胡萝卜籽抗氧化肽的分离纯化及活性研究

采用凝胶过滤色谱Sephadex G-50和反相高效液相色谱对胡萝卜籽中的抗氧化肽进行分离纯化.以DPPH自由基(2,2-二苯基-1-苦肼基)清除率为指标,测定多肽的抗氧化活性.采用电喷雾电离质谱法测定该多肽的相对分子质量.研究结果表明:经过分离纯化,得到一个具有较强抗氧化活性的多肽,在质量浓度为1 mg·m L-1时,其DPPH自由基清除活力达到(92.02±0.47)%,相对分子质量为339.3 u,由3个氨基酸残基组成.     

文蛤蛋白水解制备抗氧化活性肽的研究

以文蛤蛋白为原料,通过蛋白酶水解制备抗氧化活性肽.利用体外清除DPPH活性评价酶解产物的抗氧化活性,采用超滤、葡聚糖凝胶柱层析和HPLC对相应的活性肽进行分离纯化,通过HPLC-MS进行结构鉴定.结果表明:木瓜蛋白酶水解产物的DPPH清除活性明显高于碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶,产物质量浓度为1 mg·mL-1时,DPPH清除率为55.74%;以DPPH清除率为筛选指标,对木瓜蛋白酶酶解产物进行逐级分离,得到4个具有抗氧化活性的目的肽段,氨基酸序列分别为LNFNLEKSR(1120.3 u)、SWLRPR(814.4 u)、RIGNIISQY(1063.3 u)和LNFNLEK(877.2 u).     

龙眼多糖清除自由基活性的研究

从清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)和超氧阴离子(O2-·)三个方面,探讨纯化方法对龙眼多糖清除自由基活性的影响.以抗坏血酸为对照,利用分光光度法分别测定龙眼粗多糖(CLPS)、Sevag法脱蛋白制得的龙眼粗多糖半纯品(SLPS)、TCA法脱蛋白制得的龙眼粗多糖半纯品(TLPS)、经DEAE-Cellulose 52离子交换柱层析纯化得到的龙眼多糖纯品(LPS-2)对DPPH·、·OH和O2-·的清除能力.结果显示:多糖纯度越高,清除DPPH.活性也越强,其清除活性由强到弱依次为:LPS-2TLPSSLPSCLPS;对于.OH和O2-·,SLPS清除活性最强,LPS-2清除活性最弱,说明杂蛋白质抑制了多糖清除.OH、O2-·活性,而糖蛋白中的蛋白质则起到促进作用.     

龙井茶叶多糖的再认识及其结合物的抗氧化活性研究

对龙井茶叶多糖及其结合物的抗氧化和清除自由基活性开展研究。采用水提醇沉法提取龙井茶叶多糖,经除蛋白和纯化后得到精制多糖(LP),将LP在三氟乙酸条件下水解完全,经C18柱层析分离后得到水洗脱部分(LP-HCW)和甲醇洗脱部分(LP-HCM),利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和普鲁士蓝法测定LP、LP-HCM和LP-HCW的清除自由基和抗氧化能力。结果显示:LP、LP-HCM和LP-HCW的DPPH自由基清除率分别为38.49%,59.48%和24.81%;还原力指数分别为0.062,0.036和0.030。实验证明:龙井茶叶多糖及其结合物均有较强的药理作用,具有清除自由基和抗氧化活性。     

乳清蛋白肽的酶法制备、分离纯化及活性评价

以抗氧化活性及蛋白质回收率为筛选指标对乳清蛋白肽酶解工艺进行优化,用层析柱对酶解液进行逐级分离纯化,并对其分子质量进行检测.研究结果表明:利用胰酶、复合风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶酶解制备乳清蛋白肽,最佳用酶为碱性蛋白酶、最适底物含量为4.0%、最适加酶量为8000U/g、最佳酶解时间为4h;酶解液经DEAE-52纤维素层析后得到的A组分抗氧化活性最好,其还原力为0.320 0±0.004 1,DPPH自由基清除率为6.58%±0.36%;A组分再经Sephadex G-15葡聚糖凝胶层析柱分离纯化后得到组分G,其DPPH自由基清除率为6.73%±0.083%;组分G的主要成分为分子质量378 u的肽段,其一级氨基酸组成为赖氨酸(Lys)、亮氨酸(Leu)及丝氨酸(Ser).     

