与线粒体DNA突变有关的人类遗传病研究

线粒体是一种含有DNA其能自我复制的细胞器.近年来发现线粒体DNA(mitochondrial DAN、mtDNA )的的突变与核DNA突变一样能导致一些疾病,从而形成了遗传学研究的新领域.     

可移动的遗传因子转座子及其效应

正如达尔文所指出的,变异是生物进化的前提(指真实遗传的变异,不是环境条件影响下的变异),那么变异是如何产生的呢?据目前所知,变异的途径基本上有两种,一种是遗传物质基础(DNA)的改变而引起的变异,如染色体结构和数目的改变,DAN分子内部结构的变化等,这些统称为突变。另一种是由遗传因素(基因)的重新组合所产生的变异,这种变异又分为两类,一类是常规重组变异,即通过遗传物质的转移、同源配对以达到重组     

葡萄不同部位提取DNA的方法研究

从葡萄幼嫩部位如幼叶、嫩芽、花穗及老熟部位如韧皮部、老叶提取DAN，结果表明均能提取较高纯度的DNA，其中以幼嫩部位的DNA产出率较高，纯度较好，且均适用于进行RAPD分析，能扩增出较好的条带，且带型也一致。     

DAN荧光法测定杜仲翅果仁的微量硒

采用2,3-二氨基萘（DAN）在pH值为1.5～2.0条件下与样品中的四价硒生成4,5-苯并苤硒脑配合物,经环己烷萃取,利用荧光光度法对杜仲翅果仁中的微量硒进行测定,操作简单、灵敏度高,结果准确、重现性好.     

DAN荧光法测定原烟团棵期的痕量硒

本文根据文献[1]采用2，3-二氨基萘（DAN）在pH1．5－2．0条件下与样品中四价硒生成4，5-苯并硒脑配合物，经环己烷萃取，利用荧光法对原烟中的痕量硒进行测定，结果满意     

基因转运载体的原子力显微镜研究

通过原子力显微镜观测阳离子脂质体及其与DNA复合物的结构。将一定量的阳离子脂质体以及阳离子脂质体／DAN复合物滴加到新解理的云母片上,干燥后用原子力显微镜观测。结果表明,阳离子脂质体在云母片上形成的颗粒为球形或椭圆形,粒径分布较为均匀;阳离子脂质体／DNA复合物在云母片上的颗粒形状不规则,粒径分布不均且比空白脂质体的粒径大。通过原子力显微镜可以快速有效地观测脂质体以及脂质体／DNA复合物的粒径、表面形态等,为分析脂质体的物理化学性质与基因转运效率的关系提供了一种研究方法。     

猕猴桃微量硒的测定和施加硒肥的比较研究

用DAN荧光法测定了施硒肥和未施硒肥的猕猴桃花、叶、果中硒含量,结果表明：在相同的土壤营养等条件下,施加硒肥的猕猴桃中牺含量明显比未施硒肥的猕猴桃中硒含量高,且硒在猕猴桃植株中各部位的分布为：叶＞花＞果,提示场肥叶面喷施将比上施效果显著。     

汶川地震触发牛圈沟高速远程滑坡-碎屑流动力学特性分析

鉴于牛圈沟滑坡为地震触发的典型滑动-碎屑流型滑坡，采用滑坡动力学分析(Dynamic analysis)软件DAN W对牛圈沟滑坡全程动力学特征进行分析，使用试错法对比分析摩擦准则与Voellmy准则两种不同流变关系的模拟效果.结果表明：摩擦准则应用于滑体的初始运动阶段，Voellmy准则应用于滑坡后期碎屑流阶段时模拟效果最佳；并给出最佳的流变参数，得到滑坡堆积体的体积和形态变化，滑坡运动速度及变化规律.     

