具有ACC脱氨酶活性及抗枯萎病菌 的 假 单 胞 菌 株 B8

运用新的快速筛选程序,获得了具有1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1 carboxylate,ACC)脱氨酶活性和拮抗瓜类枯萎病菌双重功能的根际假单胞菌株B     

筛选假单胞菌株M18防治大棚黄瓜枯萎病害

设计了一种新的高效筛选程序,从植物根际土壤中分离出一株具有ＡＣＣ脱氨酶活性的促生拮抗双功能假单胞菌株Ｍ１８．在培养皿中,Ｍ１８能有效地抑制黄瓜枯萎病菌以及多种其他枯萎病原菌和植物病原菌的生长．Ｍ１８活菌浸种处理春黄瓜种子以及在大棚定植后根际土壤浇灌的试验中,与对照组相比,黄瓜枯萎病的株发病率降低７０％～８０％,霜霉病的发病率和病情指数都同时平均下降７０％左右,黄瓜产量提高２０％以上,每公顷可增加产值０．９万元以上,Ｍ１８的生物防治效果达到极显著程度．     

假单胞菌株M18分泌羧基吩嗪抑制黄瓜枯萎病害

设计并应用新的高效筛选程序,从植物根际土壤分离出同时具有促进植物生长和抑制黄瓜枯萎病害的假单胞菌株Ｍ１８。它对黄瓜幼苗的根系具有明显的促进作用,在培养皿中,Ｍ１８能有效地抑制黄瓜枯萎病菌以及多种其它植物病原菌丝体的生长,经Ｍ１８活菌浸种处理秦黄瓜种子并在大棚内浇灌定植后的粮际土壤,与对照相比,黄瓜枯萎病的株发病率降低７０％－８０％,霜霉病的发病率和病情指数都同时平均下降,７０％左右,黄瓜产量提高％以上,Ｍ１８的生物防治效果达到极显著程度,对培养液中纯化的抗真菌物质进行光谱分析和ＬＣ－ＭＣ测定的结果表明,Ｍ１８是一株产羧基吩嗪的假单胞菌。     

一株拮抗稻瘟病菌的产荧光假单胞杆菌

从稻草茬中分离到的拮抗细菌中,筛选出高效菌株ＪＫＤ－２．无论在稻瘟菌孢子培养基或扩大培养基中,它都具有溶解菌丝体和抑制孢子形成的能力．在土豆培养基中,对多种植物病原菌具有拮抗作用．经电镜观察,培养物性状和生理生化鉴定,可确定该菌为具有荧光的假单胞杆菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｐ．）的一个成员．该菌体培养液经氯仿、乙酸乙酯、８０％丙酮水和水分别提取,除８０％的丙酮水外,都能从细菌菌体或培养基中获得对稻瘟菌的拮抗物质．在盆栽试验中,水稻秧苗叶面喷洒ＪＫＤ－２,能抑制稻瘟菌的接种感染,与对照组相比,防治效果可达６０％,差异达到显著程度．该菌经稻草培养基诱导,能分泌一种胞外蛋白,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,相对分子质量约为１３ｋｄ．     

三株染料脱色优势菌的分离与鉴定

从温州印染厂废水池污泥中分离出三株染料脱色优势菌,其中Ａ１对活性桃红ＫＤ－８Ｂ脱色率为８７．５％,Ａ２对活性桃红ＫＤ－８Ｂ脱色率为９０．２％,Ａ３对弱酸猩红ＦＧ的脱色率为８６．４％,并根据各菌株的个体、群体形态和生理化实验对细菌进行鉴定,三株细菌分别定名为：Ａ１为睾丸酮假单胞菌,Ａ２为嗜麦芽黄单胞菌,Ａ３为恶臭假单胞菌。     

植物促生菌对燕麦初生苗盐分胁迫下的促生效应

为提高日益盐渍化耕地的作物抗盐性,从盐生植物根际土中分离得到4株含ACC脱氨酶的植物促生菌(PGPR),并在限菌条件下考察其对燕麦初生苗盐分胁迫下的促生效应.结果表明,随盐分的升高,促生作用增大.在10 g/L NaCl盐分胁迫下,4菌株对燕麦初生苗均表现出显著的促生效应,但以假单胞菌属S1最显著,其根长、根鲜重和根干重比未接菌对照分别增加137.2%、138.1%和96.2%.4株PGPR的ACC脱氨酶活性与植物生长参数(根长、根鲜重、根干重和下胚轴长)之间具有极显著的正相关性(相关系数>0.93).接种含ACC脱氨酶活性的PGPR可以作为一种环境友好、经济实用的盐渍化土壤改良措施.     