鲍鱼水解肽的抗氧化活性评价、组成分析及稳定性研究

通过研究鲍鱼水解肽的清除自由基能力、还原能力来评价其抗氧化活性,测定水解肽的相对分子质量分布情况、氨基酸含量,对鲍鱼水解肽的营养价值进行全面分析. 结果表明：鲍鱼水解肽具有较强清除自由基的能力和还原力;其相对分子质量在107~10031u范围内呈连续分布,其中小于5000u的水解肽占比达82.0%;水解肽由18种氨基酸组成. 当温度在20~60℃,pH值为7、8、10时水解肽的活性无显著变化,金属离子对DPPH自由基的影响随质量浓度增加逐渐增强,经胃蛋白酶和胰蛋白酶消化5h后,DPPH自由基清除能力保持率分别为（66.03±0.29）%、（109.03±0.57）%.     

海边月见草果壳提取物抗氧化活性的体外评价

采用不同的方法(还原能力、DPPH法、TEAC法、β-胡萝卜素漂白法)评价了海边月见草果壳提取物的抗氧化活性,以BHT和Vc为阳性对照品.结果表明:海边月见草果壳提取物具有较强的还原力,DPPH、ABTS自由基清除能力,自由基清除活性比相同质量浓度BHT强,但比Vc弱.在β-胡萝卜素-亚油酸体系中,果壳提取物对β-胡萝卜素漂白有较强的抑制作用,在质量浓度为50 μg/mL时,对β-胡萝卜素漂白的抑制率达87.8%,与同质量浓度BHT的抑制率(90.1%)相当.海边月见草果壳提取物的还原力,DPPH*、ABTS*+清除能力及抗氧化活性与其质量浓度均呈现明显的量效关系,并与其总酚质量分数较高有关.由此可见,海边月见草果壳可作为新型天然抗氧化剂的来源.     

血红铆钉菇多糖分离纯化及抗氧化活性研究

目的探讨血红铆钉菇的多糖分离纯化及抗氧化活性方法.方法应用传统热水浸提法提取粗多糖,进行反复冻融后初步去除蛋白,再用sevage法除蛋白,纯化后苯酚-硫酸法测糖含量,考马斯亮蓝法测蛋白含量,对多糖进行超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH等体外抗氧化能力试验.结果传统热水浸提方法得糖率为4. 19%,除蛋白后蛋白含量为10. 71%,并且血红铆钉菇多糖对超氧阴离子清除效果最好,而对DPPH和羟自由基的清除效果也较为明显.结论血红铆钉菇有较强的体外抗氧化活性,并且清除率随多糖的浓度增大而增加.     

大孔吸附树脂提取粗壮女贞苦丁茶总黄酮及抗氧化活性

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化苦丁茶总黄酮的最佳工艺及黄酮化合物的抗氧化活性.方法:采用大孔吸附树脂法获得总黄酮.利用紫外分光光度法测定苦丁茶总黄酮不同浓度下在体外对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基和ABTS自由基的清除能力.结果:大孔吸附树脂提取最佳工艺为上样流速为3 mL/min,上样浓度为1.2 mg/mL,其黄酮类化合物在体外抗氧化的能力包括ABTS自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基,在不同浓度下的最大清除能力分别为88.65%、87.94%、89.11%和73.21%.结论:总黄酮对4种自由基有良好的清除效果.     

