纳米二氧化钛负载1,4-二羟基蒽醌的机理研究

蒽醌类化合物是天然植物药中具有重要生物活性和药效功能的物质,可用作降血糖、降胆固醇、通便利尿、抗氧化、抗过氧化、促智、抗衰老等,尤其是蒽醌类化合物还是自然界中广泛存在的一类天然光敏剂,使其在光动力疗法研究领域中受到广泛的关注.已见报道具有光敏治疗肿瘤活性的蒽醌类化合物主要有金丝桃素、痂囊腔菌素和竹红菌素等,此类药物通常以DNA为作用靶点,在光照射条件下光敏损伤DNA     

蛇足石杉内生真菌Shiraia sp. Slf14中III型聚酮合酶的表达、纯化及生物信息学分析

竹红菌素是我国特有的一类苝醌类光敏色素,在开发新型抗肿瘤抗病毒药物、光敏活性农药及新型光电转换材料等方面应用前景广阔.聚酮合酶（ Polyketide synthase,PKS）是合成竹红菌素的一种关键酶,通过全基因组测序及分析发现在Shiraia sp. Slf14中存在一个III型聚酮合酶基因.利用RT-PCR技术,以其总RNA为模板,扩增得到目的片段,并成功构建表达载体pET-22b（+）-PKSIII,采用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,在大肠杆菌BL21（ DE3）中成功表达出了目的蛋白,SDS-PAGE结果显示表达重组产物分子质量约为43 kDa,与理论值一致,为III型聚酮合酶的催化活性研究提供理论依据.     

竹红菌素中试提纯工艺及抑菌活性研究

为了研究竹红菌素的中试提纯工艺及抑菌效果，在中试生产中，通过不同溶剂、提取方法提取竹红菌素，研究盐析法、降温法和超滤法对竹红菌素的纯化效果。结果表明使用气流粉碎法竹红菌素提取量可达21.4 mg/g,超滤法纯化后，竹红菌素的纯度达到90%以上。对竹红菌素的抑菌活性分析发现，其热稳定性良好，并且对大肠埃希氏菌和白色念珠菌均有抑制作用。竹红菌素具有天然抗菌和良好的热稳定性，易提取纯化，可作为一种抑菌药物应用到医药等领域。     

蛇足石杉内生真菌Shiraia sp.Slf14中Ⅲ型聚酮合酶的表达、纯化及生物信息学分析

竹红菌素是我国特有的一类苝醌类光敏色素,在开发新型抗肿瘤抗病毒药物、光敏活性农药及新型光电转换材料等方面应用前景广阔.聚酮合酶(Polyketide synthase,PKS)是合成竹红菌素的一种关键酶,通过全基因组测序及分析发现在Shiraia sp.Slf14中存在一个III型聚酮合酶基因.利用RT-PCR技术,以其总RNA为模板,扩增得到目的片段,并成功构建表达载体p ET-22b(+)-PKSIII,采用Ni-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出了目的蛋白,SDS-PAGE结果显示表达重组产物分子质量约为43 k Da,与理论值一致,为III型聚酮合酶的催化活性研究提供理论依据.     

二氧化钛包裹竹红菌素纳米粒的制备和表征

采用溶胶-凝胶法合成二氧化钛包裹竹红菌素纳米粒,并利用透射电镜和粒度分析仪对其形貌和粒子大小进行测定,证明粒子呈球形,平均直径在100 nm左右;采用紫外和荧光光谱研究二氧化钛包裹竹红菌素纳米粒的光谱性质,并与未包裹的竹红菌素在水溶液中的光谱性质进行了比较,结果表明,竹红菌素被成功地包裹于二氧化钛纳米粒中;包裹后竹红菌素的光谱吸收峰红移,强度增加.由此,将有利于竹红菌素在光动力疗法中的应用.     

利用分子印迹固相萃取法进行竹红菌素精制的研究

选用沉淀聚合法合成竹红菌甲素分子印迹聚合物(molecular imprinted polymer,MIP)和竹红菌乙素MIP,研究了基于分子印迹聚合物的竹红菌素发酵液的静态吸附和解吸.利用干法填装竹红菌甲素MIP、竹红菌乙素MIP和制备型固相萃取柱,对竹红菌素提取浓缩液进行了竹红菌甲素和乙素的分离与精制.结果表明:混合吸附的最佳填充柱组合为竹红菌甲素MIP 10.5,g、竹红菌乙素MIP为4.5,g,洗脱次序为先洗脱竹红菌甲素,更换淋洗剂后,再洗脱竹红菌乙素.     

竹红菌素类光动力药物

竹红菌素作为一类新型的光动力药物,与卟啉类化合物相比,具有化学组成单一、易纯化等优点．文章综述了近年来竹红菌素类光动力药物的研究进展,包括竹红菌素的化学修饰和物理包裹,并对其未来的研究方向作了展望．     

竹红菌甲素光敏生物活性的探讨

本文探讨了竹红菌甲素光敏化学反应的电子顺磁共振ＥＰＲ的研究,光生物活性的抑菌试验、ＨＡ光动力学活性对人癌细胞增殖动力学及细胞凋亡的检测,阐明了ＨＡ的光敏活性。     

产生苝醌类化合物真菌的化学成分及光敏活性研究

 研究菌寄生菌属真菌(Ascomycetes Hypocreaceae Hypomyces(Fr.)Tul.sp.)菌丝体的化学成分.用丙酮回流提取,用二氯甲烷和甲醇洗脱,硅胶H柱层析分离,化学与波谱学进行结构鉴定.从菌丝体中分离得4个化合物,分别鉴定为甘露醇(I),痂囊腔菌素A(II),竹红菌甲素(III)和竹红菌乙素(IV).用微生物纸片法测定了化合物II,III,IV的光敏活性.     

