磁场影响固定化葡萄糖异构酶活性的研究

采用丹麦Novo公司测固定化葡萄糖异构酶 (SweetzymeT)活力的反应体系 ,用半胱氨酸 -咔唑法评价酶的活性 ,研究了磁场在不同条件下对酶活力的影响。实验发现 :在不同磁化时间、温度、磁场强度和pH条件下磁化底物 ,使其活性增加可达 2 8 6 % ,并且具有可逆性 ,但磁化固定化酶或磁场作用于酶—底物反应体系 ,未见酶活力的明显变化。     

磁场对碳酸酐酶的影响

建立了流动注射分析方法 ,评价了碳酸酐酶 (CA)的活性 ,并用此方法研究了磁场对酶催化活性的影响。发现磁场作用使酶活力升高 ,2 10mT下作用 4h ,其活力增加了 17% ;随着磁化时间的延长 ,其磁场效应基本上趋于一致 ,且观察到了磁酶效应的可逆性。实验还发现磁场使酶 -底物反应的活化能降低 ,并对可能机理作了初步探讨。     

法国ELCO种兔体外血清酶的磁化试验

本试验用哈磁化杯磁化ＥＬＣＯ种兔血清５０－１００分钟，立即测定血清淀粉酶（ＡＭＳ）和血清γ－谷氨酰转移酶（γ－ＧＴ）的活性。结果表明：ＡＭＳ酶磁化５０分钟比磁化５０分钟比磁化１００分钟效果显著，与对照组有显著差异；γ－ＧＴ酶磁化１００分钟比磁化５０分钟效果显著，与对照组有极明显差异。     

几种效应物对黑曲霉果胶酶活力的影响

研究了几种效应物对黑曲霉果胶酶活力的影响。结果表明：变性剂脲与SDS对果胶酶活力的抑制作用呈现出浓度效应，0．5mmol／L SDS能使酶活力下降95．9％，5mol／L的脲能使果胶酶活力下降95．6％；三种伯醇和丙酮对果胶酶活力具有抑制作用，15％的甲醇、乙醇、正丙醇和丙酮可分别使果胶酶活力下降18．8％、25．5％、36．1％和84．4％；而乙二醇和丙三醇对酶活力的影响表现为激活效应，15％的乙二醇和丙三醇可分别使酶活性提高22．9％和6．9％；Cu^2＋和Fe^3＋对果胶酶活力的抑制作用呈浓度梯度效应，EDTA对酶活力没有影响，说明果胶酶为非金属酶类。     

秋茄叶缩合单宁对蘑菇酪氨酸酶的抑制机理

研究了红树植物秋茄叶缩合单宁对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力和二酚酶活力的影响和抑制动力学.结果表明秋茄叶缩合单宁不仅可以降低蘑菇酪氨酸酶单酚酶酶促反应的稳定态活力,也可以延长反应的迟滞时间,并具有浓度依赖关系,随着抑制剂浓度增大,稳定态活力下降,迟滞时间延长.当抑制剂质量浓度达33.00μg/mL时,稳定态活力从100%下降到74%,迟滞时间从32.7s增加到72.9s;秋茄叶缩合单宁对二酚酶的抑制也显示浓度效应,抑制效果显著,引起酶活力下降50%的抑制剂质量浓度(IC50)为30.00μg/mL,其对二酚酶的抑制显示可逆的效应,抑制类型为混合型,对游离酶的抑制常数(KI)为25.05μg/mL和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)为46.69μg/mL.本研究揭示了植物秋茄叶缩合单宁作为一种新型酪氨酸酶抑制剂的可能性.     

