产纤维素酶新菌株的筛选及其产酶特性研究

【目的】筛选分离新的纤维素酶产酶菌株,并对其生长特性和产酶特性进行研究。【方法】从堆肥样品中分离得到一株产纤维素酶菌株,定名为CP1,利用16SrRNA序列对比和Biolog微生物鉴定系统进行鉴定。通过测定菌株生长速率确定其最适生长条件。采用CMC发酵培养基进行纤维素酶的研究,确定其产酶曲线。测定粗酶液最适作用温度和pH值,热稳定性和金属离子对其影响。【结果】经鉴定该菌株为梭形芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis),其最适生长温度为30℃,最适生长pH值为6。在含CMC-Na的培养基培养,该菌株的生长与产酶同步进行,培养48h菌株生长量达到最大,培养液的CMC酶活力同时达到最大值,为0.46U/mL。该菌株所产的纤维素酶既有酸性CMC酶活力,又有碱性CMC酶活力,并以碱性CMC酶为主,酸性CMC酶的活力只有碱性CMC酶的71.4%。其酸性CMC酶的最适作用pH值为6.0,碱性CMC酶的最适作用pH值为8.0。另外,该菌株所产碱性CMC酶活的最适作用温度为40~50℃,而且0.5%的Cu2+使其酶活降低45%。【结论】菌株CP1为首次报道的梭形芽孢杆菌产纤维素酶新菌株,具有独特的酸碱性环境下的纤维素酶活力。     

烟台海域一株中度嗜盐芽孢杆菌YTM-5的鉴定及其耐盐机制研究

从山东烟台近海盐场泥样中分离得到菌株YTM-5,该菌株能在1%～15%NaCl的培养基中生长,最适宜生长条件为：3%NaCl,温度为37℃,pH值为8。经过形态学观察、生理生化特性分析及16S rDNA序列测定,鉴定该菌株为芽孢杆菌Bacillus。高压液相色谱分析表明YTM-5菌体内含有相容性溶质四氢嘧啶,其含量随培养基内NaCl含量的增加而增加,当NaCl含量达到7%以上时,一直维持较高的水平,以稳定此逆境下的渗透平衡。该菌株的发现为开发烟台海域海洋微生物资源及相关抗盐基因的利用奠定了基础。     

一株菲降解菌的生长特性及其对荧蒽和芘的降解能力

 研究了一株固氮螺菌属(Azospirillum)的菲降解菌PE1501 1在不同培养条件（温度、初始pH值、菲初始浓度、共基质）下的生长特性,并初步考察了该菌株在液体培养基和土壤中对4环PAHs—荧蒽和芘的潜在降解能力。结果表明,在含菲50 mg/L的无机盐液体培养基中,该菌株的最适生长温度为30℃;偏酸性环境更有利于菌株生长,液体培养基初始pH 5.0时菌株生长最好;该菌株能耐受菲的初始浓度超过200 mg/L,但菲初始浓度较高时菌株生长出现较明显的延迟期;添加乙酸、溶解性富里酸或溶解性胡敏酸作为菲的共基质对菌株生长有短暂的促进作用;在液体培养基中菌株能以菲或荧蒽为唯一碳源和能源充分生长,并对荧蒽有一定程度的去除能力,但对芘的降解能力很低;将该菌株接种到灭菌污染土壤中,可有效提高菲、荧蒽或芘的去除效果。     

一株耐高温高矿化度的芽孢杆菌CQ11 及其对原油的乳化和降解性能

以高温高盐油藏环境中筛选出的一株芽孢杆菌Bacillus kokeshiiformis CQ11 为对象,研究该菌株的耐盐、耐温以及对酸碱的耐受性;研究该菌株产生的乳化剂的特性,以及它对原油的作用特点. 结果表明:该菌株能够在盐度4%-8%、pH 7-9、温度45-65 ℃环境中良好生长,它产生的糖蛋白类生物乳化剂具有乳化活性高,能耐受一定的高温,不受高盐、酸碱影响的特性. 菌株CQ11 的生长特性和产生的生物乳化剂与Geobacillus 属的更为相似. 该菌株具有高效乳化原油的应用潜力,可以应用于高温高盐油藏微生物提高石油采收率.     

