肺癌组织的蛋白质表达比较研究

肺癌是目前全球发病率最高的恶性肿瘤之一,在我国的发病率和死亡率不断上升,但其发病机制目前尚不清楚.应用肺癌蛋白组学于蛋白质整体表达水平上的研究,将有助于揭示其发病机制,是癌症蛋白组学研究的一个重要方向[1～3].我们对19例肺癌组织(SQCLC和SCLC)蛋白表达进行了系统研究.     

烟草烟碱转化相关蛋白质筛选分析研究

为了研究烟草中烟碱转化机理,应用比较蛋白组学方法研究了高烟碱烟草中烟碱转化相关蛋白质表达情况.采用双向电泳联用质谱技术比较了实验组高烟碱转化烟草叶片和对照组野生型烟草叶片的蛋白质差异,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.选取了34个差异蛋白质点,采用MALDI-TOF-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,最终有12个蛋白质点得到了可靠鉴定,其中在实验组中相对下调的蛋白有7个,相对上调的蛋白有5个.通过比对蛋白质组库数据,发现这些差异表达的蛋白质主要是参与碳水化合物代谢、能量代谢等功能,而且亚细胞定位主要是在叶绿体和线粒体,表明这些蛋白表达水平与烟碱转化具有密切关系,为研究高烟碱转化率烟叶的形成机理提供了新的依据.     

不同碳源下Pseudomonas putida F1单环芳烃降解相关蛋白质的差异表达

研究了Pseudomonas putida F1利用单环芳香族化合物以及琥珀酸做碳源时单环芳烃降解相关蛋白质的表达,这对于研究这些芳烃的单一和混合降解有重要意义.利用蛋白组学研究方法,通过比较蛋白表达的双向凝胶电泳(2-DGE)图谱,找出不同碳源条件下生长细胞中差异表达的蛋白质.蛋白质经胰酶消化后,进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix assisted laser desorption/ionization-Time of flight (MALDI-TOF) mass spectrometry)分析.结果表明,尽管该细菌在降解甲苯和乙苯时利用同一个代谢途径,但代谢相关蛋白在微生物利用不同碳源时的表达量有所变化.差异表达蛋白可分为4类,代谢蛋白,转运蛋白,适应性相关蛋白以及其他类型蛋白.     

利用双向电泳-质谱技术鉴定牦牛和犏牛睾丸中 的差异表达蛋白质

比较了牦牛和犏牛睾丸组织中蛋白质的表达差异; 应用双向电泳-质谱技术, 对牦牛和犏牛的睾丸组织中差异蛋白质进行分离和鉴定; 对获得的22个差异表达点进行质谱鉴定和数据库搜索, 获得了19个蛋白质, 其中有3种分子伴侣可能与犏牛雄性不育有关; 研究结果表明, 牦牛和犏牛睾丸组织中存在差异表达蛋白, 并可利用双向凝胶电泳进行分离, 为进一步分析犏牛雄性不育的原因提供了线索.     

利用双向电泳-质谱技术鉴定牦牛和犏牛睾丸中的差异表达蛋白质

比较了牦牛和犏牛睾丸组织中蛋白质的表达差异;应用双向电泳-质谱技术,对牦牛和犏牛的睾丸组织中差异蛋白质进行分离和鉴定;对获得的22个差异表达点进行质谱鉴定和数据库搜索,获得了19个蛋白质,其中有3种分子伴侣可能与犏牛雄性不育有关;研究结果表明,牦牛和犏牛睾丸组织中存在差异表达蛋白,并可利用双向凝胶电泳进行分离,为进一步分析犏牛雄性不育的原因提供了线索.     

九龙牦牛肉质性状测定及肌肉蛋白质双向电泳的初步分析

肉质性状是畜禽最主要的经济性状.为阐明九龙牦牛(Bos grunniens)肉质的特性,对不同年龄和性别的九龙牦牛(n=107)肉的部分性状进行了测定.结果表明,0.5岁犊牦牛背最长肌的蛋白质、肌内脂肪(IMF)和肌红蛋白(Mb)含量、剪切力等均显著低于成年牦牛,而这些指标在成年公牦牛与成年母牦牛之间差异不大.不同年龄成年九龙牦牛背最长肌IMF含量接近,提示其IMF沉积受年龄影响相对较小.另外,牦牛背最长肌剪切力存在较大的个体间差异.与成年黄牛相比,牦牛背最长肌IMP含量低,蛋白质含量高,熟化后p H下降幅度小.本研究还建立了九龙牦牛肌肉双向电泳方法,为阐明肌肉差异表达蛋白提供了方法.九龙牦牛肉的蛋白质、IMF和Mb含量以及剪切力等与黄牛有明显差异.     

