细菌内毒素检查法在人血白蛋白中的应用研究

报告了用细菌内毒素检查法低替家兔法对人血白蛋白进行热原质检查的研究结果。在半成品检查中，两种方法的符合率达９７．８７％；在成品实验室验证中，符合率为１００％。并提出了人血白蛋白细菌内毒素限值应小于０．０２５ＥＵ／ｍｇ，遇结果难判定者应经家兔法判定。     

青紫兰兔与新西兰兔用于热原试验的比较研究

<正> 我厂每年使用大量家兔用于某些抗生素和生化药品的热原试验。目前,国内用于热原试验的家兔多选用青紫兰与新西兰两个品种,这两个不同品种的家兔在热原试验中效应如何,不很清楚,一些有关专家学者对此看法也不尽相同,国内有关资料,尚未见公开报道,我们为了弄清这两种不同品种的家兔用于热原试验反应,而进行了体温稳定性和敏感度等多方面的探讨试验,以便选择适合我厂用于热原试验的家兔品种,现将初步试验研究结果报道如下: 材料和方法 (一)材料: (1)试验用兔:青紫兰和新西兰兔均来自本厂动物场封闭群生产的实验用兔。长     

一种替代家兔热原试验的新方法初探--检测THP-1细胞系释放的TNF-α

为了寻找一种替代家兔热原试验的方法,最近我们对用THP-1细胞系检测热原的可行性进行了初步探索.其原理是将细菌内毒素标准品刺激THP-1细胞6 h后,用ELISA双抗夹心法测定其释放的内源性热原(TNF-α).试验结果表明TNF-α的量与内毒素的量在一定范围(0.32EU/mL-200EU/mL)内有很好的相关性,两种不同来源的内毒素得到的结果相似.说明该方法作为替代家兔热原检查的新方法有一定的可行性.     

一种替代家兔热原试验的新方法初探--检测人全血中的TNF-α

为了寻找一种替代家兔热原试验的方法,最近我们对用人全血检测热原的可行性进行了初步探索.其原理是将细菌内毒素标准品与从健康自愿者提供的少量肝素抗凝全血共同孵育6h后,用ELISA双抗夹心法测定其产生的内源性热原(TNF-α).试验结果表明TNF-α的量与内毒素的量在一定范围(0.06EU/mL～200EU/mL)内有很好的相关性,不同来源的内毒素试验结果也是如此.说明该方法作为替代家兔热原检查的新方法有一定的可行性.     

用全血或细胞替代家兔进行热原检查的方法研究

热原检查是药物注射剂及输注用品质量控制的一个重要指标 ,目前普遍采用的方法是家兔法和鲎试验法。由于两种方法都存在缺陷并受到资源的限制 ,寻找新的替代家兔热原试验方法势在必行。我们对用家兔血浆、人血浆以及THP 1检测热原的可行性进行了初步探索。其原理是 :分别将细菌内毒素标准品与从健康家兔取出的肝素抗凝全血、健康自愿者提供的人肝素抗凝全血以及THP 1细胞共同孵育后 ,用ELISA双抗夹心法测定其产生的细胞因子TNF α和IL 6的释放量 ,作为内源性检测指标来判定内毒素的致热作用。结果表明 :无论兔全血、人全血还是THP 1…     

家兔对细菌内毒素致热耐受性的实验研究

目的　探讨家兔多次使用后是否对细菌内毒素致热产生耐受现象。方法　对家兔进行常规热原试验 ,间隔两天做一次 ,共做三次。每次对同一家兔注射同一剂量的内毒素 ,间隔 15min记录一次温度。结果　第三次家兔升温幅度明显低于第一次和第二次的结果。结论　家兔多次使用后对细菌内毒素致热原产生耐受性     