西双版纳橡胶,咖啡和胡椒根际放线菌的抗菌作用研究

对分别分离自橡胶、咖啡和胡椒根际的７５－９５株（８－１１属）放线菌所作的拮抗测定表明，有拮抗作用的菌占４４～４６％，作为优势菌群一链霉菌有一半以上有抑菌作用。特别从三作物根际分离到对使柑桔、胡椒、辣椒三种作物致病疫霉菌（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ），咖啡炭疽（Ｃｏｌｌｅｔａｔｒｉｃｈｕｍｌｏｆｔｅａｎｕｍ）和橡胶褐根病菌（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓｎｏｘｉｕｓ）分别有明显抑制作用的６株资源放线菌，有待开发研究。     

一种具高活性的酪氨酸酶基因启动子片段的分离

利用大肠杆菌启动子探测质粒ｐＫＫ２３２－８为载体,经ＨｉｎｄⅢ－ＢⅠ完全消化后与ＨｉｎｄⅢ－ＢａｍＨⅠ部分消化的嗜麦芽假单胞菌染色体ＤＮＡ进行体外连接,转化Ｅ．ｃｏｌｉＨＢ１０１感受 含氨苄青霉素和氯霉素的选择平板上筛选转化子。     

荧光假单胞菌与植物病害生物防治

荧光假单胞菌对多种植物病害具有防治作用,它首先在植物根际定殖,然后靠噬铁素对铁离子(Fe~(3+))的竞争和抗生素的拮抗作用抑制病原菌的生长发育,保护植物体免受病菌危害。荧光菌在根际的定殖能力与它同根系分泌物的凝集能力有关,与它在根表的短期不可逆吸附也有一定关系。荧光菌菌剂研究较多,目前最好的可贮存一年。虽然荧光菌已成功地用于一些病害的生物防治,但仍有许多问题有待解决。     

捕食线虫真菌自发产生捕食器官的菌株筛选

在Ｃｚａｐｅｋ,ＰＤＡ,ＣＭＡ,ＷＡ四种培养基上,从２１株捕食线虫真菌中筛选到７株在无线虫诱导条件下能自发形成捕食器官的真菌,这些菌株是：Ｊ８－１（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓ ｌｌｉｇｏｓｐｏｒａ ｖａｒ．ｏｌｉｇｏｓｐｏｒａ）,ＭＷ１７－２（Ａ．ｊａｖａｎｉｃａ）,Ｊ３１－１（Ａ．ｖｅｒｍｉｃｏｌａ）,Ｊ３４－１（Ｄａｃｔｙｌｅｌｌａ ｌｅｐｔｏｓｐｏｒａ）,ＸＺ９－２,ＸＳ２－２,Ｏ１－１（Ａ．     

香蕉内生真菌、放线菌类群分析

采用内生菌分离法对华南种植的健康香蕉根、叶内生真菌、内生放线菌进行分离研究表明：叶内部的内生真菌主要为盘长孢刺盘孢菌物Colletotrichum gloeosporioides占60.77％；而根内部曲霉Aspergillus spp. ，青霉Penicillium spp.，拟青霉Pacecilomyces spp.的分离频率较高，共占70．4％。在根、叶内生放线菌中灰红紫类群链霉菌分离频率最高，分别占65.2％与78．2％；在整个植株中玫瑰浅灰链霉菌Streptomyces roseogriseolus的分离频率最高(占57．7％)，叶中该种链霉菌占69.0％，根中占43．5％。对峙实验表明：内生真菌在体外对香蕉枯萎病的病原菌(尖孢镰刀菌香蕉专化型)不显示明显的拮抗作用而内生放线菌则显示明显的拮抗活性，玫瑰浅灰链霉菌中有42．5％的菌株显示拮抗作用，该种链霉菌在提高香蕉植株对香蕉枯萎病的抗性中的作用值得重视。     

香石竹扦插苗茎腐真菌病研究

从香石竹扦插茎腐苗上分离纯化了35株镰刀菌，优势菌为：串珠镰孢（F．moniliform Sheldon）11株，串珠镰孢中间变种（F．moniliforme var．intermedium Neish＆leggestt）9株，尖孢镰孢（Fusarium oxysporum Schlecht）8株，其次还有茄病镰孢蓝色变种（Fusarium solanivat．coeculeum（Sacc．）Booth）等7株，共6个种和变种；选用12株菌检测其致病性，其中11株菌的致病率高达88～100％；农药药效实验表明。大生的效果最好，0．1g／L即能完全抑制5株试验菌的生长；其次为甲霜灵-锰锌；根病必治的效果最差。     

