多药耐药基因与肿瘤

介绍多药耐药（MDR）基因结构和表达、在肿瘤组织中的表达、检测方法及MDR逆转。指出研究MDR基因与肿瘤相互关系,除了具有理论意义外,还可为临床提高肿瘤化疗效果、正确选择治疗方案提供新思路。     

多药耐药及相关蛋白质的研究进展

多药耐药 (MDR)是某些肿瘤细胞对多种化疗药物产生交叉耐药的现象 ,也是目前肿瘤化疗失败的重要原因。研究发现 ,肿瘤细胞内的P -糖蛋白 (P -gp)、多药耐药相关蛋白 (MRP)、肺耐药蛋白 (LRP)、乳腺癌耐药蛋白 (BCRP)等蛋白质与MDR密切相关 ,其共同特点是上述蛋白质在MDR细胞中均有过度表达 ,并通过多种途经降低化疗药物在肿瘤细胞内的浓度及改变其在细胞内的分布。此外 ,MDR细胞还常伴随有酶蛋白 (如蛋白激酶C -PKC ,谷胱甘肽S转移酶π -GST -π ,拓扑导构酶Ⅱ -TOPOⅡ等 )活性的改变。因此 ,肿瘤细胞的MDR是一个相当复杂的细胞生理、生化过程 ,是多因素共同作用的结果。     

ATP-TCA结合MDR水平检测在临床乳腺癌化疗药物筛选中的应用

目的建立乳腺癌个体化疗体系,减少滥用药物或过度用药给患者带来的副作用,提高化疗药物的有效率.方法分离、培养乳腺癌患者新鲜组织细胞,加入临床常用化疗药物,体外培养一定时间后,按ATP-TCA试剂盒说明书进行细胞ATP含量检测,根据荧光强度计算药物半数致死量及细胞生长增殖抑制率;提取切除的手术标本及癌旁组织RNA,RT-PCR,检测MDR基因表达水平;根据细胞敏感程度及MDR基因水平检测优化对患者的化疗方案.结果 142例患者对常见的化疗药物敏感程度各有不同;在这些耐受病例中约有50%~80%病例MDR基因高表达.结论 ATP-TCA配合MDR基因水平检测有利于建立个体化化疗体系,提高临床化疗药物的有效性.     

桂枝茯苓丸联用顺铂紫杉醇化疗提高卵巢癌多药耐药模型裸鼠生存率

研究桂枝茯苓丸逆转人卵巢癌耐顺铂细胞株(SKOV3/DDP)肿瘤模型的耐药作用及其对荷瘤BALB/c裸鼠生存率的影响,探讨其可能的作用机制。采用Cell Counting Kit-8试剂盒检测SKOV3/DDP对顺铂和紫杉醇的耐药性;采用SKOV3/DDP细胞建立卵巢癌耐药肿瘤模型,模型BALB/c裸鼠随机分为桂枝茯苓丸浓缩液16 g·kg~(-1)·d~(-1)(高)、8 g·kg~(-1)·d~(-1)(中)、4g·kg~(-1)·d~(-1)(低)剂量(中药组)、顺铂/紫杉醇组(化疗组)、低剂量桂枝茯苓丸与化疗联用组(中西联用组)和空白对照组,检测各处理组的抑瘤率。观察各组BALB/c裸鼠的生存情况;并采用荧光定量PCR检测各组肿瘤组织中MDR1 mRNA的相对表达。结果是SKOV3/DDP细胞对顺铂和紫杉醇的耐药倍数分别为4.13倍和3.85倍。随着桂枝茯苓丸浓缩液剂量的增加,抑瘤作用增强,裸鼠生存率提高,肿瘤组织MDR1 mRNA表达相对于对照组逐渐下降。西药化疗组在耐药模型裸鼠中的抑瘤效果高于中药组,中西药联用后抑瘤效果显著高于西药化疗组;与其他各组相比,西药化疗组的裸鼠平均体重明显下降,差异均具有显著性(P0.05,P0.01)。中西联用组裸鼠生存率高于桂枝茯苓丸低剂量组和西药化疗组。西药化疗组MDR1mRNA表达相对于对照组显著增加,中西药联用组MDR1 mRNA表达相对于对照组显著下降,差异均具有显著性(P0.05,P0.01)。说明桂枝茯苓丸能够逆转SKOV3/DDP耐药性卵巢癌模型裸鼠的耐药性,提高裸鼠生存率,其机制可能与抑制MDR1 mRNA表达有关。     

