禽源沙门氏菌不同检测方法的比较及分型研究

本研究采集同一地区三家规模化蛋鸡场的饲料、肛拭子和病死鸡样品共813份,分别采用本实验室改进的环介导等温扩增技术(LAMP)、普通PCR技术以及美国农业部沙门氏菌分离培养标准(USDA MLG 4.05)进行沙门氏菌检测,并对分离株进行血清型鉴定及ERICPCR分型.结果,三种方法均检出沙门氏菌阳性16份,检出率同为1.97%.其中病死鸡、饲料和肛拭子中检出率分别为11.29%、3.03%和1.02%.16株禽源沙门氏菌中有7种血清型,其中12株沙门氏菌ERIC-PCR分型相似性均小于90%.结果表明,本实验室改进的LAMP方法与PCR方法检出率相同,与USDA MLG 4.05的符合率为100%.16株沙门氏菌血清型多样,分子分型的相似度低.     

陕西省致仔猪腹泻大肠埃希菌的血清型调查

研究了陕西省致仔猪腹泻大肠埃希菌的流行血清型。对分离自腹泻仔猪粪便的131株疑似大肠埃希菌进行生化试验、溶血性试验分析,并对其血清型进行鉴定。121株分离菌符合大肠埃希菌的生化特征,鉴定率为92.37%;有溶血性的菌株占总分离株的81.82%(99/121),其中23株出现β溶血现象,76株出现α溶血现象,22株溶血现象不明显;血清型定型104株,占分离株的85.95%(104/121)。这些定型菌株涵盖了13种血清型,其中O80血清型分离率为28.85%(30/104),O141血清型为19.23%(20/104),O139血清型为9.62%(10/104);O6,O9,O20,O101各有6株;4株及以下的血清型的有O38,O45,O93,O138,O147,O157。血清型O80,O141和O139为陕西省致仔猪腹泻大肠埃希菌的优势血清型。     

鸡源大肠杆菌分离鉴定与药敏试验

自成都市某养鸡场发生的疑似大肠杆菌病的病死鸡肝脏中无菌采取10份病料,分离鉴定出5株大肠杆菌,经O血清型鉴定,除一株未定型外,共鉴定出4株大肠杆菌的O血清型,分别是O37两株、O84和O100各一株．用18种抗菌药物进行药敏试验,分离菌株耐药性非常严重,以多重耐药为主,最少的耐药10种,最多的耐药17种,其中,对罗美沙星、诺氟沙星、环丙沙星、氨苄西林、阿莫西林、氧氟沙星、恩诺沙星和复方新诺明100％耐药（5／5）：对甲氧苄啶、四环素和链霉素80％耐药（4／5）;对新霉素、庆大霉素、头孢氨苄、头孢拉定和头孢唑啉60％耐药（3／5）;对阿米卡星20％．耐药（1／5）．结果提示,同一鸡场的发病鸡群存在着多种血清型,耐药谱复杂,且没有一种抗生素对所分离的菌株全部敏感．     

潍坊地区仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定

为了掌握潍坊地区猪群中导致仔猪黄痢的致病大肠杆菌的主要血清型及分布情况,研制与本地区血清型一致的菌苗,有效防治仔猪黄痢的发生,用细菌分离培养的方法,对潍坊地区6个养猪主要县市的14个规模化猪场和22个养猪专业户采集疑似仔猪黄痢病料76份,共分离出65株致病性大肠杆菌,并用大肠杆菌O抗原单价血清对其进行血清型鉴定。结果表明,65株致病性大肠杆菌中有45株能确定血清型,分布在9个血清型中,其中优势血清型为O8(11株),O9(9株),O141(8株),占定型菌株的62.2%,其余血清型为O45(3株)、O147(3株)、O20(2株)、O157(3株)、O101(4株)、O119(2株)。     

佛山地区禽源性大肠杆菌血清型研究

本文从佛山地区采集临诊上有典型大肠杆菌病变的病、死禽病料，经细菌分离培养和生化试验鉴定出33株大肠杆菌。经O血清型测定，共鉴定出16个分离株的O血清型，这些分离株覆盖了即O1，O26，O36，O56，O60，O78，O141，其中以o78血清型为主，共6株，占定型菌株的37．5％；O78血清型在种类上只占定菌株血清型总数的14．3％(1／7)。因此可以认定O78型为主要流行血清型。     

鸡大肠杆菌病的流行病学研究

对来源于河南省32个县市的93株鸡致病性大肠杆菌进行了O血清型的鉴定、16种抗生素药物的耐药性试验和耐药性质粒的检测分析.结果表明:河南省鸡致病性大肠杆菌的血清型种类众多,以O78、O1、O2为优势血清型,分别占定型菌株的35.14%、18.92%、13.51%;耐药图谱复杂,可以分为58种耐药类型,菌株耐药种类3~14种;质粒图谱复杂,可分为49种质粒图谱,质粒条带1~6条.     

