食品蛋白质中血管紧张素转化酶抑制肽的研究

血管紧张素转化酶I在人体血压调节过程中起重要的生理作用．一方面,它使无活性的血管紧张素I转化为升压物质——血管紧张素Ⅱ,另一方面它能使降压物质——缓激肽分解成失活片段．源于食品蛋白质中的降压肽有明显的降血压作用,这些肽又是通过抑制血管紧张素转化酶的活性起降血压作用．综述血管紧张素转化酶抑制肽的降血压机理和研究现状,展望其前景．     

水产胶原蛋白肽功能活性及其制备工艺研究进展

概述了水产胶原蛋白及其肽的特点和制备技术,并阐述了水产胶原蛋白肽的多种功能特性,包括抑制血管紧张素转化酶、抗氧化、免疫调节、抑制酪氨酸酶及其它活性,揭示了其在食品、化妆品及医药制备等领域的广阔应用前景.     

文冠果降血压肽的制备及其活性研究

以文冠果蛋白为研究对象,采用酶解法制备文冠果蛋白酶解肽,并对其体外抗高血压活性进行研究。以水解度为指标确定酶解条件。蛋白水解物经超滤得到分子量为1k Da,1~5 k Da和5 k Da 3个区段的多肽组分,测定其对血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)的抑制率。最佳酶解条件为:底物质量浓度40g/L,加酶量8%(质量分数)(碱性蛋白酶),酶解时间175 min,酶解温度55℃和酶解p H 9.0,此条件下水解度最高为22.97%;3种多肽组分中1k Da的ACE抑制率最高为83.43%,其半抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.394 mg/m L。文冠果蛋白酶解多肽具有显著的体外抗ACE活性,可作为降血压肽的开发原料。     

一种大蒜蛋白酶解物系列产品及其制备方法和用途

江苏大学的“一种大蒜蛋白酶解物系列产品及其制备方法和用途”被授予发明专利．该发明涉及植物蛋白的开发利用领域，以大蒜脱除大蒜油或大蒜素之后得到的包含大蒜蛋白质的残余物为原料，通过加蛋白酶采用酶法水解，制成富含活性肽的蛋白酶解物．采用单酶水解和双酶水解的方法，可以在温和的条件下，将大蒜残余物如干渣粉中蛋白质酶解成2—10肽的活性多肽和氨基酸类物质．该酶解液的制备方法包括：大蒜干渣粉碎→酶解→灭酶→离心→过滤→超滤→酶解物．酶解物通过后续加工可以制成不同的液剂和粉剂制品．该酶解物可以通过对血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）的抑制作用用于降低高血压患者的血压，同时具有提高免疫、调节血脂以及抗衰老的功能．     

苍术提取物对血管紧张素转化酶的抑制活性

通过苍术提取物对血管紧张素转化酶抑制活性的有效成分或有效部位的分析研究,发现苍术残渣的抑制活性最强,其抑制率为95．91％;表明苍术残渣是苍术提取物对ACE的抑制活性部位,而指纹图谱是控制其品质的重要依据。     

条斑紫菜ACEI肽结构鉴定与性能试验

对条斑紫菜蛋白酶解获得的血管紧张素转换酶抑制肽(ACEI)进行纯化和结构鉴定,并研究了条斑紫菜ACEI肽体外贮存稳定性和对原发性高血压大鼠的降血压作用.结果表明:通过2步反相高效液相制备色谱纯化得到2种单一组分ACEI肽,经液质联用质谱分析肽序列分别为Cys-Ser-Asn-Arg和Pro-Cys-His-Trp,二者对血管紧张素转换酶半数抑制浓度分别为24.71和5.38 μmol·L-1;条斑紫菜ACEI肽不耐高温,在中性或酸性条件下较稳定;用分子质量小于3 ku条斑紫菜ACEI肽组分对原发性高血压大鼠灌胃后有显著降血压效果,且降血压幅度随灌胃剂量增大而提高.     

基础知识与应用相结合的综合性实验教学实践

为培养医学院学生动手能力和创新能力,训练学生的科研思维以及严谨的科研素养,血管紧张素转化酶基因多态性分析综合性实验被引进课堂。学生通过提取自己口腔粘膜上皮细胞基因组核酸、经多聚酶链式反应扩增血管紧张素转化酶基因中具有多态性的片段、凝胶电泳检测分析这一系列实验,得到自己的基因诊断结果的同时,全面、深入、系统地学习了这些常用技术的原理和方法,了解了其在临床研究中的应用,加深和巩固了学习的知识,激发了学生的学习兴趣和主动性,为将来的学习和科研打下良好的基础。     

