黑色素瘤模型的建立与评价

为了快速有效地进行在体药物筛选,研究了以小鼠黑色素实体瘤组织中的原代细胞构建黑色素瘤模型的方法。从荷黑色素瘤小鼠的组织中提取原代肿瘤细胞,与体外培养的B16细胞通过皮下注射分别植入两组C57BL/6小鼠体内,考察两组小鼠肿瘤显现时间和生长速度。结果表明：当接种浓度为5.0×10⁶个/ mL、每只0.2 mL时,小鼠黑色素瘤原代细胞和体外培养的B16细胞成瘤率分别为100%和80%,且小鼠右前肢肿瘤(大小约4 mm³）出现时间分别约在第3天和第8天。紫杉醇对两种模型的初步评价显示,与体外培养的B16细胞模型相比,原代B16细胞模型是体内筛选和评价特定化合物抗肿瘤活性的一种可行而有效的方法,成瘤时间较短、成瘤率高,所得实验数据误差也较小。模型的建立为相关药物评价模型的开发研究提供了一条可借鉴的新途径。     

血管生成抑制剂药物筛选模型的研究进展

在新药的研发中,药物筛选是必不可少的一个重要的环节,而如何建立有效的评价标准和实验模型是这一过程的关键。近年来,国际上一些体内外血管生成模型相继从分子、细胞、组织器官和整体水平上建立。     

对农药多噻烷经啮齿动物体内代谢后产物的三种分离方法效果的比较

本文以大鼠原代肝细胞为体外代谢实验模型,通过薄层层析(TLC)、高压液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC)三种分离分析技术,对新型农药多噻烷在大鼠肝细胞代谢后产物进行分离,比较了三种方法的分离较果。结果表明,GC的分离效最佳,HPLC次之,而TLC的分离效果最差。     

斑马鱼模型在药物早期安全性评价中的应用

在药物研发领域,建立经济、有效的药物早期安全性评价技术已成为当前国内外的迫切需求。斑马鱼作为常用的三大模式动物之一,是一种理想的药物早期安全性评价模型。采用该模型对新药进行早期安全性评价可以提高药物早期毒性预测的可靠性和灵敏度,缩短新药研发周期,降低新药研发成本,提高新药研发成功率。本文综述了斑马鱼模型在药物早期安全性评价,如一般毒性评价、发育毒性评价、神经毒性评价、器官毒性评价、生殖毒性评价等中的作用。随着生物与医药技术的发展,斑马鱼在药物研发的早期安全性评价领域将发挥更大的作用,并推动药物研发的进程。     

药物开发软件Catalyst及其在计算机辅助药物设计中的应用

计算机辅助药物设计(CADD)是一门多学科交叉的边缘学科,在新药研发,特别是在先导化合物的发现和优化过程中发挥着越来越重要的作用。Catalyst是一种基于药效团模型的综合性药物开发软件。本文着重介绍了Catalyst软件的基本功能及其在新药筛选中的应用。     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2抑制剂高通量筛选模型的建立和应用

 为了建立体外蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2抑制剂的高通量筛选模型,筛选潜在的SHP2抑制剂,通过应用大肠杆菌系统克隆表达GST-SHP2 融合蛋白,经过GST-Sepharose 亲和层析分离得到纯化的GST-SHP2 蛋白,建立384 孔板的高通量筛选模型,对48000个有明确结构的小分子化合物进行体外筛选,筛选出75个活性化合物对SHP2的抑制作用大于50%,确定3个化合物具有较高的抑制活性。该筛选模型灵敏、稳定,对SHP2抑制剂药物研发打下了基础。     

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2抑制剂高通量筛选模型的建立和应用

为了建立体外蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2抑制剂的高通量筛选模型,筛选潜在的SHP2抑制剂,通过应用大肠杆菌系统克隆表达GST-SHP2融合蛋白,经过GST-Sepharose亲和层析分离得到纯化的GST-SHP2蛋白,建立384孔板的高通量筛选模型,对48000个有明确结构的小分子化合物进行体外筛选,筛选出75个活性化合物对SHP2的抑制作用大于50%,确定3个化合物具有较高的抑制活性。该筛选模型灵敏、稳定,对SHP2抑制剂药物研发打下了基础。     

抗疟疾药物研究进展

由于疟原虫对传统抗疟疾药物出现耐药性问题,导致感染疟疾的人数居高不下,仅在2019年全球就有超过2亿人感染疟疾.疟原虫的耐药性问题给消除疟疾带来了巨大的挑战,同时也促使新药的研发加快脚步,目前已有多项抗疟疾新药进入临床试验阶段.从传统抗疟疾药物、利用不同方法筛选的抗疟疾新药以及新发现的抗疟疾药物靶点几个方面综述抗疟疾药...     

