微生物几丁质酶的研究概况

微生物几丁质酶在自然界中广泛存在,并在物质循环中起重要作用．本文就产生几丁质酶的微生物种类、微生物几丁质酶的特点、酶学性质、产生条件、作用机理及应用等方面的研究状况进行了综述．认为微生物几丁质酶在植物病害的防治中有着广阔的应用前景     

外界条件对球孢白僵菌几丁质酶的影响

本文研究了球孢白僵菌(Beauveria bassiana)的培养条件——温度、初始pH值、接种量、培养时间等对产几丁质酶的影响;探讨了几丁质酶活性与几丁质浓度、粒子大小、酶解温度、pH值的关系;从而获得了高活性几丁质酶的培养条件及生物转化几丁质废物的适宜环境.     

微生物几丁质酶的研究概况

微生物几丁质酶在自然界中广泛存在,并在物质循环中起重要作用。本文就产生几丁质酶的微生物种类、微生物几丁质酶的特点、酶学性质、产生条件、作用机理及应用等方面的研究状况进行了综述。认为微生物几丁质酶在植物病害的防治中有着广阔的应用前景。     

胶体几丁质诱导红曲霉产几丁质酶的研究

本文采用胶体几丁质为底物,研究了红曲霉液态发酵产几丁质酶.研究结果表明:胶体几丁质的添加能有效诱导红曲霉合成几丁质酶.在培养基中添加0.8%(W/V)胶体几丁质的同时,添加0.4%(W/V)葡萄糖,有利于红曲霉的生长以及几丁质酶的合成,发酵48h几丁质酶活力达到最高的0.3504U/mL.     

几丁质酶和葡聚糖酶生物学特性及其编码基因的克隆和转化

几丁质酶和葡聚糖酶在植物病害生物防治作用中具有重要的作用，本文着重介绍了几丁质酶和葡聚糖酶的分子生物学方面的特性，以及几丁质酶和葡聚糖酶编码基因的克隆和转化研究概况，将编码几丁质酶和／或葡聚糖酶的基因导入到植物中，能够提高植物抗病能力，导入到植物病害生防直菌或细菌中，可以提高生物防治菌的效果。     

海洋细菌11211的生长条件及其几丁质酶研究

从南海海水中分离到产几丁质酶的弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．）,研究了菌株１１２１１的生长条件和产酶条件。１１２１１菌生长需要Ｎａ＾＋,海水的其他成分对菌生长也有影响。胶体几丁质可诱导几丁质酶产生。在几丁质培养基中１１２１１菌的产酶高峰为生长的第７天。经硫酸铵沉淀,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００、ＤＥＡＥ－纤维素及几丁质柱层析,酶被纯化了１８倍。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,酶的相对分子质量约为３００００。该     

微生物几丁质酶的特性及其应用的研究进展

几丁质酶可以降解几丁质,其降解产物可以用于抗虫、医药、化工、食品等领域.目前已从微生物中获得多种几丁质酶并克隆其几丁质酶基因.本文主要对产几丁质酶微生物的分类及其分布特点、微生物几丁质酶的性质、结构、基因调节及应用等进行综述.     

舞毒蛾几丁质酶的研究进展

舞毒蛾是一种世界性林业害虫,在我国各省均有分布。舞毒蛾幼虫主要蚕食果树、柳树等树木的树叶．严重危害林业安全。文章介绍了舞毒蛾的危害、几丁质酶的相关知识及舞毒蛾几丁质酶的研究现状．并对应用几丁质酶防治舞毒蛾的前景进行了论述。     

基于密码子优化策略的厚壳贻贝几丁质酶原核重组表达及功能

厚壳贻贝mytichitin-1是一种特殊的,可通过裂解方式产生抗菌肽的几丁质酶。对该酶的研究有助于了解贻贝的免疫防御以及几丁质酶的功能多样性机制。为深入研究厚壳贻贝mytichitin-1的结构与功能,采取原核重组表达方式,结合密码子优化策略,获得适于大肠杆菌表达体系的目标基因。通过表达以及表达产物的分离纯化,获得重组mytichitin-1蛋白。经过SDS-PAGE,western blot以及质谱验证,表明重组mytichitin-1序列无误,表达成功,在此基础上,对重组mytichitin-1开展了几丁质催化活性,几丁质结合活性和抑菌活性研究。研究结果表明重组mytichtin-1具有明显的几丁质催化活性和几丁质结合活性;同时重组mytichitin-1表现出对细菌和真菌的抑制活性,且对真菌的抑制活性相对较强。上述研究不仅成功表达出厚壳贻贝mytichitin-1,同时也为后续研究几丁质酶的功能多样性及其分子机制,以及基于厚壳贻贝几丁质酶的蛋白质工程和应用研究奠定了基础。     

