固定化黄曲霉生产L—苹果酸的研究

报道采用海藻酸钠包埋法,以制备固定化黄曲霉生产Ｌ－苹果酸,确定最佳固定化条件和最适固定化细胞发酵条件,这些条件分别为海藻酸钠浓度２５ｇ．Ｌ＾－１,ＣａＣｌ２浓度２０ｇ．Ｌ＾－１,１０ｇ．Ｌ＾－１聚乙烯多胺和１０ｇ．Ｌ＾－１戊二醛交联,菌体浓度９０ｇ．Ｌ＾－１,葡萄糖浓度８０ｇ．Ｌ＾－１,起始ｐＨ值为６．０－７．０,培养温度３２℃,固定化细胞质量／培养基体积比例为１５／５０。     

聚苯乙烯阴离子交换树脂吸附交联法固定α—淀粉酶

用聚苯乙烯阴离子交换树脂作载体,戊二醛为交联剂,采用吸附交联法固定α＿淀粉酶,研究了固定化条件和固定化酶的性能．结果表明,最佳固定化条件为：酶浓度１２ｇ／Ｌ,吸附温度６～９℃,吸附时间２０ｈ,戊二醛浓度４％,交联时间８ｈ,交联温度６～９℃,ｐＨ７．２．固定化酶的热稳定性、贮存稳定性、ｐＨ稳定性均比自由酶提高．最适作用温度５０℃,最适作用ｐＨ７．２,且适宜作用温度及ｐＨ均较自由酶宽,批式及连续操作实验显示出较好的操作稳定性．吸附交联联用法所得固定化α＿淀粉酶稳定性较好,克服了吸附法所得固定化酶稳定性差的缺点．     

里氏木霉制备木聚糖酶的产酶历程

以玉米芯木聚糖为原料,里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｓｅｉ）ＲｕｔＣ３０为菌种,采用改进的Ｍａｎｄｅｌｓ配方制备木聚糖酶,产酶历程与制备纤维素酶时有较大差异。具体表现在产酶周期短,ｐＨ值基本无下降的趋势,酶液中可溶性蛋白质浓度较低。底物浓度为７ｇ／Ｌ时,木聚糖酶活力达１２５６ＩＵ／ｍＬ,比活力、酶得率及酶产率分别为８１９０ＩＵ／ｍｇ蛋白质、１７９４３ＩＵ／ｇ木聚糖和４１８６．７ＩＵ／Ｌ·ｄ。产酶最终ｐＨ应控制在６～７较为适宜,酶活力最高。ｐＨ超过７．０,酶可能失活。酶解结果表明,木聚糖酶对木聚糖干粉具有很高的降解效率,当每克底物的酶用量为０．１克木聚糖干粉产的酶液量时,酶解得率一般可达９０％左右。     

固定化细胞合成L—苯丙氨酸的酶活及稳定性

研究了固定化酶ＰＡＬ合成Ｌ－苯丙氨酸过程中的酶活力与酶稳定性情况，找出了维持酶活的最佳保存条件，考察了不同氨基供体、肉桂酸、ｐＨ值及酶的不同固定化量等因素对酶反应过程的影响，确定其适宜反应条件为肉桂酸１．５％～２．０％，醋酸铵２～４ｍｏｌＬ－１，ｐＨ８．５～１０，温度３０℃，细胞固定化量为０．１ｇ湿细胞／ｇ固定化颗粒     

电聚吡咯固定化酪氨酶电极的制备及性能

用恒电位法在电化学聚合吡咯的同时,将酪氨酸酶固定在导电聚吡咯膜内,制成一种灵敏、稳定的酪氨酸酶电极。讨论了溶液ｐＨ值和聚合电位对本科固定化的影响,对酶分子嵌入前后吡咯膜的ＳＥＭ图和ＣＶ曲线进行了分析和比较。该电极响应对甲苯酚的线性范围为５．０×１０＾－８～１．０×１０＾－６ｍｏｌ·Ｌ＾－１,最适ｐＨ值为６．６,酶反应表现上遵循Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ－Ｍｅｎｔｅ动力学,表观米氏常数为２．２×１０＾－５ｍ     