中国新药开发“新贵”

“药明康德”目前主要是利用组合化学和现代药物化学技术．结合计算机辅助药物设计(CADD)和高通量生物活性筛选技术．为客户从事新药研发、药物模板和小分子化合物库的设计合成。“组合化学”作为当今有机化学和药物化学领域中的一项新技术，它的出现在研究观念上打破了传统的统一合成、逐一纯化、逐一筛选的药物研发模式。其强大的优势即在于能够“多、快、高、省”地合成大量结构各异的分子，并进行快速筛选以寻找和优化先导化合物，从而大大加快了新药的开发进程，节省了新药开发成本。     

克澳宁抗乙型肝炎病毒体外实验研究

该项目以2.2.15细胞株为模型,对克澳宁药物作了体外抗HBV效果的实验研究,结果表明,此药在体外具有明显的抑制HBsAg、HBeAg作用,治疗指数分别为3.75和2.3,支持此药有抗HBV活性,为临床应用克澳宁药物治疗乙型肝炎提供了可靠的科学依据.研究中所应用的细胞模型是一种简单、经济、客观的药物评价方法,可筛选抗HBV的药物,对临床有一定的指导意义.     

肝细胞原代培养研究综述

对国内外肝细胞培养研究作出综述.首先介绍了分离肝细胞的各种方法及各自的优缺点, 重点对各种酶分离技术进行了比较.其次阐述了肝细胞的纯化方法和生物学性状检测,最后综述了 影响肝细胞体外培养的因素.     

抗血管生成药物筛选及其新模型——斑马鱼

目前抗血管生成疗法成为抗肿瘤研究的热点之一,抗血管生成药物筛选也已成为发现新型抗肿瘤药物的重要手段。筛选模型在药物筛选过程中起着关键性作用。本文评述了筛选抗血管生成类药物常用的分子、细胞、组织器官和整体动物等水平的筛选模型,并介绍了新的活体动物模型——模式生物斑马鱼。     

骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化的研究进展

摘要: 由各种因素导致的重症肝病的终末治疗的最好手段一直是原位肝移植,但长期以来肝供体的缺乏和免疫排斥引起的一系列问题极大地限制了该手术的运用,同时,在肝脏相关药物的筛选中,原代肝细胞难于培养且易在培养过程中变异,而随着骨髓间充质干细胞研究的深入,越来越多的证据表明骨髓间充质干细胞具有向肝细胞分化的潜能。因此,骨髓间充质干细胞诱导分化而成的肝样细胞在再生医疗和药物筛选领域具有较好的运用前景,本文就间充质干细胞的分离培养及其生物学特性,肝样细胞的诱导培养条件,生物学特性及其运用前景加以综述。     

Effects of 2,3,7,8-TCDD and benzo[a]pyrene on modulating vitellogenin expression in primary culture of crucian carp （Carassius auratus） hepatocytes