色胺酮在食管癌化疗耐药过程中的作用

为研究色胺酮对食管癌化疗药物顺铂耐药性的抑制作用及其作用机制,设计食管癌Eca109细胞及其顺铂耐药株Eca109/cDDP细胞的顺铂及色胺酮不同处理组,根据实验目的选择不同的处理方式.利用实时荧光定量PCR检测Eca109和Eca109/cDDP细胞中多药耐药基因1(MDR1)及谷胱甘肽-巯基-转移酶-pi基因(GST-pi)的mRNA表达水平;免疫印迹和免疫荧光技术检测Eca109细胞和Eca109/cDDP细胞中MDR1和GST-pi蛋白的表达水平;细胞计数试剂盒(cell counting kit,CCK-8)法检测细胞增殖以及基因敲降后的回补效果.结果表明:色胺酮不仅显著抑制了食管癌细胞顺铂耐药株Eca109/cDDP细胞中MDR1基因的表达,而且MDR1和GST-pi蛋白的表达也受到了显著的抑制;色胺酮不但能抑制Eca109细胞的增殖能力,对耐药株Eca109/cDDP细胞增殖也存在抑制作用;色胺酮逆转耐药性的能力依赖于对MDR1和GST-pi的表达抑制.综上分析,色胺酮能够通过抑制MDR1和GST-pi蛋白的表达来逆转食管癌细胞顺铂耐药株的耐药性,是一种潜在的化疗辅助药物.     

宫颈癌肿瘤标志物在新辅助化疗中的应用

目的了解新辅助化疗对宫颈癌肿瘤标志物水平的影响,探讨肿瘤标志物在新辅助化疗效果评估中的作用。方法回顾在武汉市中心医院妇产科接受化疗和宫颈癌根治术的40例患者的临床资料,通过腹部超声和磁共振检查确定在新辅助化疗前后肿块的大小;通过淋巴细胞的病理结果判断子宫周围淋巴结转移情况。比较两轮新辅助化疗及宫颈癌根治术前后肿瘤标志物水平(癌胚抗原、血清糖类抗原125、鳞状细胞癌抗原),评估新辅助化疗疗效和宫颈癌肿瘤标志物水平的相关性。结果宫颈癌肿瘤标志物水平在化疗和手术后都明显降低,差异有统计学意义(CEA:F=11. 07,P <0. 05;SCC-Ag:F=8. 84,P <0. 05;CA125:F=10. 18,P <0. 05)。新辅助化疗能减少局部晚期子宫颈癌患者的比例(χ2=7. 17,P <0. 05)。新辅助化疗后肿瘤缩小≥1 cm的的患者,其血清肿瘤标志物水平均低于肿瘤直径缩小<1 cm的患者,其中鳞状细胞癌抗原水平差异有统计学意义(t=2. 4,P <0. 05)。但是化疗后肿瘤标志物水平不能明显反映患者淋巴转移情况。结论新辅助化疗可显著降低肿瘤标志物水平,血清肿瘤标志物水平的变化是反映新辅助化疗有效性的指标。     

化疗对肿瘤病人外周血血小板变化的影响

目的探讨肿瘤病人在化疗过程中血小板(PLT)的动态变化情况.方法用KX-21自动血细胞分析仪分别测定接受化疗的肿瘤病人外周血中化疗前、化疗后10d,化疗后3w、化疗后5w的血小板,分男女组,将4次结果进行比较分析.结果化疗对肿瘤病人的血小板有抑制作用,尤以化疗后10d为甚,在化疗后3w开始逐渐上升,5w后恢复正常水平.结论临床上应注意化疗期间的血小板动态变化,防止出现血小板减少的各种并发症.     

化疗对肿瘤病人外周血血小板变化的影响

目的探讨肿瘤病人在化疗过程中血小板(PLT)的动态变化情况.方法用KX-21自动血细胞分析仪分别测定接受化疗的肿瘤病人外周血中化疗前、化疗后10d,化疗后3w、化疗后5w的血小板,分男女组,将4次结果进行比较分析.结果化疗对肿瘤病人的血小板有抑制作用,尤以化疗后10d为甚,在化疗后3w开始逐渐上升,5w后恢复正常水平.结论:临床上应注意化疗期间的血小板动态变化,防止出现血小板减少的各种并发症.     

肿瘤病人化疗副反应的护理对策

目的 探讨护理人员如何用优质服务来避免或减轻肿瘤病人化疗副反应的痛苦.方法 针对化疗病人的胃肠道反应、骨髓抑制、黏膜皮肤反应、泌尿系毒性反应、脱发等方面进行优质护理.结果 能及时避免或减轻肿瘤病人化疗副反应的痛苦.结论 优质护理,能减轻化疗病人的痛苦,病人能坚持治疗,达到预期化疗效果.     

纳微多药给药系统的设计与研究

化疗是肿瘤等重大疾病的主要治疗手段,但由于肿瘤复杂的发病机制以及耐药性的产生极大地限制了传统单一化疗药物的临床应用.基于联合给药策略的多药给药系统,具有同时装载多种药物和药物释放行为的可控性等特点.主要就纳微多药给药系统的背景以及设计研究现状展开综述,希望为后来的研究给以启发.     