枯草芽孢杆菌2-3-2的抗线虫作用和产酶条件与酶特性

为了研究枯草芽孢杆菌2-3-2抗线虫作用与几丁质酶活的关系,对几丁质酶的产酶条件进行优化并探讨酶的特性,通过盆栽试验测定了抗线虫效果,用DNS定糖法测定了几丁质酶活力.实验结果表明:枯草芽孢杆菌2-3-2对南方根结线虫防治效果显著,其抗线虫作用与几丁质酶活性呈正相关.几丁质酶产酶培养基组成为(g/L):胶体几丁质65,酵母膏1,葡萄糖5,KH2PO40.7,K2HPO40.5,MgSO4·7H2O 0.5,FeSO40.01,NaCl 0.5,微量盐1mL/L;起始pH 7.0,温度为30℃、培养时间为72h.与优化前相比,酶活性提高了1.59倍,达到35.17×10-10 mol/s.枯草芽孢杆菌2-3-2几丁质酶最适反应温度为40℃,最适pH为7.0;温度高于50℃及碱性条件下酶活力下降.     

几丁质酶在苏云金芽孢杆菌中的分布及抑小麦赤霉菌菌株的筛选

利用几丁质平板法和几丁质酶基因特异引物PCR两种方法,对本室保藏的995株苏云金芽孢杆菌的几丁质酶及其基因进行了检测.结果显示所有被检测的菌株都可以在几丁质为唯一碳源的平板上生长.其中93.0%的菌株PCR检测阳性,54.1%的菌株可产生明显的水解圈.证明苏云金芽孢杆菌中几丁质酶普遍存在.通过研究发现Bt几丁质酶活力高低与其血清型及杀虫晶体蛋白基因的类型无相关性.同时对286个菌株进行了抑小麦赤霉菌实验,筛选出19株抑真菌效果较好的苏云金芽孢杆菌.     

蜂房芽孢杆菌B－91几丁质酶的合成条件

从厦门地区牡养殖场分离筛选到一株产几丁质酶活力较高的蜂房芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌ－ｌｕｓａｌｖｅｉ）Ｂ－９１，研究了该菌几丁质酶的合成条件。结果表明：该菌在以几丁质为碳氮源的培养基中生长，能合成多量的几丁质酶。酶的合成受各种几丁质诱导。在产酶培养基中添加不同的有机或无机氮源，均能促进酶的合成，而葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和乳糖对酶合成有阻遏作用。该菌几丁质酶合成的最适培养基初始ｐＨ为６．８，最适温度为２８℃。在２５０ｍｌ三角瓶装５０ｍｌ培养基，接种量为２％，振荡培养６０ｈ时，培养液中几丁质酶活力可达２２１２ｕ／ｍＬ．     

球孢白僵菌几丁质酶的定位研究

采用酶解球孢白僵菌菌丝细胞壁以获得原生质体,用超声破碎器破碎细胞,并用差速离心等方法,对此丝状病原真菌细胞中几丁质酶的定位进行了研究.采用球孢白僵菌 Eu-120株,分别用几丁质酶、蜗牛酶和纤维素酶,以不同比例混合进行脱壁处理.通过测定培养物上清液及原生质体溶解物的几丁质酶活性,发现此培养物上清液中的酶活性占其总酶活性的81.46%,而原生质体溶解物中酶活性极少.研究表明,球孢白僵菌几丁质酶主要存在于细胞的周质空间,并在菌生长过程中通过细胞壁分泌至细胞外.     

斜纹夜蛾几丁质酶家族基因鉴定与时空表达分析

昆虫GH18家族几丁质酶属于多基因家族,在昆虫的蜕皮与变态过程中发挥着至关重要的作用,它催化表皮几丁质的降解.斜纹夜蛾是一种重要的农业害虫,危害290多种植物,但对其几丁质酶未深入研究.该文通过斜纹夜蛾转录组学分析,发现了12种潜在的几丁质酶,分属于8类.对这些几丁质酶在斜纹夜蛾变态发育时在表皮、中肠以及脂肪体的时空表达分析结果表明,Sl Cht5,Sl Cht9和Sl Cht2的表达水平在幼虫转化为蛹时上调表达,说明这些几丁质酶可能参与了斜纹夜蛾变态时期的脱皮作用;而其他几丁质酶的表达具有组织特性,表明它们可能具有不同功能,如Sl Cht6仅在中肠和脂肪体中表达,Sl Cht11,Sl Cht12和Sl Cht16主要在中肠和表皮表达,Sl IDGF2仅在表皮有表达,Sl IDGF3和Sl Cht9在三大组织均有表达.本研究结果对斜纹夜蛾几丁质酶家族基因的鉴定和时空表达作了初步的分析,为研究它们在斜纹夜蛾发育中的功能与调控打下基础.     