蛋白双酶（胰蛋白酶─木瓜蛋白酶）的固定化研究

以脱乙酰壳多糖为载体，戊二醛为交联剂，对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的固定化条件及固定化双酶的动力学性质进行研究．实验对比了交联剂的用量、交联的ｐＨ值、温度及载体与酶的比例等因素对固定化的影响．确定了固定化双酶的催化特性：最适ｐＨ７．５～８．１，最适温度是６０℃，Ｋｍ值是０．５２ｍｇ／ｍｌ，并对固定化双酶的热稳定性、固定化双酶的活性与固定化单酶的活性进行了比较．     

壳聚糖固定化蚯蚓纤溶酶及其性质

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联荆,用吸附交联法固定蚯蚓纤溶酶,对蚯蚓纤溶酶的固定化条件及固定化酶的各种性质进行了研究,确定了酶固定的最适条件:1 g用pH为6.5的磷酸盐缓冲液浸泡的壳聚糖载体与5 mL体积分数为1%戊二醛在25℃交联8 h,充分洗去戊二醛之后,加入蚯蚓纤溶酶13 U,4℃吸附6 h,充分洗去未交联的游离酶,酶活力回收最高大约为63%,固定化酶的比活为0.082 U/mg.固定化酶,游离酶的最适温度均为50℃,游离酶的最适pH值为8.5,而固定化酶的最适pH值为8.0,固定化酶的热稳定性,pH稳定性均比游离酶有所提高,游离酶、固定化酶都能水解纤维蛋白原和纤维蛋白,固定化酶不再水解BSA.     

棒曲霉UA—2木聚糖酶的蔗渣固态发酵

棒曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｃｌａｖａｔｕｓ）ＵＡ－２固态发酵蔗渣产木聚酶的培养基为每克蔗渣加营养液５ｍｌ，初始ｐＨ８．５．营养液的适宜组成为每升含：ＮＨ４ＮＯ３１０ｇ、Ｋ２ＨＰＯ４６ｇ、ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．７５ｇ、ＣａＣｌ２０．７５ｇ、ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ１１．２５ｍｇ、ＭｎＳＯ４·Ｈ２Ｏ３．７５ｍｇ、ＺｎＳＯ４３．０ｍｇ、ＣｏＣｌ２４．５ｍｇ．在上述培养基中接入其湿重１０％（Ｗ／Ｗ）的新鲜的ＵＡ－２种子曲，２８℃培养１０８ｈ，其木聚糖酶，滤纸降解酶和羧甲基纤维素酶的活力分别为２６９５．６、２８．５和４２．７ｕ／ｇ蔗渣．酶反应的最适ｐＨ５．０，最适温度５０℃；在ｐＨ４．０～１１．０内酶活性十分稳定．５０℃保温１ｈ，酶活剩余５５％，８℃下放置２３ｄ，活力几乎不变．磷酸盐，半胱氨酸对酶有激活作用，ＥＤＴＡ和对氯汞本甲酸对酶有抑制作用     

内孢霉酵母糖化酶产酶条件及酶学特性的研究

本研究对Ｅｎｄｏｍｙｃｏｐｓｉｓｆｉｂｕｌｉｇｅｒａ（内孢霉酵母）糖化酶发酵进行培养基的选择，并对产酶时间、接种量、装量和初始ｐＨ值诸因素进行探讨，获得最佳产酶条件．该糖化酶以可溶性淀粉为底物，最适ｐＨ为５．２，最适温度４０℃；在５０℃以下较稳定，有较宽的ｐＨ稳定范围（ｐＨ３．０－７．０）；米氏常数Ｋｍ＝１２．８４ｍｇ·ｍｌ－１．     