极端嗜热硫杆菌浸出黄铁矿

为了探讨极端嗜热菌在高铁、高酸和高温条件下生物脱硫的可行性,采用从腾冲热海酸性温泉分离出的一株新型极端嗜热硫杆菌开展了四组不同初始pH值条件下的黄铁矿生物柱浸实验.该菌株能耐受pH值为0.58、全铁质量浓度为38.9 g.L 1的高酸高铁环境,同时维持580～640 mV的较低电位.初始pH值为2时,浸出28 d后黄铁矿浸出率达到最高为17.8%.生物浸出时,菌株生长依次表现出较明显的迟缓期、对数期和稳定期,且降低初始pH值会延长其到达稳定期的时间.此外,70℃高温和全铁质量浓度为38.9 g.L 1的高铁体系能促进生成黄钾铁矾和少量单质硫沉淀,而菌株能在pH值小于0.9时将大部分S0氧化为SO24.     

氮离子注入选育耐酸性α-淀粉酶产生茵诱变效应的研究

利用低能（30keV）氮离子注入中温中性α-淀粉酶产生菌枯草芽孢杆菌BF7658，研究对其产耐酸性α-淀粉酶的诱变效应结果表明，BF7658菌株存活率曲线是典型的“马鞍型”剂量-效应曲线，在“马鞍型”区域对应注入剂量50×10^14-100×10^14ions／cm^2下具有较高的突变率．通过诱变筛选到一株最适作用pH为5．0，较出发菌株的最适作用pH偏低一个单位的突变株，编号TUST743．该突变株产酸性α-淀粉酶的酶活为343U／mL．该酶在DH4．5和4．0条件下的相对酶活为61％和38％，说明此突变株所产酸性α-淀粉酶对低pH有较好的耐受性．经连续传代实验，表明该菌株遗传性质稳定、     

一株广谱抗菌活性菌株的鉴定及生物学特性研究

从湛江湖光岩世界地质公园的火山岩石中分离到一株具有广谱抗菌活性的菌株,命名为菌株HGY25,该菌株对多种食品致病菌均有较强的抑制作用。通过形态学观察、生理生化指标测定、16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。对菌株部分生物学特性研究表明:其生长的最适pH值为7.0,最适生长温度为37℃。     

一株贝莱斯芽孢杆菌的生长特性及抑菌活性研究

从自然发酵海洋鱼酱油中分离得到了一株具有多种蛋白酶活性与糖酶活性的贝莱斯芽孢杆菌SW5菌株,为探究贝莱斯芽孢杆菌SW5的抑菌特性,研究了SW5菌株的生长及生理生化特性,验证了SW5菌株发酵上清液对食品中多种常见病原菌的抑制能力;并利用液相色谱-质谱联用技术鉴定了其中的抑菌物质。结果表明:菌株SW5在35℃、pH值5时生长最快,对于亚胺培南、头孢曲松等β-内酰胺类抗生素敏感。菌株SW5的发酵上清液具有明显的抑菌活性,上清液经过浓缩后抑菌效果显著增强。TOF-MS分析表明,发酵上清液中含有的抑菌物质为表面活性素、山茱萸苷A、氨基糖苷类抗生素庆大霉素与异帕米星、链霉菌素类抗生素达福普丁。研究结果以期为菌株SW5的进一步开发利用提供一定的理论基础。     

高效微生物絮凝剂产生菌BJ-Ⅰ的筛选鉴定及絮凝特性研究

从活性污泥中筛选出1株高效微生物絮凝剂产生菌BJ-Ⅰ,其絮凝率达87．6％．通过生理生化分析及16S rDNA序列鉴定该菌株为短芽孢杆菌（Bacillus brevis）．该菌产絮凝剂的最适碳源和氮源分别为20g/L的葡萄糖和2．0g／L的蛋白胨;适宜的初始pH和培养温度分别为7．0和30℃;在培养基中添加0．5g／L的Mg^2＋有利于菌体生长,但对絮凝剂合成无影响．对该絮凝剂的特性研究结果表明：菌液投放量3％、pH值在5．9、温度为60℃条件下絮凝效果最好,加入浓度为8％的Ca^2＋可显著提高其絮凝活性．实验证明,该菌起絮凝作用的物质存在于发酵液中,主要成分为杂多糖．     