牦牛德尔卑沙门氏菌的分离、鉴定及致病性研究

为调查四川省阿坝州红原县牦牛腹泻病因,本课题组从红原县4所养殖场采集牦牛腹泻粪便16份,并对分离株进行多位点序列分型、血清型鉴定、耐药性试验及小鼠致病性试验.结果表明：16份样品共计分离出16株沙门氏菌,均为德尔卑沙门氏菌ST71型,100%菌株对四环素、氨苄西林、氯霉素和头孢噻呋多重耐药;选取腹泻较严重牦牛粪样沙门氏菌分离株（编号15XLR）进行致病性试验,得出分离株15XLR的半致死剂量为1.2×107 CFU,病理切片结果显示小鼠后脾脏、肠道损伤严重.本研究对红原县牦牛腹泻病因进行了调查研究,并证实德尔卑沙门氏菌除感染猪鸡外,其能够入侵牦牛机体,提示牦牛腹泻疾病的防控应注重沙门氏菌的感染以及在牦牛群体中的传播.     

重庆市水产品中副溶血性弧菌分离株的毒力基因研究

目的:了解重庆市副溶血性弧菌分离株的毒力基因、血清型以及耐药性,为防治副溶血性弧菌引起的食源性疾病提供依据.方法:采用PCR方法检测溶血素基因,并结合药敏试验以及血清分型进行综合分析.结果:323份水产品样品中共分离出的35株副溶血性弧菌,其tdh和trh基因携带率分别为14.29%、2.86%,血清群主要为:O3群、O5群、O1群;14株临床分离株主要为O1群、O3群.两组不同来源的菌株均对头孢噻肟、环丙沙星、诺氟沙星敏感,对氨苄西林均有较强的耐药性.结论:重庆地区水产品中副溶血性弧菌的毒力基因携带率较低,但是血清型呈现多样性,且耐药性较严重,因此存在发生副溶血性弧菌食物中毒的潜在危险.     

禽源致病性沙门氏菌四环素耐药性基因tetC的PCR扩增及序列分析

通过对临床分离并经生化实验和血清学试验鉴定的20株禽源沙门氏菌和1株标准株C79-13进行药敏试验,结果证明:有19株有高耐药性,另外2株有低耐药性,耐药率达100%;对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验符合率为100%;利用PCR检测四环素耐药基因tetC具有很高的敏感性和特异性,从而为禽类致病性沙门氏菌的耐药性检测提供了高效敏感的手段.     

韶关地区鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定

对韶关郊区某些鸡场送检的病鸡进行病理剖检及细菌分离鉴定,确定送检病例30%由鸡白痢沙门氏菌引起,其发病日龄为4~120.从病鸡的心、肝、肠组织等均分离到该菌.药敏试验显示该菌株对呋喃妥因、头孢噻肟和阿米卡星高度敏感.试验结果表明:韶关地区肉仔鸡群鸡白痢沙门氏菌的感染率很高,并已成为严重危害当地养鸡业的重要疾病之一.     

西藏地区牦牛源沙门菌分离鉴定、血清分型及致病性研究

本研究旨在了解西藏地区牦牛源沙门菌流行情况、分布情况和血清型种类.通过采集西藏全区七地市牦牛腹泻粪便,利用细菌培养特性、生化特性和分子生物学方法对样品中细菌进行分离鉴定,再根据血清特异性凝集对分离菌株进行血清分型,最后利用动物感染试验和动物组织HE染色法了解菌株致病性强弱.结果表明：西藏全区共分离出50株沙门菌,检出率为25.13%（50/199）.其中,拉萨、昌都和山南三地分离率相较于其他四地较高,阿里地区分离率最低;血清型分型结果显示,共分离出B群、C1群、C2群、D群4种血清群,包含都柏林沙门菌、伤寒沙门菌、阿邦尼沙门菌等血清型共18种血清型.按血清群统计结果显示,4种血清群中,以D群所占血清菌株最多,为常见血清群;50株沙门菌种以都柏林沙门菌为优势血清型,占所有菌株的20.00%（10/50）;从各地区沙门菌分型结果显示,各地区所占血清群、血清型数量均不相同.致病性试验结果显示：牦牛源都柏林沙门菌感染KM小鼠的LD₅₀为0.368×10⁸CFU/mL,属强致死性菌株;组织HE染色观察结果显示牦牛源都柏林沙门菌可引起宿主全身性损坏,其中...     