抗癌酶制剂L—天冬酰胺酶在甲壳素上的固定化

研究了以甲壳素为载体固定化Ｌ－天冬酰胺酶的最适条件,探讨了固定化Ｌ－天冬酰胺酶的一系列理化性质。交联剂用量、缓冲液ｐＨ值和载体活化时间均对Ｌ－天冬酰胺酶的固定化有一定影响,得到的固定化Ｌ－天冬酰胺酶的活力回收可达２５．４％。固定化Ｌ－天冬酰胺酶理化性质的实验研究表明,酶经固定化后,对蛋白水解酶的稳定性及存贮稳定性均较游离酶有很大程度的提高。     

固定化菊粉酶连续降解菊芋果聚糖的研究

克鲁维酵母（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ｙ－８５产生并经部分纯化的胞内菊粉酶（ｅｎｄｏｃｅｌｕｌａｒｉｎｕｌｉｎａｓｅ）,采用共价键交联吸附法固定化．以菊芋果聚糖为底物测定,所制得固定化酶在ｐＨ５．０和温度５５℃下反应显示最大活性,对热的稳定性和贮存稳定性比游离酶明显提高,并显示出外切菊粉酶（ｅｘｏｉｎｕｌｉｎａｓｅ）性质．在装有１７．６ｍＬ固定化酶填充床反应器（ｐａｃｋｅｄ－ｂｅｄｒｅａｃｔｏｒ）中,以１．７ｈ－１的空间速度进料,５０℃下连续操作４ｄ,４．５％菊芋果聚糖液可被１００％降解,反应器定容产率为７７．０ｇ·Ｌ－１·ｈ－１,半衰期２７ｄ,降解产物（总糖）含８５％果糖     

黑曲霉AJ1958菊粉酶的产生和性质

从菊芋根际土壤中分离出一株菊粉酶（ＩｎｕｌｉｎａｓｅＥ．Ｃ．３．２．１．７）产生菌，经物理和化学诱变得高酶活黑曲霉突变株ＡＪ１９５８．该菌株在培养基（０．０７ｇ／ｍＬ菊芋提取液１０００ｍＬ，豆饼粉５ｇ，麸皮５ｇ，ＫＣＩ０．７ｇ，ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０１ｇ，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．５ｇ，ＰＨ５．０）中，于３０℃振荡培养３ｄ，酶活力可达６４μｍｏｌ·ｍｉｎ－１．酶水解反应的最适ＰＨ为３．０～４．０，最适温度为６０℃，在ＰＨ２．５～５．５的范围内和７５℃以下较稳定．适宜条件下，１０ｈ内０．０５ｇ／ｍＬ的菊粉溶液中之底物几乎１００％被酶水解．产物糖中果糖质量分数为９３％，葡萄糖质量分数为５．６％．该突变株产生的菊粉酶具有较满意的水解性和热稳定性．     

修饰性载体固定化漆酶

采用壳聚糖铜固定化和交联酶聚集体的方法固定化漆酶.探索了固定化前后漆酶的最适温度、pH,热稳定性和金属离子对其活性的影响,交联漆酶聚集体制备的条件.结果为:游离漆酶的最适温度是20℃,最适pH是4.6;壳聚糖铜固定化漆酶的最适温度是25℃,最适pH是4.0;交联漆酶聚集体的最适温度是15℃,最适pH是3.6.固定化后漆酶的热稳定性提高,不同金属离子影响固定化漆酶的活性,其中K+的激活作用尤为明显.制备交联漆酶聚集体最适戊二醛浓度为1%,最适交联时间是2 h.     

磁性复合微球固定化脂肪酶的研究

用壳聚糖和二氧化硅共同包裹Fe3O4纳米粒子制得磁性高分子微球,并以此为载体,以戊二醛为交联剂固定化脂肪酶,探讨了固定化过程中戊二醛浓度、固定化时间、固定化pH对固定化酶活力的影响.结果表明,固定化脂肪酶的最佳条件:时间为10h,pH为7.5,戊二醛的浓度为8％.同时还对固定化酶与游离酶的最适温度和最适pH作了测定,固定化酶的最适温度为50℃,比游离酶的最适温度为40℃,提高了10℃;固定化酶的最适pH为7.0,与游离酶的最适pH7.5相比,向酸性偏移了0.5.     