糙米中总硒及水溶态和可交换态硒的荧光法测定

用DAN荧光法测定硒含量的研究表明，施加硒肥的糙米中总硒含量（0.07×10^-6)及水溶态与可交换态硒的含量（0.020×10^-6)，明显高于未施加硒肥的糙米中总硒含量（0.045×10^-6）及水溶态与可交换态硒的含量（0.010×10^-6）.这说明对于缺硒地区的水稻培育，施加硒肥是一种有效的措施.     

硒-2,3-二氨基萘-β-环糊精-十二烷基磺酸钠荧光体系测定痕量硒

利用β 环糊精 (β CD)和十二烷基磺酸钠 (SLS)对Se与 2 ,3 二氨基萘的反应产物 4 ,5 二苯基并硒二唑 (记作Se DAN)的协同增敏作用 ,直接在水相中测定痕量硒 .最佳pH为 5～ 8,λex=3 79nm ,λem=540nm .Se含量在 0～ 0 .6μg/mL范围内与荧光强度成线性关系 .最低检出限 0 .0 0 1 μg/mL ,试验了多种常见离子的影响 ,干扰可以很好地消除     

深度学习:多层神经网络的复兴与变革

 人工智能（AI）已经进入一个新的蓬勃发展期。推动这一轮AI 狂澜的是三大引擎,即深度学习（DL）、大数据和大规模并行计算,其中又以DL 为核心。本文回顾本轮“深度神经网络复兴”的基本情况,概要介绍常用的4 种深度模型,即：深度信念网络（DBN）、深度自编码网络（DAN）、深度卷积神经网络（DCNN）及长短期记忆递归神经网络（LSTM-RNN）。简要介绍深度学习在语音识别和计算机视觉领域几个重要任务上的应用效果情况。为便于应用DL,介绍了几种常用的深度学习开源平台。对深度学习带来的启示和变革做了一些开放式的评述,讨论了该领域的开放问题和发展趋势。     

基于专家系统与DAN网络的围棋局面判断算法

分析围棋局面形势判断特点,选用专家系统模式库、影响函数给出特征值,将特征值传递给深度适配网络(Deep Adaptation Network,DAN),利用已有盘面和结果标签训练网络,生成完整的盘面判断评估模型.通过1个公开数据集及1个私有数据集进行网络训练,得到8层、迭代200次左右的最优评估网络.实验结果证明了本文算法的可行性和有效性,解决了当前围棋评估算法参数难以训练、优化的问题.     

基于YanMeng模型模拟台风的初步探索

利用风场模型对台风进行数值模拟得到极值风速这一方法已被广泛应用.首先详细介绍YanMeng风场模型物理模型及数值解法;着重强调该模型中的两个随机参数:Holland参数B、等效粗糙长度z_0,讨论了它们对气压场及风速的影响程度,并给出相应取值方法;最后以YanMeng风场模型作为技术背景,根据厦门气象局提供的实测台风数据对台风DAN进行数值模拟,得到梯度风场以及台风影响下厦门地区表面风速,以证明YanMeng 风场模型的可行性.     

EC109细胞株细胞周期DNA代谢和形态改变的研究

人食管癌细胞株 EC109以显微分光光度计测定癌细胞核 DNA 含量,以放射自显影测定细胞核摄取~3H-TdR 和扫描电镜检查细胞表面的超微结构.大多数 EC109瘤细胞间期细胞核的 DNA 含量增加,主要干系细胞 DNA 含量为2 C,属 G_1期,也可见低于四倍体(3 C),高于四倍体(>4 C).甚至多倍体(>8 C)的瘤细胞.~3H-TdR 加入培养基10分钟后,许多瘤细胞核有银粒出现(S 期细胞).大量细胞进入细胞周期反映其恶性程度高.扫描电镜可见 EC109在细胞周期不同阶段其细胞大小形状和微绒毛也不同.本文结果说明用细胞核 DAN 含量测定,~3H-TdR 掺入和细胞表面超微结构可测定肿瘤周期.也可用这些方法判定瘤细胞的恶性程度.     