高原“雪舟”白牦牛

白牦牛是我国独有的珍贵畜种,被列入国家畜禽品种表,其稳定的遗传基因也存入了国家生物基因库. 白牦牛产于甘肃省天祝藏族自治县,是当地藏民的主要生产资料和生活依靠.白牦牛养殖是天祝藏族自治县的特色经济和优势产业.     

高原“雪舟“白牦牛

白牦牛是我国独有的珍贵畜种,被列入国家畜禽品种表,其稳定的遗传基因也存入了国家生物基因库. 　　白牦牛产于甘肃省天祝藏族自治县,是当地藏民的主要生产资料和生活依靠.白牦牛养殖是天祝藏族自治县的特色经济和优势产业.……     

牦牛种群年龄分布的调查及种内结构分析

牦牛是青藏高原特有畜种。野生习性强,管理原始粗放,故调查牦牛种群的年龄分布情况(样本数539头),有助于了解自然种群的情况。笔者对此进行了初步调查,并对种内结构进行了分析研究。     

牦牛产毛性能的评定

牦牛(Bos grunniens)是高寒牧区特有的畜种,它既产肉又产奶;还产毛。是当地牧民重要的生产资料和生活资料。全世界共有牦牛1300多万头,而我国就有1230多万头,占世界牦牛总数的90％以上。过去对牦牛的产奶,产肉性能研究较多,但对牦牛毛绒的研究甚少,对牦牛毛绒的利用,除用毛制绳     

木瓜蛋白酶提取牦牛皮胶原蛋白的工艺研究

牦牛作为青藏高原上的特有畜种,是当地经济的主要来源,但牦牛原料皮存在脂肪含量高、伤残严重、部位差大等缺点,传统上用于制革行业,严重降低了其产品附加值;若将牦牛原料皮用于提取胶原蛋白,可完全忽视其缺点,并能大幅提高产品经济效益.本文用单因素实验法,研究了木瓜蛋白酶酶解牦牛皮皮胶原纤维的影响因素,确定了其最佳酶解条件为酶用量2.5%、温度50℃、pH为6、液比15:1及转速500r/min;在单因素实验的基础上,用L16(45)正交实验法确定了各因素对酶解速率的影响程度,大小依次为液比酶用量pH温度转速,最终优化得到的工艺为:酶用量2.5%、温度50℃、pH为6、液比15∶1及转速500r/min.     

牦牛在低海拔寒冷山区生态适应牲的观察研究

牦牛是适应高海拔寒冷地区的特有畜种,在海拔2000米以下的寒冷山区,积极开展牦牛的引种饲养和风土驯化对低海拔山区自然资源的开发利用具有重要的意义。河北省围场县自七十年代起先后从青海,甘肃等高寒地区引进牦牛饲养于该县北部的红松洼牧场,引进的牦牛在该场生长发育良好,繁殖正常。为研究牦牛对低海拔生态环境适应性和风土驯化情况,扩大牦牛的饲牧范围和促     

大麻蛋白质组的双向电泳技术建立

蛋白组学研究中最关键步骤是样品制备,为得到高质量的双向电泳蛋白图谱,作者通过对TCA/丙酮法对大麻茎、叶进行蛋白样品制备、双向电泳技术流程进行优化,建立了适于大麻茎、叶的双向电泳技术体系.优化双向电泳体系为:裂解液在传统配方中加入Tris-HCl(p H=8.8),以Triton X-100代替CHAPS,蛋白裂解后加入4倍体积100%预冷丙酮等均可有效去除各种非蛋白杂质;IPG胶条p H=4~7,24 cm,考染上样量800μg/胶条可得到背景清晰、分辨率高的双向电泳图谱.大麻茎中可分辨的蛋白点为1 027±12,叶中为905±8.该体系能同时适用于大麻茎、叶,并能满足下一步蛋白质谱测序分析的要求,可为大麻蛋白组学的发展提供技术支持.     

应用nanoLC/MS/MS对人羊水的蛋白质组学分析

建立应用nano LC/MS/MS技术寻找羊水特异性表达蛋白质的蛋白质组学方法.羊膜穿刺获取两份正常妊娠晚期的羊水,通过Cibacron blue和Protein A吸附去除血清白蛋白和IgGs,样品经变性、还原和烷基化后酶解,nano LC/MS/MS分析,鉴定了62种蛋白质.通过与已有的羊水和血浆蛋白质表达数据库比对,从中新发现22种只在羊水中表达的蛋白质,其中4种已知是子宫或妊娠特异的.本研究建立了nano LC/MS/MS对羊水进行蛋白组学分析的方法并发现了一些可能的羊水特异表达蛋白.     