用邻硝基苯基荧光酮和溴化十六浣基三甲基铵分光光度法测定微…

在ｐＨ为６．３的六次甲基四胺－盐酸介质中，铜（Ⅱ）－Ｏ－ＮＰＦ－ＣＴＭＡＢ络合物的最大吸收波长为５９５ｎｍ，摩尔吸光系数值ε为１．２５×１０＾５Ｌ·ｍｏｌ＾－１·ｃｍ＾－１。铜浓度在０－７μｇ／２５ｍｌ８范围内服从比耳定律，用本法测定了铝合金和天然水中微量铜。     

固定化木瓜蛋白酶的研究及其应用

从8种载体材料中选取自制的氨基含量约2．878mmol/g的甲壳质作为固定化载体,采用吸附交联法,以戊二醛为交联剂,对木瓜蛋白酶进行固定化。17．5mg/g的固定化酶／载体比较,pH6.5,5℃下,先吸附10min,再以0．7％的戊二醛终浓度交联12h,所得固定化酶酶活回收可达52．0％,酶活力为3．54U／g。固定化酶在65℃以下,溶液酶在55℃以下稳定;固定化酶在pH7.0以下稳定,溶液酶在pH6.0以下稳定;5℃条件下,固定化酶贮藏半衰期为183d;以酪蛋白为底物,固定化酶的操作半衰期可达27d。用固定化酶水解甲壳胺,产物分子量小于10 000的甲壳胺低聚糖得率约为45．55％。     

灵芝良种选育Ⅰ：影响灵芝原生质体形成的因素

对灵芝的原生质体形成条件进行了研究。结果表明,合适的在生质体形成条件为酶组成蜗牛酶４ｇ／Ｌ,溶壁酶５ｇ／Ｌ;ｐＨ７．１７的磷酸缓冲液;酶解温度３０℃;酶解时间４ｈ;菌龄７２ｈ;稳定剂０．６ｍｏｌ／Ｌ的ＫＣｌ。原生质体最高产量为５．２×１０＾６个（ｇ·Ｌ＾－１）。灵芝菌丝释放原生质有顶端的边上二种方式。     

壳聚糖固定化果胶酶的制备及其酶学性质研究

以1％壳聚糖与5％戊二醛交联8h制得交联壳聚糖载体,1g载体固定10mg的果胶酶,载体先与酶液缓慢振荡混合30min后,在固定化体系（pH3．4,4℃）中固定反应12h,该条件下制得的固定化酶强度大韧性好。酶活力回收率高达56．31％;固定化酶的最适温度50℃,最适pH3．4,Km^app值为5．42mg·mL^-1,连续使用7次后,酶活力还保留70．45％以上,具有较好的操作稳定性。     

背角无齿蚌酸性磷酸酶的分离、纯化及部分性质研究

从背角无齿蚌外套膜中,经盐析,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－５０离子交换柱层析及Ｓｅｐｈａｄｅｘ,Ｇ－１５０凝胶过滤等步骤,分离提纯到一种酸性磷酸酶,提纯倍数８８．２５酶液比活力为２４．７Ｕ／ｍｇ,通过动力学方法测得其最适ｐＨ值为４．８,最适温度为５０℃,同样以对硝基苯磷酸二钠作底物测得其Ｋｍ值为０．７３ｍｍｏｌ／Ｌ ,Ｚｎ＾２＋对酶有激活作用,而Ｆ＾－,Ｐｂ＾２＋和Ｂａ＾２＋则对酶有一定的抑制     

壳聚糖铜固定化漆酶研究

用壳聚糖与CuSO2.5H2O溶液络合成的壳聚糖铜为载体,固定化白毒鹅膏菌胞外漆酶,测定了铜盐浓度、络合时间、固定化时缓冲液的pH值、固定化时间、给酶量对固定化酶性质的影响。实验得出固定化最佳条件是在20℃、pH7.0的磷酸缓冲液中,固定2个小时,这种条件下酶活保持率为50.2%。固定化酶的最适pH值4.0比游离酶的4.6偏酸;固定化酶的最适温度24℃。