血管紧张素转化酶的分光光度法测定及临床意义

血管紧张素转化酶（angiotensinconvertionenzyme,ACE．Peptidyldipeptida。;EC3．4．15．l）也叫漱酶Ⅱ。该回裂解血管紧张素1的C一末端的组氨酸一L一亮氨酸而产生8肽血管紧张素11。ACE是一种构成血管内皮细胞的膜性糖蛋白,属于内皮细胞的外分泌酶,在血管紧张素D的产生及援激肽的分解代谢中均起到关键性作用。近年来由于几项研究显示ACE基因可能参与了心血管疾病的发生而引起人们对此酶的兴趣。因此,建立一种灵敏准确的检测方法将会对心血管疾病的研究、早期诊断及预防均有重要价值。l测定方法1．l概述在以往报道的关于血清ACE…     

内皮细胞生长抑制素：抗肿瘤血管生长的细胞因子

综述了内皮细胞生长抑制素的结构和功能,探讨了其与胶原蛋白ⅩⅢ的关系以及抗血管生成,抗肿瘤生长和转移的可能机理;展望了其在肿瘤诊断、治疗等方面的应用前景。内皮细胞生长抑制素是胶原蛋白ⅩⅢC-末端的酶解产物,在血管生成过程中起负调控作用,通过阻断血管生成的信号并诱导内皮细胞的凋亡而特异性地抑制内皮细胞的迁移和新血管的生成,从而抑制肿瘤的生长和转移,其抗血管生成的机制目前尚未完全清楚,研究显示它是一个结合紧密的球状折叠分子,一面富含精氨酸残基,是肝素的结合位点,推测与抗血管生成的机制有关,内皮细胞生长抑制素作为抗肿瘤的内源性药物,具有高效性,低毒性,无耐药性等优点。     

ACE基因插入／缺失（I／D）多态性及临床意义

血管紧张素转化酶（angiotensin—converting enzyme,ACE）通过肾素一血管紧张素系统RAS（retrain—angiotensin system）和激肽释放酶一激肽系统,调节血压体内的水电解质平衡以及血管内皮发育,其水平受遗传因素影响。ACE基因插入／缺失（L／D）多态性与血浆ACE水平密切相关,因而对高血压,冠心病等心脑血管疾病的发生发展具有重要影响。     

酶改性技术研究

酶具有催化效率高、催化专一性强等显著特点,然而,酶的活力和稳定性往往不能满足应用的要求.为了改进酶的催化特性,笔者及其所在课题组20多年来长期进行酶分子修饰、酶固定化、酶非水相催化、酶定向进化等酶改性技术的研究,发现通过酶的改性,可以显著改进酶活力和稳定性.文中对笔者及其所在课题组在酶改性技术方面的研究成果和进展作了介绍.     

重组降血压肽多肽序列的设计及表达系统构建

通过分析降血压肽结构与功能的关系,设计并合成5条降血压肽序列,通过活性测定以及体外消化试验,确定P3（六肽）为理想降血压肽,为实现该小肽在大肠杆菌中的表达,经特定酶切位点将其串联为6拷贝的融合多肽,将相应的基因序列克隆至表达载体pGEX-4T-2并转化至宿主茵Escherichia coli BL21中,双酶切、PCR以及测序结果均表明成功构建了重组质粒pGEX-4T-2-ACEIP。     

海洋极端微生物和极端酶分子生物学研究

分离自海洋极端微生物的极端酶具有超常的生物学稳定性，能够在极端温度、pH值、压力和离子强度下表现出生物学活性，因此海洋极端酶为生物催化和生物转化提供了良机。新的极端物种的发现、基因组序列的确定及基因工程技术的应用，加快了发现和制各新酶的进程。蛋白质工程和定向进化技术进一步改善酶的活性和特异性，促进了海洋极端酶的工业应用。对极端酶的分子生物学研究加深了人们对酶稳定性机制的理解，丰富了分子进化理论。     

固定化乳酸脱氢酶的催化性质研究

研究了固定化乳酸脱氢酶(LDH)的制备和催化性质,讨论了戊二醛体积分数、酶的偶联时间、pH值对酶固定化的影响.对游离酶和固定化酶催化性质的研究结果表明:酶促反应最适pH分别为9.2和10.2,最适温度分别为51℃和50℃,米氏常数分别为16.2 mmol/L和0.7 mmol/L.与游离酶相比,固定化酶的活力稳定性更佳,有更好的贮存稳定性和复用性.     