一株源于煤矸石的T.f菌分离及其生理特性

从煤矸石中分离获得一株氧化亚铁硫杆菌(T.f菌),测定培养时间、温度、pH值和接种量对菌株的生长代谢及氧化二价铁的影响,探讨菌株的生理生化特性。结果表明,该菌株是革兰氏阴性菌,可以利用亚铁、单质硫和葡萄糖生长,且在亚铁葡萄糖混合培养基中也能生长,但不能利用蛋白胨生长;该菌株为嗜酸菌,其最适pH值为2.0～2.5,最适温度为30℃,Fe2+的氧化率最高达93%。     

耐酸性硫酸盐还原功能菌株WF83的分离鉴定及生长特性研究

运用Hungate厌氧技术,从某酸性底泥中分离到一株耐酸且具有硫酸盐还原功能的菌株WF83,采用形态以及16SrRNA基因序列分析手段对其鉴定,并对WF83的主要生长因素(pH和温度)进行研究.结果表明,菌株WF83为革兰氏阴性菌,杆状,具有硫酸盐还原功能,产H2S,兼性厌氧;与Enterobacter sp.的同源相似水平达99%,初步鉴定该菌株可能为Enterobacter属.生长条件试验显示,该菌株属中温菌,最适宜生长温度为22～35℃,且具有较宽的pH生长范围(5.0～9.0),在pH5.0时的细胞生长水平与pH9.0时基本相同,相对于已经报道的硫酸盐还原菌,其表现出较强的耐酸性.     

降解秸秆功能菌的筛选及特性研究

通过初筛、复筛,从稻草腐烂垛土壤中分离出一株降解秸秆能力较强的菌株.经形态研究后,初步鉴定该茵株属于木霉属,命名为菌株JL01,并对其进行生理特性研究.结果表明,菌株JL01能耐受的最高温度为38℃左右、对NaCI耐受度为16%左右、对酒精的耐受性最高为18%左右、pH值在4-9均能生长.     

一株高效脱氮磷菌的筛选及其特性的初步研究

从活性污泥中筛选出高效脱氮除磷菌,并进行分类鉴定,同时研究了不同pH和接种量对生长的影响.通过聚磷菌的富集培养、缺磷和富磷培养的筛选、PHB和异染颗粒染色实验进行鉴定,并通过除磷除氮实验、形态学和生理生化实验进行初步研究,通过16S rRNA进行分子鉴定.筛选得到一株高效脱氮除磷菌.该菌株在pH5~10之间均能正常生长,最佳生长pH为7.接种量在10%时生长效果最好,其中对氮磷的去除率分别达78.3%、87.8%.该菌株可以同时对氮和磷有较好的去除效果,通过形态学观察、生理生化试验和16S rRNA基因序列分析,构建系统发育树,初步鉴定为肠杆菌属.     

三唑磷降解菌的筛选、鉴定及其系统发育分析

从长期施用有机磷农药的土壤中,以三唑磷为唯一碳源和能源,采用逐渐加量的驯化方式,分离纯化到2株对三唑磷有较好降解能力的细菌,命名为TAP-W和TAP-R。其中TAP-W菌革兰氏染色阴性,能够在30℃～40℃范围内和pH6.0～9.0范围内良好生长,其最适生长温度为35℃,最适pH为7.0。TAP-W菌在含0.1%三唑磷的无机盐培养基中（三唑磷浓度400mg/L）振荡培养72h后,对三唑磷降解率最高,达到65.9%。根据TAP-W菌株的形态特征,生理、生化特性和系统发育分析,初步鉴定其为假单胞菌属（Pseudonmonas）细菌。     