茶多酚-锌(Ⅱ)配合物的合成及抗氧化活性

首次以信阳废次茶和氯化锌为原料,合成了茶多酚-锌(Ⅱ)配合物(TP-Zn),利用红外光谱、紫外-可见吸收光谱和热分析技术对其结构及性质进行表征和分析.以1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)、邻苯三酚自氧化反应产生超氧阴离子自由基(O2-.)和Fenton反应产生羟基自由基(.OH)为模型,用紫外-可见分光光度法分别测定茶多酚及其配合物对模型中DPPH.、O2-.和.OH的清除作用.结果表明:茶多酚-锌(Ⅱ)配合物清除DP-PH.、O2-.和.OH的能力强于茶多酚,其浓度与抗氧化活性呈一定的量效关系.     

赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位抗氧化活性的比较研究

通过测定1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、还原力、金属离子对其抗氧化活性的影响及总酚质量分数等比较赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位的抗氧化活性。结果表明:赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位清除DPPH的EC50为0.63、0.10 mg/m L;还原力的EC50分别为0.87、0.09 mg/m L。除Al~(3+)、Fe~(3+)外,K~+、Na~+、Mn~(2+)、Mg~(2+)、Cu~(2+)、Zn~(2+)、Ca~(2+)等金属离子对赤楠叶乙酸乙酯部位的DPPH清除作用为抑制作用;除Cu~(2+)、Ca~(2+)外,K~+、Na~+、Mn~(2+)、Mg~(2+)、Al~(3+)、Zn~(2+)、Fe~(3+)等金属离子对赤楠叶二氯甲烷部位的DPPH清除能力有促进作用。赤楠叶二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位的总酚质量分数分别为9.23%与59.17%。可见,赤楠叶乙酸乙酯部位具有较强的抗氧化活性与总酚含量,但其抗氧化活性较易受金属离子的拮抗作用。     

宣威火腿中抗菌肽的分离、纯化及鉴定

为探究干腌火腿中生物活性多肽的抗菌活性及其组成,选取产自中国云南省曲靖地区的宣威火腿为材料,通过缓冲液浸提的方法提取火腿中的多肽成分。以粗提多肽对单增李斯特菌和O157型大肠杆菌的生长抑制情况为指标进行抗菌性评价,同时结合离子交换色谱、尺寸排阻色谱等技术对宣威火腿粗多肽进行分离与纯化,并选取其中抑菌活性较强的组分进行氨基酸序列测定。抑菌实验发现宣威火腿粗多肽具有显著抑制单增李斯特菌和O157型大肠杆菌生长的效果；经过逐级分离纯化得到的各组分具有不同的抑菌活性。其中组分7活性最强,对大肠杆菌和李斯特菌的抑菌率分别为98%和56%。通过Nano-LC-ESI-MS/MS肽序列鉴定,最终得到抑菌活性较强的多肽序列,分别为QYYNGEEHVRFDSDVGEYR、LRNLPNLEVLDLGTNFI、FASFEAQGALANIAVDK。将鉴定得到的3条多肽化学合成后进行抑菌实验发现,合成多肽均具有较好的抑菌效果,对O157型大肠杆菌的生长抑制效果均显著高于单增李斯特菌。研究结果表明宣威火腿中含有抑菌效果的肽类成分,从而为阐释宣威火腿多肽的功能特征提供理论依据。     

不同体积分数洗脱剂对海边月见草茎提取物抗氧化活性的影响

海边月见草茎提取物经X-5大孔树脂吸附,用体积分数为10%、30%、50%、70%的乙醇溶液进行洗脱,得到4种洗脱级分.采用二苯代苦肼自由基(DPPH·)体系、羟自由基体系、超氧阴离子自由基体系及抗卵黄脂蛋白脂质过氧化体系对4个级分的抗氧化活性进行了测定.结果表明,海边月见草茎提取物4种洗脱级分具有不同程度的清除自由基能力,其中30%乙醇级分的抗氧化活性最强.该级分对DPPH自由基的清除率为82.60%,对H2O2/Fe2 产生羟自由基的清除率为65.43%,对邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子自由基的抑制率为26.16%,对卵黄脂蛋白PUFA过氧化的抑制率为80.97%.综合评价其抗氧化活性比芦丁好或相当,但比槲皮素略差.同时显示抗氧化活性与其黄酮体积分数有一定的相关性.     