钝顶螺旋藻对硒的富集和有机化作用

目的：研究钝顶螺旋藻（Spirulina platensis,S.P）对硒的富集和有机化作用,方法：培养其中添加无机硒亚硒酸钠培养S．P,2,3－二氨基萘（DAN）荧光分光光度法测定不同增殖期藻体含硒量。结果：①S．P生长的迟缓期富集硒较快,而在快速期则有机硒增量较明显;②在高浓度无机硒条件下培养,藻体的总硒、有机硒、有机化率均呈现下降趋势;③S．P对硒的生物有机化率在培养第3d时较低,第6d时较高;添加150mg.L^-1硒培养的富硒螺旋藻,第6d时硒主要与水溶性蛋白质结合,占65．5％。结论：S．P中总硒含量、有机硒含量、硒的有机化率及硒在藻体中的分布均呈现动态变化。     

钝顶螺旋藻中蛋白质结合硒的研究

目的：研究富硒培养的印顶螺旋藻干藻（含硒：462.6μg.g^-1）中蛋白质含硒量及差异。方法：采用硫酸铵分经,DEAE-52纤维素及SephadexG-100柱层分离纯化蛋白质,经紫外吸收光谱和SDS梯度凝胶电泳检测白质纯度及基组成,以2,3－二氨基萘（DAN）荧光分光光度法测定含硒量。结果：蛋白质结合的硒占藻体总硒的58．7％,不同饱和度（25％,50％,100％）硫酸铵分级沉淀蛋白质中的硒占总硒情况分别为4．6％,18．7％,6．5％,DEAE－52柱层析蛋白洗脱峰蛋白含硒量依次为258,431,204,484μg.g^-1,分离纯化的含硒藻蓝蛋白有较高的含硒量（267μg.g^-1）,两个亚基相对分子质量为α＝19500,β＝21500,两亚基含硒量相对之比为1．65。结论：藻体蛋白及藻蓝蛋中结合硒并有明显差异。     

鼠痘病毒TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR快速检测方法的建立与应用研究

目的建立快速、敏感、特异检测鼠痘病毒的Taq Man MGB探针实时荧光定量PCR方法。方法针对鼠痘病毒血凝素HA基因设计特异性引物和探针,构建含有HA基因的标准质粒进行定量分析,建立Taq Man MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,评价其敏感性、特异性和稳定性。对临床标本中的鼠痘病毒进行检测。结果研究结果显示,建立的鼠痘病毒Taq Man MGB探针实时荧光定量PCR检测方法特异性为100%,与其他正痘病毒属病毒、非正痘病毒属病毒、细菌、真菌、寄生虫和细胞均无交叉反应。该技术灵敏度高,能精确定量检测鼠痘病毒DAN线性范围达10个数量级(100—109拷贝),最低检测限度为4拷贝。该方法重复性非常好,组内变异系数和组间变异系数均小于3%。测试中相关系数、斜率和效率测量线性没有显著变化,表明该方法准确度高、精密度好。将其成功应用于临床标本中鼠痘病毒载量的定量检测,用普通PCR和测序进行确证。整个检测过程可在2 h内完成,可以用作快速诊断方法。结论本研究新建立的鼠痘病毒Taq Man MGB探针实时荧光定量PCR方法,具有快速简便、特异性强、灵敏度高的特性,适用于动物源性产品中鼠痘病毒检测、食品和药品安全检查、环境监测、流行病毒调查,为临床标本中鼠痘病毒的快速定量检测提供了一种特异有效的评价工具,值得推广应用。     