纳米TiO2载体对竹红菌甲素光敏损伤DNA的增敏研究

采用溶胶-凝胶法制备竹红菌甲素/二氧化钛纳米粒.结果表明,竹红菌甲素被成功包裹于二氧化钛纳米粒内部.与竹红菌甲素水溶液相比,包裹后的样品紫外吸收峰红移至光疗窗口(600～900 nm),并且在有氧条件下光敏损伤CT - DNA的能力增强.     

新型竹红菌甲素与钒氧离子配合物的制备及光敏性质研究

采用紫外-可见吸收光谱和荧光光谱系统研究了竹红菌甲素和钒氧离子之间的相互作用,实验结果表明,与竹红菌甲素相比,新型配合物的紫外光谱吸收峰红移且吸收峰强度增加,荧光强度降低,具有一定的光敏产生单线态氧及光敏损伤CT DNA的能力.采用透射电镜对其粒径大小进行测定,结果表明纳米粒的平均粒径在60 nm左右,单分散性质良好.因此,该配合物的形成将进一步推动竹红菌甲素在光动力疗法中的应用.     

双巯基乙酸取代竹红菌乙素光合成条件的优化

竹红菌素(Hypocrellins) 是从生长在我国云南和四川等地的箭竹上的一种寄生真菌--竹红菌(Hypocrella Bambuase)中提取的天然色素,属于苝醌类光敏剂.     

竹黄(Shiraia bambusicola P.Henn.)主要光敏有效成分的初步探讨

本文报道了试用纸片法从竹黄中筛选到的一种红色的光敏色素。经鉴定,它与竹红菌[Hypocrella bambusae(B·et Br·) Sacc.]所产竹红菌甲素(Hypocrellin A简称甲素)为同一化合物。甲素是一种新型的光化学疗法药物,对治疗外阴白色病变等疾病有显著效果。这一发现为扩大甲素的药源以便进一步满足对这类药物的需要提供了依据。     

应用红细胞光敏模型评价抗光敏中药添加剂

 研究了紫外线或光敏药物单独存在的条件下以及不同照射时间和不同药物浓度条件对模型的影响。建立了长波紫外线诱导光敏药物致使红细胞溶血模型,通过检测红细胞损伤后上清液中的血红蛋白含量,计算溶血率,从而反映细胞损伤程度。结果表明,紫外线低剂量或氯丙嗪单一条件存在时,并不能引起红细胞溶血;当氯丙嗪含量为0.33mg/mL,紫外线照射30min可致红细胞50%溶血,照射60min可使细胞100%溶血。应用此模型对10种中药及植物成分进行检测,筛选出银杏叶提取液、茶多酚和葡萄籽提取液3种具有抗光敏功能的活性成分。其中,银杏叶中主要成分黄酮类物质通过广泛的紫外吸收能力从源头阻止紫外线对细胞膜的损伤,茶多酚、葡萄籽中的多酚类物质通过清除自由基等光产物对细胞膜起到保护作用。     

天然茈醌合成的初步研究

对拟议的竹红菌素合成的中间体3-烯丙基-6, 8-二甲氧基四氢萘-1-酮的形成反应、Wacker氧化、溴化和氯化氢加成等反应进行了研究、对它及其氧化产物二酮的二氧化硒氧化反应也进行了探索。     

发酵法获得竹红菌甲素的探讨

从竹黄(Shiraia bambusicola)中分离到一株丝状真菌。由其发酵液中得到的菌体,经廻流提取、层析、收集得紫红色组份,它与竹红菌甲素(Hypocrellin A)的薄层层析Rf值和紫外光下的荧光特征相同;两者的主要光敏特性也一致。     

痂囊腔菌素A的溴代反应及产物的光敏活性研究

 研究了痂囊腔菌素A的溴代反应,反应得一溴代和二溴代2个产物.用微生物纸片法分别测定痂囊腔菌素A、一溴代和二溴代物的光敏活性.结果表明溴代产物的光敏活性均增强,尤其是二溴代物明显增强.     

竹红菌甲素和溶菌酶之间的电子转移与荧光猝灭作用

在光动力疗法中,竹红菌甲素作为敏剂与溶菌酶发生了相互作用.本文对竹红菌甲素同溶菌酶作用的荧光猝灭机理进行了研究.结果表明,竹红菌甲素与溶菌酶结构中的酪氨酸和色氨酸之间的光诱导电子转移机制,在荧光猝灭过程中起了重要作用.     

用海藻酸钠为载体固定化产二氢嘧啶酶菌体细胞的研究

近年来,固定化微生物细胞及其在工业上的普遍应用,越来越引起人们重视。这是因为微生物细胞被某一载体固定化后、显著增加了靶酶的稳定性,有利于固定化细胞对底物的催化转化和连续作用。同时细胞固定化后,增加了酶——细胞膜——细胞壁——载体——底物之间的反应复杂性。因此固定化细胞的催化性质是一个值得探讨的问题。     

植物细胞膜H+-ATPase对环境因子和逆境胁迫的适应

植物细胞膜H -ATPase是初级转运蛋白,它在养分离子跨膜运输、胞内pH调节、细胞伸长生长、气孔开闭,以及植物适应所处的环境与发育过程等生命活动中起着重要的作用.综述了植物细胞膜H -ATPase在酶活性、基因表达水平以及蛋白水平等方面对不同环境因子及逆境胁迫的适应性;指出分离鉴定、信号传导H -ATPase等将是进一步的研究方向.