固定化里氏木霉制备纤维素酶的研究

采用多孔塑料吸附固定里氏木霉（Trichoderma reesei RutC30)菌丝细胞，以硫酸盐纸浆为底物，重复分批发酵生产纤维素酶，滤纸酶活力可达2.4IU.mL^-1，纤维二糖酶活力为0.2IU.mL^-1，分别是游离细胞发酵的1.6倍和2.2倍，固定化菌丝细胞性状稳定，连续使用40d以上，未见酶活力下降，酶解试验表明，固定化细胞生产的酶液对木质纤维原料具有很高的降解效率，当每克底物的酶用量在滤纸酶活力20IU以上时，酶解得率可达90%以上。     

酶活性不可逆改变的底物保护动力学

根据邹氏的酶活性不可逆改变动力学理论,我们创建一种测定微观动力学参数方法判断底物对酶活力是否有保护作用,这对阐明酶的空间结构与功能、酶构象变化与活力变化的关系具有重要的科学意义,应用此法判断猕猴桃蛋白酶(Actinidin)在4mol/l盐酸胍和8mol/l脲的失活底物保护是否存在,实验结果表明:1)Actinidin在4mol/l盐酸胍失活过程受到底物一定程度的保护,2)Actindin在8mol/l脲失活过程底物对它完全保护.以上结果也提示了胍、脲作用机制不尽相同。     

产琼脂糖酶海洋微生物的筛选鉴定及酶学性质研究

从红藻中筛选获得一株能产生明显液化现象并具有较高琼脂糖酶活力的菌株Ag-1,经生理生化实验和16S r DNA序列分析鉴定为弧菌属(Vibrio sp.).酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度为50℃,40~50℃水浴保温1 h可保持68%以上的酶活力;最适反应p H值为8.0,在p H 7.0~8.0保温1 h可保持90%以上的酶活力,在p H 8.0~9.0保温1 h仍可保持70%以上的酶活力,具有较好的耐热性和耐碱性;且该酶对琼脂底物具有高度专一性;K+、Ca2+、Mg2+、Li+和Fe3+对琼脂糖酶活力具有激活作用,Mn2+、Zn2+和Cu2+对琼脂糖酶具有抑制作用.酶反应动力学实验结果表明,该酶的最适底物浓度为8 mg·m L-1,动力学参数Km为0.58 mg·m L-1,vmax为3.29 U·mg-1.     

棒状链霉菌扩环酶R306位点的定点突变

目的:通过对棒状链霉菌的脱乙酰氧基头孢菌素C合酶(DAOCS)C末端R306位点突变,改变酶的活力和底物专一性。方法:利用生物信息学和空间结构分析推测,利用定点突变技术,对DAOCS的C-末端R306位点进行定点突变。结果:将DAOCS的C末端R306位点突变为其它3种性质相异的氨基酸,显示酶的活力和底物专一性都有一定改变。结论:DAOCS的C末端修饰对于提高酶活力或改变酶的底物专一性是一个非常有效的策略。     

丙酮对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力与构象的影响

以丙酮为效应物,研究其对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响,结果表明:该酶的剩余活力随着丙酮浓度增大而呈指数下降,当丙酮浓度达25%,酶的剩余活力仅为20%,说明丙酮对青蟹NA-Gase有明显的失活作用.导致酶活力丧失50%的丙酮浓度为7.5%.在较低丙酮浓度(＜10%)的失活是可逆的反应过程.动力学研究表明,该酶的失活过程属于混合型,并进一步测定游离酶(E)和酶底物络合物(ES)与丙酮的结合常数(K1和K1s),分别为4.06%和10.49%,K1＜K1s,说明底物存在对酶被丙酮的失活作用有一定的保护作用.应用荧光发射光谱研究青蟹NAGase经丙酮微扰后的分子构象变化情况,结果表明:丙酮对酶分子构象有显著的影响,酶的内源荧光强度随丙酮浓度增大而降低,说明酶分子中的生色基团Trp和Tyr残基的微环境发生了变化.     

