适用于教学的PAGE电泳染色脱色方法研究

以牛血清蛋白等标准蛋白为材料进行PAGE电泳,并对多种染色、脱色方法进行研究比较和改进。结果表明:用考马斯亮蓝R-250微波中火染色5min后,再间隔微波中火脱色3个5min后,可观察实验结果,继续摇床脱色1~2 h后,背景低、灵敏度高;用考马斯亮蓝G-250微波染色后,用水漂洗约30min就可达到粗略观察实验结果的目的,若继续在去离子水中浸泡,则时间越久,背景越清晰;脱色时用乙醇替代甲醇,脱色效果相当。     

人口腔上皮细胞骨架观察实验的建立

细胞骨架是真核生物细胞的重要结构,研究细胞骨架的形态对进一步研究其功能具有重要意义。以建立一种在光学显微镜下观察到清晰的人口腔上皮细胞的细胞骨架的实验方法为目的,从实验材料的预处理、抽提时间、固定时间三个方面对现有的实验方法进行了改进和优化。结果表明,以人口腔上皮细胞为实验材料,取材后置于1 mol/L的甘露糖中预处理5 min,使用1%Triton X-100作为抽提试剂抽提25 min,使用3%戊二醛作为固定液固定20 min,最后只需使用考马斯亮蓝R250染色10 min便能够观察到清晰的细胞骨架结构。     

植物细胞骨架观察实验的改进与优化

从实验对象及其取材部位、抽提试剂的种类及其浓度、抽提时间、固定液种类等10个方面采用控制变量法对植物细胞骨架的显微观察方法进行了优化改进。结果表明:以蒜苗白色根茎部中段内表皮细胞代替传统的洋葱内表皮细胞为实验材料,使用1%Triton X-100作为抽提试剂抽提25 min去除杂蛋白,选用戊二醛作为固定液固定45 min,最后只需使用考马斯亮蓝R250染色10 min便能够观察到清晰的细胞骨架。此外,实验前将样本置于1 mol/L的甘露糖溶液中预处理浸泡5 min,细胞骨架的观察效果更佳。     

用考马斯亮蓝测定植物粗提液中可溶性蛋白质含量方法的研究

用木立芦荟的叶片为材料,以牛血清白蛋白为参照,对蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合后的光吸收稳定性,不同的蛋白质溶剂、植物粗提液等对光吸收的影响进行了研究。结果表明：蛋白质与考马斯亮蓝结合后,在595nm处的光吸收值不很稳定,通过降低仪器的灵敏度可以提高光吸收的稳定性；以0.02～0.5mol·L~(-1)pH为6.8的磷酸缓冲液、0.1～1.0mol·L~(-1)pH为6.8的Tris-HCI缓冲液为蛋白质溶剂,对蛋白质与考马斯亮蓝结合后的线性无影响；芦荟叶片粗提液中的其他成分对其中可溶性蛋白质与考马斯亮蓝结合后的线性亦无显著影响。     

考马斯亮蓝R-250显现血足迹的应用研究

目的研究考马斯亮蓝R-250显现潜血足迹所适用的常见客体。方法选择1O种常见客体，制作潜血足迹样本，用考马斯亮蓝R-250进行显现。结果浅色非渗透性客体的效果优于其他客体。结论考马斯亮蓝R-250可以很好的显出某些渗透性客体和非渗透性客体表面的潜血足迹。     

考马斯亮蓝G-250染色法测定草乌中可溶性蛋白质含量

采用考马斯亮蓝G-250染色法对草乌药材中可溶性蛋白质含量进行了测定,建立了快速、灵敏的测定蛋白质的方法.结果表明,考马斯亮蓝G-250染色法简单、迅速,且相对较为准确,是测定低浓度蛋白质含量的有效方法.     