几丁质酶的结构特征与功能

几丁质酶在各种生物中起着非常重要的生理作用.最近几年,在哺乳动物中发现多种几丁质酶及类几丁质酶蛋白,它们在免疫炎症反应中起着非常重要的作用.本文综述了人几丁质酶Chitotriosidase和AMCase以及类几丁质酶YKL39,YKL40和Oviductins的结构特征与功能特点,探讨它们与相关疾病的关系.并阐述了它们之间的进化关系.     

海洋弧菌Z010产生几丁质酶的发酵条件研究

以海洋弧菌Ｚ０１０菌株为对象,研究了其产生几丁质酶的发酵条件。研究表明,其产酶的最佳发酵条件为：２２１６Ｅ液体培养基中含０．５％（ｗ／ｖ）的胶体几丁质,０．５％（ｗ／ｖ）的蛋白胨,培养起始ｐＨ值为７．０,２５℃摇床２００ｒ／ｍｉｎ培养３６ｈ,几丁质酶产出最大。     

芒果过敏原几丁质酶的序列和B细胞抗原表位的分析

以芒果组织中的过敏原几丁质酶为研究对象,通过查询NCBI得到芒果几丁质酶的氨基酸序列,然后利用Clustal X得知芒果几丁质酶的蛋白质序列与柑橘、龙眼、胡杨和核桃中的几丁质酶的蛋白质序列具有较高的同源性(相似度分别是85%、80%、71%和70%),故存在交叉过敏的物质基础。此外,又通过DNAStar分析得到芒果属几丁质酶的二级结构中的β-转角和无规则卷曲是一个易形成B细胞抗原表位的区域,其可能区域在:38~46、64、67、75~76、89、97~101、115、122、124~126、128~129、133~138、144~150、152、176、178~181、222~225。另外,通过实验还发现芒果叶片和成熟果中的几丁质酶表达含量较高。     

木霉菌的几丁质酶与植病生防

木霉菌的几丁质酶是其防治植物真菌性病原菌的主要机制之一，它能降解真菌的细胞壁。木霉菌的几丁质酶具有结构和编码基因多样性。已经纯化的木霉菌几丁质酶有内切和外切几丁质酶，壳二糖酶和N—乙酰—β—D—葡萄糖胺酶。已经克隆的有编码33和42—KDa内切几丁质酶和编码73—KDa的N—乙酰—β—D—葡萄糖胺酶基因。42—KDa内切几丁质酶是目前研究最多的，已经用于转基因植物的培育；对它的表达和调控也有部分了解。     

罗氏沼虾肝胰腺几丁质酶研究

用纯化的罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)肝胰腺(hepatopancreas)几丁质酶,研究了酶的抑制剂,酶活力受Fe3+、Hg2+、Ag+强烈抑制,SDS低浓度时有激活作用,EDTA对酶影响不大,证明该酶不需金属离子.对酶作用方式的探讨证明该酶为内切酶,对不同N-乙酰化度几丁质的水解速度差异很大.     

海洋链霉菌产生几丁质酶的研究

从闽南地区潮间带红树林根际海泥中分离到能产生几丁质酶(Chitinase)的放线菌(Actinomyces)300余株,研究了各种诱导物、碳氮源及培养条件对链霉菌S-128(Streptomyces sp.S-128)菌株几丁质酶生物合成的影响,结果表明,该菌株几丁质酶的合成能被多种几丁质所诱导,是一种诱导酶,添加氮源尤其是有机氢源能促进酶的合成,而碳源却没有这种作用,基本培养基中加入2.O％脱矿质几丁质和1.5％玉米浆,在28℃发酵5d,发酵液的几丁质酶活性可达290u/ml,该酶对几丁质的水解反应显出较宽的pH范围(pH3～8)和较好的pH稳定性,最适pH5.0,在一定的温度范围内,该酶的活性随温度的上升而增高,并以65℃的酶活性最高。