高压静电场诱变黑曲霉的实验研究

探讨了直流高压静电场对黑曲霉存活率、酶活、诱变率、菌落形态和菌体生长速度的影响.结果表明:高压直流静电场对黑曲霉A3的作用效果极其显著.在同一场强作用下,随着处理时间的增长,相对存活率单调下降;在同一处理时间作用下,随着场强的增大,相对存活率呈非单调性变化.在场强为4.4 kV/cm,处理时间为2 min的条件下,相对存活率最高达到237.5%,正变率最高达到15%,酶活比对照提高15%;在场强为5.6 kV/cm,处理时间为2 min的条件下,相对存活率达到125%,正变率达到8%,酶活最高,比对照提高24%.经高压静电场处理的菌落形态大而饱满,菌体生长速度明显加快.     

AN-g-casein浓溶液在毛细管流动中的末端校正

采用气压式毛细管流变仪，测定了实验室自制丙烯腈－酷素接枝共聚物（ＡＮ－ｇ－ｃａｓｅｉｎ）浓溶液的流变性能。实验结果发现：ＡＮ－ｇ－ｃａｓｅｉｎ浓溶液属切力变稀型非牛顿流体；在实验范围内，毛细管流动中的末端校正系数ｅ随切变速率的提高而增大，当切变速率较高时，ＡＮ－ｇ－ｃａｓｅｉｎ大分子在浓溶液中形成了束状物，拉伸变表受到了限制，ｅ值上升趋于极限；当切变速率较高，毛细管长径比较小时，真实剪切应力仅占表     

在硫氰酸钠浓水溶液中丙烯腈-酪素接枝共聚的研究

采用傅利叶红外光谱表征了在硫氰酸钠(NaSCN)浓水溶液中丙烯腈(AN)、酪素(Casein)均相接枝共聚制得的接枝共聚主产物为AN—g—Casein接枝共聚物,研究了反应时间、单体质量分数、引发剂质量分数、反应温度对接枝共聚的影响,讨论了反应前酪素的溶解条件。     

芦丁和阿魏酸与酪蛋白的相互作用研究

酚类物质与蛋白质的相互作用对富含酚类物质的功能性乳制品的稳定性及生物活性具有重要影响。通过光谱分析及抗氧化活性测定,研究了芦丁和阿魏酸与酪蛋白的相互作用机制。荧光光谱分析发现,芦丁和阿魏酸均能淬灭酪蛋白的内源荧光,淬灭方式为静态淬灭;热力学参数表明,芦丁与酪蛋白作用的驱动力为疏水作用,阿魏酸与酪蛋白作用的驱动力为疏水作用和氢键。紫外-可见光谱和同步荧光光谱表明,芦丁和阿魏酸的加入影响了酪蛋白中酪氨酸和色氨酸残基周围的微环境,从而引起酪蛋白的构象改变。傅里叶变换红外光谱和圆二色谱研究结果进一步表明,芦丁和阿魏酸使酪蛋白的二级结构发生了变化,但没有破坏其二级结构。     

菲律宾蛤仔酶解液脱腥工艺研究

以菲律宾蛤仔为原材料,选用胰蛋白酶对菲律宾蛤仔进行酶解,采用粉末活性炭联合安琪高活性干酵母脱腥,最佳脱腥条件为先添加1.5%的安琪高活性干酵母,30℃发酵反应1 h,离心过滤后再用粉末活性炭脱腥,其添加量为1.0%,温度30℃,时间30 min,pH 4,脱腥液中游离ANN含量为2.878 mg/g,损失率为7.9%,基本上没有腥味,含有酵母所特有的香味,脱腥液颜色比较澄清。     

盐渍对鲍鱼微波真空干燥过程和品质的影响

盐渍是鲍鱼微波真空干燥过程前处理的关键因素. 以不同浓度盐溶液-0, 5%, 7 5%, 10%, 15%和饱和盐溶液-盐渍鲍鱼,在微波功率2 000 W、真空度-80 kPa条件下进行微波真空干燥. 以其微波真空干燥特性、干燥后色泽、复水性及复水后质构特性为指标,考察盐渍对鲍鱼干燥过程和品质的影响. 结果表明：蒸馏水浸泡和盐浓度大于15%的盐溶液盐渍都不利于鲍鱼微波真空干燥的进行和干制后的品质. 当食盐浓度为7 5%~10%时,鲍鱼的微波真空干燥速率明显加快,复水率和复水比均较好,复水后呈现较佳咀嚼性,且色泽为均匀的淡黄色. 综合考虑,经过7 5%盐溶液浸渍24 h后,沸水煮2 min的鲍鱼进行微波真空干燥效果较佳.     