日本血吸虫尾蚴不同染色方法的比较研究

目的探索不同化学染色法对日本血吸虫尾蚴的染色效果,并对其形态结构进行分析,为血吸虫研究和教学提供参考。方法采用自然逸出法从阳性钉螺获取尾蚴,涂片法制作尾蚴玻片标本,分别采用苏木素-伊红(HE)染液、瑞氏-姬姆萨染液、尼氏(Nissl)染液、0.4%台盼蓝、考马斯亮蓝R-250染液、丽春红染液、0.1%茜素红染液、刚果红染液等化学染料进行染色,在光学显微镜下观察和评价尾蚴形态结构,比较各方法的染色效果。结果形态学测量的结果显示获取的尾蚴为成熟期尾蚴,8种染色方法均能使血吸虫尾蚴呈不同程度的着色,但在尾蚴形态结构显示上有相似性,亦有不同之处。HE染色、瑞氏-姬姆萨染色、台盼蓝和尼氏染色等对尾蚴头部和尾部结构均能较好显示。考马斯亮蓝和丽春红染色对尾蚴头部微细结构均显示欠佳,但考马斯亮蓝可显示尾部排泄管,丽春红可显示尾部部分结构。茜素红、刚果红染色效果类似,对头部和尾部结构均能部分显示。结论 HE染色能将尾蚴各部位器官显示清楚,对比明显,可在教学科研中广泛使用。其余染色方法应根据研究目的不同,选取不同的方法。     

两种染色方法对聚丙烯酰胺凝胶电泳回收蛋白的影响

以牛血清白蛋白(BSA)为材料进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别采用考马斯亮蓝(CBB)G-250染色和咪唑-Zn反染,用电洗脱仪回收.它们的灵敏度分别为500ng和5 ng;蛋白质回收率分别为37.9%和74.4%.     

考马斯亮蓝法快速测定菜籽粕中可溶性蛋白质的含量

采用考马斯亮蓝G-250染色法对菜籽粕中可溶性蛋白质含量进行测定,在波长595 nm处测定其吸光度.实验表明,可溶性蛋白质含量在10~100μg/mL之间呈现良好的线性关系,通过此法测得菜籽粕中可溶性蛋白的平均含量为5.30%.方法简便快速、灵敏度高、重现性好,是测定菜籽粕中可溶性蛋白质的一种有效方法.     

中华芦荟多酚氧化酶的分离纯化

采用丙酮粉沉淀抽滤法从中华芦荟中提取多酚氧化酶.提取的粗酶液经30%~80%硫酸铵分级沉淀,透析除盐,DEAE-Sephadex A-50阴离子交换柱层析,后经PEG 6000浓缩,得到纯化的多酚氧化酶,其纯化倍数为13.28.纯化后的酶液经SDS-PAGE电泳分析,采用考马斯亮蓝R-250染色显示为单一蛋白带,分子量约为54.1 KD.     

快速测定生物样品中蛋白含量的同步荧光法研究

基于胞苷酸(CMP)与人血清白蛋白(HSA)相互作用,体系的同步荧光强度和溶液中白蛋白的浓度呈良好的线性关系,建立了以胞苷酸为分子探针,运用同步荧光光谱法测定生物样品中蛋白质含量的新方法.考察了Δλ值、介质、试剂用量、离子强度、加入顺序、反应时间等因素对体系同步荧光光谱的影响,在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度与白蛋白在2.76～552.0μg·mL-1范围内的线性相关系数为0.9984,方法的检测限可达0.13μg·mL-1.用本方法对人血清、唾液和尿液等样品进行测定并做了加标回收实验,回收率在97.8%～103.6%之间.对11份空白溶液进行平行测定,相对标准差为1.16%.并用CBB法做了对照实验,取得了令人满意的结果.     

A new method of recovering polyhydroxyalkanoate fromAzotobacter chroococcum

After polyhydroxyalkanoate (PHA) fermentation for 42 –48 h by theAzotobacter chroococcum G-3, the PHA content reached more than 75% of the dry weight. Biomass was isolated from culture by centrifugation and pretreated with freezing to release PHA pellet, then was treated with 10 g/L sodium dodecyl sulfate (SDS) for 15 min to effectively solubilize lipid and protein. Subsequently, it was further purified by digesting with 30% sodium hypochlorite (NaClO) for 3 min to remove peptidoglycan and non-PHA biomass. Finally, 98% PHA was obtained by diluting and rinsing with water, and the PHA recovered was suitable for processing.     

碱提法提取燕麦麸皮蛋白工艺条件的优化

以燕麦麸皮为原料,通过碱提工艺提取燕麦麸皮蛋白,并优化了实验室提取条件.在碱法水解蛋白工艺中,以水解温度、时间、加碱量为单因素考察,并运用甲醛滴定法对燕麦蛋白的水解度进行测定.结果表明:料液比为1∶20,反应时间为2 h,溶液含碱量为1.0 mol/L时为最佳提取工艺,该工艺的水解度大约为30%左右;通过凝胶色谱分析了水解物的分子量变化情况,在最佳生产工艺条件下,水解产物主要是对应的相对分子质量为31 500 u和100~200 u的物质.     