人血白蛋白对两种分子量尿激酶的热变性保护作用

对比研究了人血白蛋白对两种分子量的尿激酶保护作用及其作用机理,同时研究了溶液的pH和盐浓度对这种保护作用及其对热变性产物构象的影响。     

热原及其检测方法的研究进展

目的:对热原物质及其检测方法进行阐述。方法:通过对热原物质本质的分析,总结药典要求的家兔热原检测法和内毒素检测法的优缺点,并根据两种常用检测方法使用存在的局限性,简要介绍新的热原检测法-细胞检测法。结果与结论:家兔法和内毒素检测法的影响因素限制了检测方法的使用范围,新的检测方法拓宽了检测范围,实现标准化,但仍需要进一步验证和论证,故需要进一步完善热原检测方法,实现药品的使用安全。     

进行细菌内毒素检查应注意的问题

进行细菌内毒素检查应注意的问题杨鸣岗华北制药集团（石家庄０５００１５）自１９４２年美国药典首先将家兔升温试验作为药品注射剂的热原检查后相继世界各国药典均规定了这一检查法。半个世纪以来这项检查方法对保障人类生命安全发挥了重要作用。然而家兔热原检查法也带...     

科学饲养,提高家兔使用率

静脉注射药物的重要检验项目之一是热原检查。热原检查的方法主要采用家兔法和细菌内毒素检查法。虽然在国外常常采用后者 ,但仍有许多品种 ,尤其是国产药品多采用家兔法进行热原检测。为保证药品检验结果的准确性和可靠性 ,首先必须确保实验动物的质量符合试验要求 ,我所检验用的实验家兔是中国兽药监察所繁殖生产的一级大耳白兔。实验家兔的饲养方法过去一直采用自由采食 ,即每天上、下午各添颗粒料一次 ,每次约 1 0 0 ｇ以上 ,由于添加的饲料超过正常需要量 ,易造成体重增长过快 ,因超重而被淘汰 (药典规定做热原检查用的家兔体重不得超…     

热原检查用家兔正常体温的统计分析

目的　分析热原检查用家兔正常体温的动态变化。方法　按照有关规程对热原检查用家兔进行体温测定 ,并采用生物统计方法进行统计分析。结果　热原检查用家兔一年中正常体温 5— 7月份与 2— 4月份存在显著性差异 (P <0 0 5 ) ;二次用兔的正常体温平均值明显高于新兔的正常体温平均值 ,二者温差为 0 0 7℃ ,且存在显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　热原检查用家兔正常体温随时间和使用状态而有所变化     

注射用头孢西丁钠细菌内毒素检查法与热原检查法的比较

目的:通过细菌内毒素检查法与热原检查法的比较实验,建立注射用头孢西丁钠的细菌内毒素检查法.方法:通过家兔试验确定注射用头孢西丁钠的致热阈值、内毒素限值,选用鲎试剂灵敏度为0.125 EU·mL-1样品质量浓度设定为0.83 mg·mL-1;鲎试剂灵敏度为0.25 EU·mL-1样品质量浓度设定1.66 mg·mL-1两种不同质量浓度为干扰实验质量浓度确定头孢西丁钠的试验质量浓度.结果:注射用头孢西丁钠对细菌内毒素的干扰作用可以通过稀释的方法排除,最后确定限度为每1 mg含细菌内毒素不高于0.13 EU.结论:注射用头孢西丁钠可用于细菌内毒素检查法代替家兔法进行热原检查.     

草药物与人血白蛋白相互作用的分光光度法研究

以曙红Y为光谱探针,采用分光光度法探讨抗癌药物足叶乙甙对人血白蛋白中曙红Y的竞争结合规律,研究足叶乙甙与人血白蛋白的相互作用及结合.结果表明,曙红Y与人血白蛋白以静电作用力为主进行结合,形成电子转移配合物.曙红Y与人血白蛋白结合后,药物足叶乙甙的加入对这种结合产生破坏,争夺并占据人血白蛋白的结合点位,使曙红Y从结合态变成游离态,同时生成新的更为稳定的结合体—人血白蛋白与药物足叶乙甙复合物,其结合比约为7.93molVp16/molHSA.由此说明:足叶乙甙不仅与人血白蛋白存在有效的结合点位,而且具有较好的结合强度和结合容量.这些既是足叶乙甙在人体内贮存和运输的条件,也是其产生抗癌活性的药理基础.     