Nanocarriers for siRNA delivery to overcome cancer multidrug resistance

Multidrug resistance(MDR)is an extremely complexed phenomenon in tumor chemotherapy and is one of the major obstacles for successful treatment.Discovery of RNA interference(RNAi)offers a new strategy with great potential to reverse MDR.Specific genes,which contribute to the emerging of MDR,can be silenced by RNAi.However,many natural barriers have to be overcome for efficient and safe delivery of siRNA.In recent years,the various kinds of nanocarriers,such as liposomes,cationic polymers,and inorganic materials,have been developed to deliver siRNA and show good results in reversing MDR.This review mainly summarizes the barriers in siRNA delivery and recent progress in designing nanotechnology-based siRNA delivery systems to overcome tumor MDR.     

横纹肌肉瘤多药耐药细胞系RD/VCR的建立

横纹肌肉瘤是一种高度恶性的软组织肿瘤，化疗是最主要的辅助治疗手段．然而，肿瘤细胞对药物产生多药耐药常常导致治疗失败．本实验以长春新碱为诱导剂，在体外成功建立了耐药细胞系DD／VCR，为进一步研究横纹肌肉瘤的耐药机理制作了模型．耐药前后细胞超微结构发生显变化，mdr1及mrp基因，P-糖蛋白及多药相关蛋白的表达与横纹肌肉瘤多药耐药的发生有关。     

乙肝患者胎盘MDR1 mRNA表达及意义

目的:探讨MDR1 mRNA在乙肝患者胎盘组织中的表达及其意义。方法:选取乙肝患者足月胎盘20例;选择正常产妇足月胎盘20例作为正常对照组。实时荧光定量RT-PCR分别检测两组产妇胎盘中MDR1mRNA的表达。结果:各组荧光定量PCR检测MDR1mRNA的相对表达量为乙肝组(0.454±0.398),正常组(0.086±0.099),与对照组相比,差异有显著性(P<0.001)。结论:MDR1mRNA在胎盘组织中表达的升高,可能与乙型肝炎病毒感染有关。     

Structure of a bacterial multidrug ABC transporter

Multidrug transporters of the ABC family facilitate the export of diverse cytotoxic drugs across cell membranes. This is clinically relevant, as tumour cells may become resistant to agents used in chemotherapy. To understand the molecular basis of this process, we have determined the 3.0 A crystal structure of a bacterial ABC transporter (Sav1866) from Staphylococcus aureus. The homodimeric protein consists of 12 transmembrane helices in an arrangement that is consistent with cross-linking studies and electron microscopic imaging of the human multidrug resistance protein MDR1, but critically different from that reported for the bacterial lipid flippase MsbA. The observed, outward-facing conformation reflects the ATP-bound state, with the two nucleotide-binding domains in close contact and the two transmembrane domains forming a central cavity--presumably the drug translocation pathway--that is shielded from the inner leaflet of the lipid bilayer and from the cytoplasm, but exposed to the outer leaflet and the extracellular space.     

广义特征值问题MDR方法的改进与推广

本文对适用于实对称半正定广义特征值问题的MDR法进行改进与推广。类似于快速Givens变换,可用二乘法或三乘法的约化矩阵代替MDR中的约化矩阵,以节省计算量。对MDR法的约化过程作了较大简化,对收敛定理的证明也简化了。另一方面本文的方法可用于埃尔米特半正定广义特征值问题,新方法称为HMDR法(H指Hermitian)     

Prediction of multiple drug resistance phenotype in cancer cell lines using gene expression profiles and phylogenetic trees

When microarray gene expression data are used to predict multiple drug resistance (MDR) phenotypes for anticancer drugs, the normalization strategy and the quality of the selected signature genes are usually the main causes of inconsistency among different experiments. A stable statistical drug response prediction model is urgently required in oncology. In this study, the microarray gene expression data of multiple cancer cell lines with MDR was analyzed. For each probe-set, the expression value was defined as present/absent (1/0) and was classified into a gene set defined with protein domain organization (PDO). After employing the gene content method of phylogenetic analysis, a phylogenetic model (cell tree) for MDR phenotype prediction was built at the PDO gene set level. The results indicate that classification of cancer cell lines is predominantly affected by both the histopathological features and the MDR phenotype (paclitaxel and vinblastine). When applying this model to predict the MDR phenotype of independent samples, the phylogenetic model performs better than signature gene models. Although the utility of our procedure is limited due to sample heterogeneity, it still has potential application in MDR research, especially for hematological tumors or established cell lines.     

广义特征值问题MDR方法的改进与推广

本文对适用于实对称半正定广义特征值问题的MDR法进行改进与推广。类似于快速Givens变换,可用二乘法或三乘法的约化矩阵代替MDR中的约化矩阵,以节省计算量。对MDR法的约化过程作了较大简化,对收敛定理的证明也简化了。另一方面本文的方法可用于埃尔米特半正定广义特征值问题,新方法称为HMDR法(H指Hermitian)