/(m2·h).硫酸溶液对化石腐蚀速率是二氧化碳的36.5倍,是碳酸氢钠溶液的191.7倍;在0.5mol/L硫酸溶液腐蚀下,XRD和XRF说明化石中CaCO3首先腐蚀,腐蚀量最大,腐蚀后化石中钙含量减少66.4%.化石腐蚀前后形貌变化与腐蚀速率一致.     

恐龙化石保护材料的耐蚀性能

采用共混法与原位聚合法制备添加纳米二氧化硅恐龙化石保护材料.将制备恐龙化石保护材料与传统保护材料(硝基清漆)分别涂覆钢片,用3.5%氯化钠溶液浸泡腐蚀,测试腐蚀电位、腐蚀电流、交流阻抗和腐蚀速度;利用SPM和DSC测试保护材料分散性与热分解性.结果表明:共混法与原位聚合法制备保护材料腐蚀电流分别为3.481×10-7A/cm2、2.332×10-6A/cm2,硝基清漆腐蚀电流为4.181×10-6A/cm2,共混法制备保护材料腐蚀速度最小;三种保护材料失重腐蚀速率为1.18 g/(m2·h)、1.19 g/(m2·h)和1.29 g/(m2·h),共混法制备保护材料耐蚀性最好,交流阻抗谱测试结果与其一致;添加4%纳米SiO2制备水溶性保护材料时,共混法制备材料耐热性、分散性较原位聚合法好,两者涂膜附着力皆为1级.     

恐龙河保护区黑颈长尾雉的分布与栖息地

对分布于云南恐龙河自然保护区的黑颈长尾雉的分布与栖息地进行了研究，结果表明：黑颈长尾雉在该保护区的29个地点有所分布，分布海拔在1000～2140m；在该保护区虽有多种植被群落类型，但该种雉鸡主要栖息于以云南松为主的生境中；微栖息地的主要特征是坡上位、坡度小、郁闭度较高；通过样带法调查，黑颈长尾雉的种群密度为0．0599只／hm^2。