家兔固定时间对热原试验结果的影响

目的　分析家兔固定时间对热原试验结果的影响。方法　按照《中国生物制品规程》2 0 0 0年版的生物制品热原质试验规程进行。结果　按规定测量 6次体温 ,制品均合格 ,而延长测温 2h ,变为不合格和复试的制品批次占总试验批次的 30 8% ,且存在显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　家兔固定时间过长可致热原试验结果出现误差     

类人胶原蛋白生物相容性实验研究

目的 为扩大类人胶原蛋白的应用，评定和比较猪胶原蛋白、类人胶原蛋白和明胶在动物体内的生物相容性。方法分别用胶原材料和明胶进行以下生物学测试：急性毒性试验、溶血试验、热原试验、皮肤刺激试验。根据标准对试验数据进行分析和评估。结果类人胶原蛋白的急性毒性试验、溶血试验、热原试验、皮肤刺激试验均为阴性。结论材料生物学测试结果显示类人胶原蛋白较其他两种材料的生物相容性更高，是理想的医用生物材料。     

苦参碱氯化钠注射液中细菌内毒素检查方法研究

苦参碱氯化钠注射液对其中细菌内毒素检查有抑制作用，通过稀释的方法可排除其干扰，其最大不干扰浓度为0．15mg/mL。试验结果表明，选择适宜灵敏度的鲎试剂，本品的热原检查可用检查细菌内毒素的方法代替家兔法。     

自动热原试验处理仪通过科研成果鉴定

在中国药品及生物制品检定所和天津药品检验所的协助下,由我校电机工程系生物医学工程和仪器专业研制成功的“GJ-ZRE自动热原试验处理仪”成果鉴定会于 1988年12月14日在我校召开。 该仪器实质是一种完成药典热原检查程序要求的高准确度多路测温处理仪。利用家兔做试验,对注射剂药品等的热原(微生物的排泄物及其尸体等)进行测试,以判定药品是否合格。仪器能完成 40路热原试验的测温,比先进的丹麦同类仪器 APT 75的分辨率高一个数量级;准确度高一倍多;仪器软件丰富,是目前国内外同类仪器中功能最完善的。鉴定委员会一致认为该仪器达到国…     

室温对家兔体温的影响

目的分析不同室温对家兔体温的影响。方法根据2000版《中国生物制品规程》热原实验规程对家兔体温进行测定。结果在一定范围内,随着室温的升高,家兔体温筛选合格率也随之升高,在20℃~21℃时家兔体温筛选合格率最低(43%),而在24℃~25℃时筛选合格率最高(71%);室温在22℃~25℃时,家兔体温在38.5℃~39.0℃这一组构成比均超50%。结论不同室温对家兔体温的变化有影响,在进行热原实验前的家兔筛选时应予以注意。     

家兔性别与体温变化对热原检测结果的影响

目的对普通级家兔的体温变化范围、雌雄家兔间体温变化的差异进行统计,分析家兔性别是否对热原检测结果产生影响。方法按照中国生物制品规程(2000年版)中对热原检测的规定,对实验家兔体温进行测定。结果预检体温结果显示雌性家兔平均体温较雄性家兔体温偏高约0.4℃,且存在显著性差异(P<0.05)。在检测实验中由雌性体温波动导致检测结果为复试的与由雄性体温波动引起需复试的比例约为6∶1。结论雌性家兔在基础体温和体温波动幅度上都高于雄性家兔,且稳定性较雄性差。雌性家兔更易导致检测结果出现偏差。     

白蛋白利凡诺张合物解离条件研究

用利凡诺法生产人血白蛋白的关键是白蛋白利凡诺络合物的解离，它直接影响着白蛋白生产的进程与白蛋白的回收率以及质量，为此，本文研究了ＮａＣｌ浓度，温度，ｐＨ值与利凡诺的质量等因素对解离的影响，摸索出几种在解离不良的条件下仍能获得较高产量和优质产品的有效方法。