牦牛和黑犏牛草原肥育试验

牦牛是我国高寒草原牧区特有的牛种,由于受分布地区自然社会经济条件的限制,它的生产性能过去很少研究。为了充分利用地方畜种资源,探讨在天然草原放牧条件下,牦牛,黑犏牛(黑白花奶牛名牦牛)的产肉性能,给牦牛改良利用提供依据,我们在四川省龙日种畜场进行了草原肥肖试验。     

牦牛INHBA基因的克隆及序列分析

根据GenBank检索到的普通牛的INHBA基因序列设计一对特异性引物,以牦牛卵巢组织总RNA为模板,通过RT-PCR技术对牦牛INHBA cDNA进行克隆测序和序列分析.结果表明:扩增片段1360bp,包含1277bp的编码区,编码426个氨基酸.与普通牛相比,牦牛INHBA基因编码区存在2处碱基转化.牦牛与普通牛、绵羊、人、鼠和猪的核苷酸序列同源性分别为99.84%、97.97%、91.41%、87.79%、91.94%,氨基酸序列同源性分别为99.53%、98.82%、95.77%、93.88%、93.88%.蛋白质结构分析显示,INHBA蛋白不易形成α螺旋和跨膜结构,是相对保守的疏水性蛋白.     

牦牛复壮新技术

牦牛复壮新技术中国饲养着１３００万头牦牛，分布在青藏高原及毗邻的高寒牧区，占世界牦牛总类物８５％以上，是青海、西藏、四川西北、甘南、云南等藏族牧区的主要畜种。由于特殊的驯养历史，极端恶劣的自然条件和落后的社会环境，至今牦牛仍是一繁殖性能低，生产周期长...     

牦牛饲牧业科学技术发展预测研究

我国拥有世界牦牛总头数的90%,有1200余万头。牦牛是青藏高原高寒草地的优势畜种,具有耐高寒的生态适应性。但人们对它的研究不多,认识还很肤浅。为发挥牦牛利用高寒草场牧草资源的特有能力,提供价廉质优的乳、肉产品,国内外普遍采用种间杂交手段,利用其杂种优势,和扩大牦牛的饲牧区,加快繁殖。(?)10月份围绕种间杂交及其种间杂种雄性不育等,开展了多学科的研究,并获得进展。牦牛应用(?)牛冻精人工授精技术等研究方面,我国居领先地位;在引种饲养,充分发挥牦牛的优势和潜力,风土驯化等系统研究上,与苏联相比尚有差距。2000年我国牦牛生产,预计在乳、肉产量方面,分别提高7倍和4倍。实现这一目标的技术措施是推广应用先进的科学技术,提高牦牛个体生产水平;加强地方良种牦牛的选育;扩大普通牛冻精杂种牛的比例;提高和控制牦牛的繁殖等。条件是加速培养当地少数民族科技人员,建立牦牛研究所和牦牛育种试验场,成立中国牦牛育种委员会,研究解决牦牛产品价格偏低,比价不合理等问题,以及把牦牛生产作为国民经济中一个独立的生产部门。     

牦牛GRB2基因克隆及其在生殖轴的表达研究

生长因子受体结合蛋白2(GRB2)是一种信号转导分子,通过细胞信号传导参与细胞增殖和分化过程.为了探讨GRB2基因在牦牛繁殖中的调控作用,采集5头成年母牦牛和5头母黄牛的下丘脑、脑垂体前叶、卵巢、输卵管和子宫组织,利用反转录PCR、生物信息学分析方法和RT-qPCR技术进行GRB2基因克隆、蛋白质结构预测及在生殖轴组织表达检测.结果表明,牦牛GRB2基因的CDS全长为654 bp,编码217个氨基酸,与黄牛、绵羊和山羊的同源性高,蛋白质一级结构中天冬氨酸所占比例最高,无跨膜结构和信号肽.二级结构主要包括自由卷曲、延伸链和α螺旋,三级结构的分析结果与二级结构相似.细胞定位分析发现GRB2蛋白主要存在于细胞核和细胞质中.RT-qPCR结果显示GRB2基因在牦牛下丘脑和脑垂体前叶表达量显著高于输卵管、卵巢和子宫(P0.05);GRB2基因在黄牛脑垂体前叶和卵巢表达量显著高于牦牛(P0.05),而在两物种的其余三个组织没有显著差异(P0.05).推测GRB2基因可能影响母牦牛的繁殖能力.     

浅谈绿色牦牛肉奶的生产

牦牛是世界上宝贵的稀有畜种,分布于海拔3000米以上的高寒地区。目前,我国牦牛存栏达1400万头,占世界牦牛总数的94%,阿坝州有牦牛205.78万头,占全省牦牛总数的46.75%。牦牛是高寒牧区牧民赖以生存和发展的生产、生活资料,是牧区的经济基础和支柱产业,是牧民收入和增收的主要来源。