高抗氧化性小分子阿胶的研究

用碱性蛋白酶对阿胶进行酶解,并采用超滤技术分离制备了平均分子量小于1 kDa的小分子阿胶（CCAH-Ⅱ）。通过多种抗氧化评价方法分析发现制备的CCAH-Ⅱ具有较高的抗氧化活性,质量浓度2 mg/mL的CCAH-Ⅱ对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、2,2-联氮基-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐（ABTS）自由基和羟基自由基的清除率分别可以达到（53.79±1.18）%、（70.53±0.65）%、（80.00±0.45）%。通过氨基酸组成和圆二色谱分析,发现CCAH-Ⅱ中疏水性氨基酸的摩尔分数高达42.40%,β-转角和无规卷曲结构的摩尔分数分别为30.4%、46.8%;推测高占比的疏水性氨基酸、β-转角和无规卷曲结构与小分子阿胶的高抗氧化性密切相关。     

柱色谱法分离玉米油中三亚油酸甘油酯

以玉米油为研究对象,采用柱色谱法,分离提纯其中的三亚油酸甘油酯。分别以硅胶、巯丙基键合银离子硅胶为固定相,以正己烷-乙腈-异丙醇为洗脱剂。采用LC-MS和高温GC-MS的方法对各组分进行结果分析。结果表明:巯基键合银离子硅胶和硅胶这两种固定相应结合使用,玉米油中的三亚油酸甘油酯的分离效果最佳。     

胜利减压渣油中钙的分布及特点

用吸附柱色谱法研究了胜利减压渣油中钙在4组分中的分布,结果表明大部分钙集中在柱残余质中,其余钙主要分布在芳香分、沥青质及苯不溶物中,通过阳离子交换、酸性水溶液萃取、乙醇萃取及红外分析考察了胜利减渣中钙化合物的某些特点。     

酶解章鱼下脚料的产物分析

为了提高下脚料的综合利用率,用4种商业蛋白酶对章鱼下脚料进行水解,并初步分析检测产物中的氨基酸和抗氧化多肽.实验结果表明:动物蛋白酶水解液中的复合氨基酸获取率占总氨基酸的57.12%,达到57.12%;而4种蛋白酶水解产物中肽类物质的·OH清除力IC50均小于1.28 mg·mL^-1,Fe²⁺螯合力IC50均小于2.82 mg·mL^-1,还原力随多肽质量浓度增加而提升;这种工艺条件和方法可以同时获取两类活性物质(复合氨基酸、抗氧化性多肽),     

青钱柳叶多糖不同组分体外降血糖及抗氧化活性研究

【目的】研究青钱柳叶多糖的体外降血糖及抗氧化活性。【方法】以对α-葡萄糖苷酶的抑制作用表示青钱柳叶多糖体外降血糖活性,以总抗氧化能力、清除DPPH自由基、羟基自由基能力和Fe²⁺螯合能力评价其体外抗氧化活性。【结果】青钱柳叶多糖各组分对α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制作用,且呈现一定的剂量-效应关系。不同醇沉多糖组分中,50%醇沉组分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最强; 青钱柳叶多糖各组分均具有一定的抗氧化活性,不同醇沉组分清除DPPH自由基能力以及总抗氧化能力由强到弱依次为50% 组分、60% 组分、70%组分、80%组分,而清除羟基自由基能力以及对Fe²⁺螯合能力的强弱正好相反。【结论】青钱柳叶中含有的多糖组分具有良好的体外降血糖和抗氧化活性,可进一步加工利用。