Vitellogenin (Vtg) is the precursor of yolk protein. Its expression and secretion are estrogen-regulated and are crucial for oocyte maturation. An in ritro xenoestrogen screening model was established by measuring Vtg induction in cultured primary hepatocytes from crucian carp. Vtg production was detected by biotin-avidin sandwich ELISA method while Vtg and cytochrome P4501A1 (CYP1A1) mRNA induction were measured by semi- quantitative PCR-primer dropping technique. Vtg and Vtg mRNA were dose-dependently induced by diethylstilbestrol (DES, 0.2-200 ng/mL) in hepatocytes of crucian carp. Co-treatment of the DES-induced hepatocytes with either 2,3,7,8-TCDD (TCDD, 0.1-4 pg/mL) or benzo[a]pyrene (B[a]P, 5-1000 ng/mL) resulted in a reduction of Vtg production and an increment of CYP1A1 mRNA expression both in a dose dependent manner, indicating the anti-estrogenic effects of the compounds. However, at lower tested concentrations, TCDD (0.1, 0.2 pg/mL), B[a]P (5 ng/mL)seemed to have a potentiating effect on Vtg expression and secretion, although by their own these compounds had no observable estrogenic effect on Vtg induction. Tamoxifen (a selective estrogen receptor modulators, 1 nmol/L-1μmol/L),and β-naphtho-flavone (β-NF, an aryl hydrocarbon receptor inducing compounds, 2.5-1000 ng/mL) also were employed to study the possible interactions in DES-induced Vtg expression. In co-treatment of the DES-induced hepatocytes with β-NF or tamoxifen, the decrease in Vtg production did parallel induction of CYP1A1 for β-NF, but tamoxifen inhibited Vtg induction did not parallel induced CYP1A1 expression in all test concentrations. On the contrary, it was found that in co-treatment of the TCDD-induced hepatocytes with DES, TCDD induced CYP1A1 mRNA production was inhibited by DES also. These results implicated a possible cross talk between estrogen receptor- and aryl hydrocarbon receptor-mediated pathways in the hepatocytes.     

地塞米松治疗LPS诱导急性肺炎模型小鼠病理学评价方法的建立

目的用地塞米松作为阳性药物,对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导急性肺炎小鼠模型建立的病理学评价方案进行验证,以期获得炎症和感染性疾病廉价易行的初步药效学评价模型。方法使用鼻腔吸入法制备小鼠LPS诱导急性肺炎模型,利用不同时间点肺炎模型小鼠肺损伤HE染色结果建立病理学分级标准,使用地塞米松作为阳性治疗药物对病理学评价方法进行验证。结果对LPS吸入后不同时间点的小鼠进行全肺取样和病理学检测,建立了0—5级肺组织损伤病理学分级评价标准,采用该标准对地塞米松作为阳性治疗药物的治疗效果进行评价,与LPS对照组相比差异显著。结论获得了针对LPS诱导急性肺炎小鼠模型建立的病理学评价方案,该方案以地塞米松作为阳性对照药物,可以用于抗炎药物的初步筛选和药效学研究。     

子囊菌的分离、分布及其生理活性的研究

采用子囊菌的选择性分离方法分离土壤样品,分离得到的子囊菌比例为常规稀释法的2.8倍;对子囊菌在河北、广西、云南等地的分布情况进行初步统计,云南省的子囊菌资源较丰富;应用多个药物筛选模型对分离得到的真菌进行筛选,在Caspase-3模型中,子囊菌的活性菌株是其他真菌的2.3倍.     

高产胞外蛋白酶毛霉的筛选及酶学性质研究

通过平板初筛和发酵复筛从保藏的16种毛霉菌株中筛选出了四株高产胞外蛋白酶毛霉菌株,分别为3.4906、3.4909、3.4943和3.5009。筛选过程中发现平板筛选法用于毛霉筛选不易观察,需改进方法,发酵法仍是最直接有效筛选的方法。对四株毛霉所产蛋白酶酶学特性研究发现,在温度耐受性方面,3.4943和3.4906的蛋白酶耐温性强;在反应温度方面,3.4906和3.5009的最适反应温度较低,3.4943和3.4909的最适反应温度较高;在反应p H方面,4种毛霉所产蛋白酶的最适p H在6.0~8.0范围;在受Na Cl浓度影响方面,3.4943的酶活力受Nacl浓度影响较大,3.4909的酶活力受Na Cl浓度影响最小。各菌株的酶学特性存在差异,根据发酵食品的工艺特性选择适宜的菌株。     

中药经皮给药制剂的研究进展

中药经皮给药制剂因无首过效应、血药浓度稳定、毒副作用小、疗效好、使用方便等优点已成为药物制剂开发研究的热点和重点之一.从中药经皮给药制剂新剂型、促渗透药剂学方法以及体内外评价3个方面综述了中药透皮吸收的研究进展,简要分析了中药透皮吸收中存在的问题,为中药透皮吸收制剂的进一步开发应用提供了思路和方法.