凝胶色谱用于磺甲基酚醛树脂生产控制方法研究

应用凝胶色谱-紫外检测法对SMP聚合生产过程中的原料单体、反应过程中生成的小分子、低聚物及最终产品进行了凝胶色谱分离与紫外图谱解析，研究建立了凝胶色谱用于磺甲基酚醛树脂生产控制的方法．研究表明，使用SephadexG-10色谱柱，在0．01mol／L的NaOH溶液为流动相、柱温35℃、流速1.0mL／min等色谱条件下，大小分子的出峰时间分别为8．2min与13．4min，大小分子物质的分离比较彻底．利用凝胶色谱-紫外检测法分析苯酚类小分子凝胶色谱峰的位置变化和强度可以准确监控SMP生产中反应进行情况，小分子峰消失即为反应终点．该方法用于生产控制准确可靠，可以避免生产过程中过度磺化缩聚造成的分子量过高而水溶性降低或者反应不够充分造成的分子量过低、羟甲基含量高易热聚交联等现象，对于磺甲基化酚醛树脂工业化产品的质晕控制具有萤要意义．     

辣根过氧化物酶修饰电极的电化学研究

制备了考马斯亮蓝和多壁碳纳米管混合物修饰玻碳电极（CBB G-250/MWNT/GC）,考察了固定在该修饰电极上的辣根过氧化物酶的电子转移情况。结果表明,辣根过氧化物酶在该电极上实现了稳定的直接电子转移反应,循环伏安图上出现了一对对称性良好的氧化还原峰。直接电子转移反应的表观速率常数k_s=4.68s^-1,式量电位E^0′几乎不随扫速（至少在20～270mV/s的扫速范围内）而变化,平均值为（-0.333±0.002）V（参比Ag/AgCl pH 7.0）。式量电位和pH的良好的线性关系表明该修饰电极上辣根过氧化物酶的直接电化学反应是有质子参与的。实验结果还证实了该修饰电极上酶对底物H₂O₂有良好的电催化活性。该方法可为生物传感器和生物燃料电池酶电极的制备提供基础数据。     

细菌芽孢染色法的改良探索

文中对微生物学实验教材上介绍的Schaeffer-Fulton氏芽孢染色法进行了改进。用石碳酸复红试剂代替0.5番红水溶液作为复染剂,并对比不同石碳酸复红浓度及染色时间对染色效果的影响。结果表明,以石碳酸复红的10倍稀释液为复染剂,复染30 s~1 min时能达到最佳的染色效果。改进方法操作简单易行,染色效果对比鲜明,可使学生更易将菌体与芽孢区分开来。将改进的染色方法运用于微生物学实验教学,收到了良好的教学效果。     

辉光放电等离子体降解染料直接蓝86

利用接触辉光放电反应器产生等离子体降解直接蓝86（DB）水溶液,考察了DB初始浓度、初始pH和Fe^2＋对DB降解率的影响．结果表明,当DB初始浓度为30．0mg／L,溶液pH为3．0时,放电90min DB降解率可达72．36％;加入10．0mg／LFe^2＋时,放电10min DB降解率可达69．20％．DB降解过程中,随反应时间的延长,溶液pH值逐渐降低,溶液电导率逐渐上升．降解90min后COD去除率为41．76％,加入10．0mg／LFe^2＋后10minCOD去除率达38．50％,表明Fe^2＋对DB降解有明显的催化作用．     

活性翠兰 M-G 电化学无盐染色工艺

分析外加电压、染色温度、染色时间及固色时间对电化学无盐染色的影响．实验结果表明,电化学无盐染色在外加电压6V、染色温度45℃、染色时间30min、固色时间30min的最佳工艺条件下棉织物 K/S值为3．985,高于传统染色后棉织物 K/S值3．478,且染色后棉织物的色牢度与传统染色基本一致．     

高速定影剂的选择及应用

本文通过实验选择出高速定影剂，并应用于定影液中，使定影液的定影速率提高了３倍。