鼠痘病毒TaqMan MGB 探针实时荧光定量PCＲ 快速检测方法的建立与应用研究

摘要: 目的建立快速、敏感、特异检测鼠痘病毒的TaqMan MGB 探针实时荧光定量PCＲ 方法。方法针对鼠痘病毒血凝素HA 基因设计特异性引物和探针,构建含有HA 基因的标准质粒进行定量分析,建立TaqMan MGB 探针实时荧光定量PCＲ 检测方法,评价其敏感性、特异性和稳定性。对临床标本中的鼠痘病毒进行检测。结果研究结果显示,建立的鼠痘病毒TaqMan MGB 探针实时荧光定量PCＲ 检测方法特异性为100%,与其他正痘病毒属病毒、非正痘病毒属病毒、细菌、真菌、寄生虫和细胞均无交叉反应。该技术灵敏度高,能精确定量检测鼠痘病毒DAN 线性范围达10 个数量级( 100—109 拷贝) ,最低检测限度为4 拷贝。该方法重复性非常好,组内变异系数和组间变异系数均小于3%。测试中相关系数、斜率和效率测量线性没有显著变化,表明该方法准确度高、精密度好。将其成功应用于临床标本中鼠痘病毒载量的定量检测,用普通PCＲ 和测序进行确证。整个检测过程可在2 h 内完成,可以用作快速诊断方法。结论本研究新建立的鼠痘病毒TaqMan MGB 探针实时荧光定量PCＲ 方法,具有快速简便、特异性强、灵敏度高的特性,适用于动物源性产品中鼠痘病毒检测、食品和药品安全检查、环境监测、流行病毒调查,为临床标本中鼠痘病毒的快速定量检测提供了一种特异有效的评价工具,值得推广应用。     

橙皮素对血管内皮细胞NO分泌功能的影响

考察了橙皮素对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)NO分泌功能的影响,探讨其作用机制.为此采用DAN法测定HUVECs分泌NO的水平,用人乳腺癌MCF-7细胞(雌激素受体阳性)促增殖实验和报告基因模型实验评价橙皮素的雌激素样活性.结果显示在内源雌激素水平较低的条件下,橙皮素在12.5～100 μmoL/L浓度范围内,能够促进HUVECs分泌NO,并呈剂量依赖性.此作用能够被雌激素受体拮抗剂ICI182,780和放线菌素D阻断.橙皮素与E2同时作用时,HUVECs分泌NO水平较两者单独作用时显著下降.而在内源雌激素水平较高的条件下,橙皮素抑制HUVECs分泌NO.橙皮素能够促进MCF-7细胞增殖,并且能够被ICI182,780完全阻断,同时,橙皮素能够部分拮抗E2对MCF-7细胞的促增殖作用.另外,橙皮素能够诱导ERα控制的报告基因表达.从而可认为橙皮素属于雌激素受体部分激动剂,对血管内皮细胞NO分泌功能具有调节作用,其机理涉及雌激素受体信号途径和基因转录调节.     

Xenorhabdus nematophilus BP品系杀虫毒素基因的克隆与鉴别

构建了昆虫病原线虫共生菌Xenorhabdus nematophilus BP品系的粘粒文库并用生物测定的方法从中筛选到2个对棉铃虫初孵幼虫有口服抑杀作用的克隆cos83和cos76。为初步确定这两个克隆的毒素基因与已报道基因的差异程度，根据已发表的共生菌毒素基因序列资料设计了7对引物对这两个克隆进行PCR扩增并对扩增产物进行测序和分析。从毒力较强的cos83中，7对引物均扩增出与目标片段大小一致的产物，而从cos76中只有5对扩增到目标片段。测序结果显示，cos76的5个PCR扩增产物与cos83的对应扩增产物DAN序列同源性为100％。以cos83的7个PCR扩增产物所编码氨基酸序列进行BLAST分析，它们与X．nematophilus PMF1296和Photorhabdus luminencenc W14毒素相应区间的平均同源性分别为94％和58％，说明cos83毒素是共生菌口服毒素家族的一员但与同类的其它毒素有一定的差异，值得对其杀虫谱，作用机理等进行进一步的研究。