温度及pH条件对乳酸菌生长影响的研究

以MRS琼脂培养基和BCP培养基为载体，通过目测茵液浑浊度及生长状态，测定菌液OD600值和培养终点时的pH值，对从乳制品中分离出的乳酸茵的生长温度及pH值进行了研究．结果表明，在不加缓冲液的培养基中，在pH为6．5～8．5、38℃培养时，所有茵株生长良好．当环境条件超出这一范围时，乳酸茵生长受到抑制．从OD600值可以看出，实验分离到的10株茵最适pH都在6．5左右，最适生长温度在38℃左右，但pH值与温度的范围在各茵株间略有差异．     

黄磷废水处理系统中氰降解菌的筛选

首次对含有氰化物的黄磷废水进行了氰降解菌筛选优化,共得耐氰菌20株,其中有9株的降氰率在90％以上,且AB2001003菌株降氰率在97.1％以上.该菌能在72 h内使含CN~-50mg·L~(-1)的黄磷废水降至0.5 mg·L~(-1)以下,达到国家一级排放标准.该菌的最佳生长pH7.7,最佳温29℃.     

降解苯并[a]芘的Bacillus pumilus strain Bap 9菌株的分离、鉴定与降解特性

从长期受烧烤影响的土壤中,分离筛选出一株能利用苯并[a]芘作为唯一碳源和能源的高效降解菌Bap9,通过16S rRNA基因序列分析和部分生理生化特征分析,鉴定为Bacillus pumilus.摇瓶试验结果表明,菌株Bap9能在20d内将40mg/L的苯并[a]芘降解27.3%.通过对OD600和苯并[a]芘残留浓度的检测分析,考察了pH值、接种量和装液量对菌株生长和降解性能的影响.结果表明,菌株在pH值为6.0—9.0的条件下均能生长并能降解苯并[a]芘,降解的最适pH值为8.0,最佳接种量为5%,最佳装液量为10ml/50ml.     

高效降解废弃蓖麻基润滑油降解菌的分离筛选 及特性研究

从内蒙古某蓖麻榨油厂排污口采样,分离筛选出10株能降解废弃蓖麻基润滑油菌株,其中T-9菌株降解润滑油的能力较强,该菌株最适降解pH值为5.0,降解温度30℃,在1%～5%的NaCl中能较好生长.通过菌落形态与生理生化实验,初步鉴定该菌株为假单胞菌属(Pseudomonas).在润滑油质量浓度为10 g/L,初始pH值为5.0,180 r/min,30℃下培养7 d后,采用改进的CEC-L-33-A-93方法测得其对废弃蓖麻基润滑油的降解率为72%.采用GC/MS对降解产物进行分析,测得其对废弃蓖麻基润滑油降解率为80%,该菌株具有良好的蓖麻基润滑油降解能力.     

长白山温泉中一株新高温菌的筛选及其特征

从长白山上一个温泉周围的土壤中分离、 纯化出一株高温菌CW₂. 分离出的菌株CW₂为革兰氏阳性, 在生长过程中细菌细胞的形态有球杆的变化, 在对数生长期的初期细胞是直杆或者弯杆状, 大多数单生, 少数成对或者成不连续的链状, 到恒定期变成类球形细胞. 菌株CW₂有芽孢、 荚膜、 鞭毛、 运动性, 无伴 胞晶体, V.P.实验呈阴性, 能降解淀粉, 不能降解 纤维素, 兼性好氧, 生长的pH值为5～11、 温度30～60 ℃; 最适生长pH值为7.5、 温度 55 ℃. 菌落初形成时是乳白色边缘整齐的圆形, 后来就会随机向3个方向发展, 最终形成不规则圆形菌落、 花瓣形菌落或者扁平扩散形菌落.     

3,5-二硝基水杨酸降解菌的分离鉴定及生长条件初探

从污染的土样中分离到一株高效降解3,5-二硝基水杨酸的菌株E-2,它能够在以3,5-二硝基水杨酸为唯一碳源和能源的无机培养基上生长.根据菌株E-2的形态特征及生理生化反应特征,初步鉴定为盐芽孢杆菌属(Halobacillus Spring et al.).研究表明:此菌能以3,5-二硝基水杨酸为唯一碳源进行生长,最适合浓度为0.05%,pH值为8.0, 温度为30℃,培养5天后降解率为85%.