双氰胺钠浸金性能与机理研究

In this work, sodium dicyanamide (SD) was used as a leaching reagent for gold recovery, and the effects of the SD dosage and solution pH on the gold-leaching performance were investigated. A gold recovery of 34.8% was obtained when SD was used as the sole leaching reagent at a dosage of 15 kg/t. In the presence of a certain amount of potassium ferrocyanide (PF) in the SD solution, the gold recovery was found to increase from 34.8% to 57.08%. Using the quartz crystal microbalance with dissipation (QCM-D) technique, the leaching kinetics of SD with and without PF were studied. The QCM-D results indicate that the gold-leaching rate increased from 4.03 to 39.99 ng·cm–2·min–1 when the SD concentration was increased from 0 to 0.17 mol/L, and increased from 39.99 to 272.62 ng·cm–2·min–1 when 0.1 mol/L of PF was used in combination with SD. The pregnant solution in the leaching tests was characterized by X-ray photoelectron spectroscopy and electrospray mass spectrometry, which indicated that Au and (N(CN)₂)– in the SD solution formed a series of metal complex ions, [AuNa_x(N(CN)₂)_x+2]– (x = 1, 2, 3, or 4).     

氨基酸和蛋白质对牛瘤胃细菌生长的影响

用经洗涤的瘤胃细菌稀释液体庆体外作培养，确定不同的氨基酸刺激瘤胃细菌生长的效果。添加或不添加酷蛋白，由各种的氨基酸组成的混合氨基酸对细菌的生长具有刺激作用。不管是否添加酷蛋白或水解酷蛋白，不同组合的氨基酸均不能细菌的生长。当氨作为唯一的氨源时，它对细菌的生长无刺激性。瘤胃细菌的生长与培养基内的碳水化合物含量存在线性函数关系。结果显示，氨基酸和蛋白质对瘤胃细菌的刺激作用，决定于所提供的氨基酸和蛋白质     

用二氧化碳电极测定霉菌537蛋白酶的活性

在霉菌５３７蛋白酶的作用下，酷蛋白发生水解，生成酪氨酸和谷氨酸等组成该蛋白的氨基酸，加入Ｌ－谷氨酸脱羧酶使谷氨酸发生脱羧反应，会释放出ＣＯ２，后者可用ＣＯ２电极进行测定，从而可间接地算出５３７蛋白酶的活性，在蛋白酶活性为２０００－１０００单位范围内，电位的变化值与活性呈现良好的线性关系。     

不同磁场对过氧化氢酶活性及酶促反应的影响

在不同的磁场条件下研究了Nu—Fe—B静磁场对过氧化氢酶活性和反应动力学参数及二级结构的影响．采用磁场强度为0．15T、0．30T、0．45T的静磁场分别处理过氧化氢酶溶液,以曝磁时间为参数,对酶的活性、反应动力学参数、二级结构分别进行测定．结果表明,与对照样相比,处理过的过氧化氢酶活性增大,当作用时间为1h时,活性最大．3个磁场下酶的活性分别增加了18．2％、23．5％和25．8％;用不同的磁场对过氧化氢酶溶液分别作用1h,与对照样相比,随着磁场强度的增加,Km值从0．02785mol／L增加到0．08724mol／L,Vm值从0．03597mol／（L·min）增加到0．09511mol／（L·min）;同时,圆二色光谱测定结果表明磁场处理过的过氧化氢酶的二级结构也发生变化,这可能是由于磁场对过氧化氢酶辅酶中的Fe^3＋影响而引起的．