痢疾志贺氏菌8型O-抗原基因簇的破译和特异基因的筛选

志贺氏菌是引进细菌性痢疾的重要病原菌，尤其对发展中国家卫生条件不平衡的地区，可造成爆发性流行．本研究用鸟枪法对痢疾志贺氏菌8型的O—抗原基因簇进行测序，得到序列全长为9227bp．用生物信息学的方法进行序列分析，共发现7个基因，分别是：单糖合成基因gne，糖基转移酶基因(4个)；O—抗原转运酶基因wzx和O—抗原聚合酶基因wzy．并用PCR的方法筛选出了针对痢疾志贺氏菌8型细菌的特异基因，可以用于基因芯片或PCR方法对痢疾贺氏菌8型细菌的快速检测．     

大麻脱胶高酶活菌株的诱变选育

原始菌株Bacillus sp.No.46经紫外诱变后,挑取76株进行摇瓶初,复筛,复得10株诱变株,果胶酶酶活高于原菌株20％－30％,聚半乳糖醛酸酸酶活提高35％－70%,连续液大麻脱胶试验残胶率低于10％,脱胶后大麻纤维特数可达19－11,脱胶后酶活酶活损失约20％,脱胶酶液至少可用2次以上。     

Determination of the genus-specific antigens in outer membrane proteins from the strains of Leptospira interrogans and Leptospira biflexa with different virulence

Objective:To determine the existence of genus-specific antigens in outer membrane proteins (OMPs) of leptospira with different virulence. Methods: Microscope agglutination test (MAT) was applied to detect the agglutination between commercial rabbit antiserum against leptospiral genus-specific TR/Patoc I antigen and 17 strains of Leptospira interrongans belonging to 15 serogroups and 2 strains of Leptospira biflexa belonging to 2 serogroups.The outer envelopes (OEs) of L.interrogans serogroup Icterohaemorrhagiae serovar lai strain lai (56601) with strong virulence and serogroup Pomona serovar pomona strain Luo (56608) with low virulence,and L.biflexa serogroup Semaranga serovar patoc strain Patoc I without virulence were prepared by using the method reported in Auran et al.(1972).OMPs in the OEs were obtained by treatment with sodium deoxycholate. SDS-PAGE and western blot were used for analyzing the features of the OMPs on electrophoretic pattern and the immunoreactivity to the antiserum against TR/Patoc I antigen, respectively. Results:All the tested strains belonging to different leptospiral serogroups agglutinated to the antiserum against leptospiral genus-specific TR/Patoc I antigen with agglutination titers ranging from 1:256-1:512. A similar SDS-PAGE pattern of the OMPs from the three strains of leptospira with different virulence was shown and the molecular weight of a major protein fragment in the OMPs was found to be approximately 60 KDa.A positive protein fragment with approximately 32 KDa confirmed by Western blot,was able to react with the antiserum against leptospiral genus-specific TR/Patoc I antigen, and was found in each the OMPs of the three stains of leptospira.Conclusion: There are genus-specific antigens on the surface of L.interrogans and L.biflexa. The OMP with molecular weight of 32 KDa may be one of the genus-specific protein antigens of leptospira.     

禽致病性大肠杆菌研究进展

从大肠杆菌的危害性、毒力因子和致病机理等方面对国内外关于禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia coli,APEC)的研究进行了综述。APEC的血清型众多,尤以O1,O2和O78最为常见,可引起鸡、火鸡等其他禽类的气囊炎、肝周炎、心包炎、败血症等其他肠道外疾病,给养禽业带来严重威胁和造成重大经济损失。     

人体外肠结肠炎耶尔辛氏菌的分离鉴定

从553份冷饮、牛乳、污水、苍蝇等材料中分离出7株肠结肠炎耶尔辛氏菌(Yersinia enterocolitica).检测了它们的生长性能和生理生化特性.并通过玻板凝集反应确定了它们的血清型.7个菌株中,一株来自冷饮食品,含有O_8抗原;三株来自蝇体,含有O_(52)抗原成分;一株来自污水.含有O_(10)抗原;两株来自牛的粪便,分别含有O_4和O_(10)抗原成分.没有从牛乳中检出肠结肠炎耶尔辛氏菌.     

功能菌株对柠檬酸废水生化处理剩余污泥减量化研究

采用具有污泥减量化功能的菌株,对柠檬酸发酵废水生化处理二沉池剩余污泥进行摇瓶减量实验。通过对初筛菌株进行定向驯化,再通过正交试验与单因素实验,确定菌株污泥处理优化培养条件后进行优选菌株污泥最终处理。研究结果表明:经过4个周期的驯化,菌株W1-6、W1-10好氧处理后污泥MLSS减量与同期对照相比分别从17.62%提高到24.61%和从16.60%提高到23.17%。在优化培养条件下,污泥MLSS与MLVSS分别减量27%和40%以上,污泥清液中SCOD值从521.7mg/L提高到1700mg/L左右,原污泥91%的SV₃₀可降低到54%~57%。污泥减量效果明显,同时污泥脱水性能也得到明显改善。