响应面法优化酶解鱼鳞制备ACE抑制肽的研究

鱼鳞是鱼类加工的下脚料之一,含有丰富的蛋白质和矿质元素等营养物质,是非常好的可利用生物资源. 文中研究了碱性蛋白酶酶解鱼鳞制备ACE抑制肽的优化工艺. 以ACE抑制率为指标,在酶解温度、酶解pH、加酶量、底物质量浓度等条件下先进行单因素实验,在此基础上运用响应面法优化碱性蛋白酶酶解鱼鳞制备ACE抑制肽的工艺条件. 结果表明:在加酶量61%(约12 000 U/g)、pH 89、温度547 ℃的条件下酶解2 h,ACE抑制率理论值为8536%,实际酶解物的ACE抑制率为862%,相对误差为091%.     

Structure and catalytic mechanism of the human histone methyltransferase SET7/9

Acetylation, phosphorylation and methylation of the amino-terminal tails of histones are thought to be involved in the regulation of chromatin structure and function. With just one exception, the enzymes identified in the methylation of specific lysine residues on histones (histone methyltransferases) belong to the SET family. The high-resolution crystal structure of a ternary complex of human SET7/9 with a histone peptide and cofactor reveals that the peptide substrate and cofactor bind on opposite surfaces of the enzyme. The target lysine accesses the active site of the enzyme and the S-adenosyl-l-methionine (AdoMet) cofactor by inserting its side chain into a narrow channel that runs through the enzyme, connecting the two surfaces. Here we show from the structure and from solution studies that SET7/9, unlike most other SET proteins, is exclusively a mono-methylase. The structure indicates the molecular basis of the specificity of the enzyme for the histone target, and allows us to propose a model for the methylation reaction that accounts for the role of many of the residues that are invariant across the SET family.     

单分子成像和追踪技术在工业微生物研究中的应用

在单分子工具和技术的迅速发展过程中,单分子荧光显微镜技术脱颖而出,可以高特异性地监测荧光标记的生物分子的时空行为,成为研究生物系统的有力工具。然而,单分子成像和追踪技术在工业微生物研究及酶工程领域中的应用仍处于起步阶段。随着生物工程技术、合成生物学和代谢工程等科学技术的迅猛发展,工业微生物的应用日趋广泛。但是,菌株往往难以在整个培养期间保持最大的生产能力,导致在经济效益上不能满足产业化的需求,成为制约微生物细胞工厂发展的一个瓶颈,对酶学研究提出新的挑战。单分子成像和追踪技术具有直接、准确、实时等监测优点,可以直接在活体生物上进行研究,成功地实现了对单分子酶催化过程的实时监控,发现了多种酶的新单分子行为及反应机制。这些技术有助于各种新型酶、新特性酶、新作用方式酶的研发。本文简述单分子成像和追踪技术的主要特点（以荧光显微镜为主）,总结近年来单分子成像和追踪技术在微生物研究、酶学研究中的应用,及其在工业微生物研究中的应用现状和面临的挑战。这些技术的应用必将促进纳米生物学的发展,推动酶工程改造,提高细胞工厂的生产能力。     

藻红蓝蛋白裂合酶F亚基中色氨酸残基的化学修饰

以N-溴代琥珀酰亚胺作为修饰剂,对藻红蓝蛋白裂合异构酶F亚基中的色氨酸(Trp)残基与酶活性的关系进行了研究.研究表明, PecF的Trp残基均位于分子内部,NBS的修饰导致了酶活性的显著降低,但并未完全失去活性.酶被修饰后的荧光和圆二色谱均发生了变化,为酶的结构和功能间关系研究提供了重要信息.     

计算机辅助蛋白结构预测及酶的计算设计研究进展

随着不可再生资源的日益减少以及化学催化所带来的环境污染问题的日益严重,应用低污染的生物催化技术改造或取代传统化工工艺已经成为可持续发展的研究热点。酶作为一种重要的生物催化剂,具有高效无污染、专一性较强等优点,在化工、医药等领域具有巨大的应用潜力和良好的发展前景。但由于新功能酶的开发速度较慢,使其应用受到严重限制。酶的理性设计是新酶发现的一个重要来源,随着计算机技术的发展,蛋白质结构预测方法和新功能酶计算设计策略得到迅猛的发展,已成为酶功能改造的有力工具和新的研究前沿。本文就蛋白质结构预测方法、新功能酶计算设计方法和策略以及未来发展趋势进行简要介绍和讨论。     

蛋白质中RNA-结合残基预测的随机森林模型

构建了用于预测蛋白质序列中RNA-结合残基的分类模型.在模型的特征提取方面,除了与功能相关的结构特征和序列正交编码信息以外,还提出了一个新颖的特征PSSM-PP.该特征不仅包含蛋白质序列的进化保守特征,还包含与蛋白质和RNA结合有关的氨基酸理化特征.在设计模型时,考虑到样本数据量大的问题,选用了快速的随机森林算法.该预测模型总体预测准确率达到87.02％,特异性达到95.62％,敏感性达51.16％,Matthew相关系数为0.533 6.此外,还构建了RNA结合残基的预测平台.