Antifungal activity of magnetically separable Fe3O4/ZnO/AgBr nanocomposites prepared by a facile microwave-assisted method

In the present work, magnetically separable Fe-₃O₄/ZnO/AgBr nanocomposites with different weight ratios of Fe₃O₄ to ZnO/AgBr were prepared by a facile microwave-assisted method. The resultant samples were characterized by X-ray diffraction（XRD）, scanning electron microscopy（SEM）, transmission electron microscopy（TEM）, energy dispersive analysis of X-rays（EDX）, and vibrating sample magnetometery（VSM）. Antifungal activity of the as-prepared samples was evaluated against Fusarium graminearum and Fusarium oxysporum as two phytopathogenic fungi. Among the nanocomposites, the sample with 1:8 weight ratio of Fe₃O₄ to ZnO/AgBr was selected as the best nanocomposite. This nanocomposite inactivates Fusarium graminearum and Fusarium oxysporum at 120 and 60 min, respectively. Moreover, it was observed that the microwave irradiation time has considerable influence on the antifungal activity and the sample prepared by irradiation for 10 min showed the best activity. Moreover, the nanocomposite without any thermal treatment displayed the superior activity.     

尖孢镰刀菌对人参皂苷的动态响应机制

研究尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）与人参根部中皂苷质量比的关系, 为确定人参根部接种尖孢镰刀菌对人参皂苷质量比的影响, 利用高效液相色谱（HPLC）法监测3种人参皂苷Rb1,Re,Rg1的质量比在接种尖孢镰刀菌120 h内的变化. 结果表明： 尖孢镰刀菌侵染后, 人参皂苷Rb1的质量比升高, Re,Rg1的质量比未发生显著改变;人参皂苷Rb1对尖孢镰刀菌分生孢子有明显抑制作用, Rb1的质量浓度越大, 萌发率越低, 抑制率越高, Rg1和Re对尖孢镰刀菌孢子萌发几乎无抑制作用. 因此, Rb1可能是人参根部对抗尖孢镰刀菌产生的抗病化合物.     

10种蔬菜内生细菌的分离筛选

以抑制植物主要病害病原菌和内生防病相关酶活性为评价标准,从蔬菜作物体内分离筛选植物内生细菌资源。从苦瓜、丝瓜、空心菜、大豆等10种蔬菜体内分离到101株细菌,发现内生细菌在不同种类的蔬菜中出现的频率不同,其中丝瓜叶上的内生细菌数量最多,洋葱体内分离到的内生细菌数量最少。运用平板对峙法从中筛选出了对黄瓜枯萎病菌、番茄青枯病菌、水稻细条病菌、荔枝霜疫霉病菌等有较强拮抗作用的菌株,获得对以上4种病菌均有拮抗作用的内生细菌有41株,占总株数的40．6％。对101株细菌进行纤维素酶、蛋白酶和几丁质酶活性测定表明,同时具有3种酶活性的菌株有32株,占总菌数的31．7％。从中选出13株拮抗效果较好的内生细菌。经初步鉴定均属于芽孢杆菌属（Bacillus sp）。进一步对筛选获得的同时对以上4种病原菌均有拮抗作用,且具有纤维素酶、蛋白酶和几丁质酶活性的13号、14号、59号和82号菌株进行16SrDNA序列分析,表明4个菌株均为枯草芽孢杆菌（B．subtilis）或其近缘种。     

矮坨坨内生真菌Fusarium oxysporum代谢产物及其抗肝癌活性的研究

从矮坨坨根部分离得到的一株内生菌,经形态与分子生物学18S rDNA序列分析鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum).运用中压柱色谱,高效制备液相色谱方法和现代波谱技术1HNMR、13CNMR以及LC-MS从其发酵液的乙酸乙酯部位分离鉴定了9个单体化合物,分别为4-氨基-2-羟基嘧啶(1),4,5-二氢-3H-吡唑-3-羧酸甲酯(2),4-羟基-7-(2-羟基-丁基)-3-甲基-氧杂环庚烷-2-酮(3),2-氨基-3-甲基戊酸(4),2,5-二氨基戊酸(5),2-氨基-3-甲基丁酸(6)4-羟基苯甲酸(7),脱氢镰刀菌酸(8),镰刀菌酸(9),其中化合物8对肝癌HepG2和Hep3B细胞具有较强的细胞毒活性,IC50值分别为23.9和29.1 μg/mL,而对正常肝细胞L-02未显示细胞毒性.     

豇豆枯萎病病原分离鉴定

通过采集武汉市豇豆种植区豇豆枯萎病病株,经常规组织分离法分离纯化获得菌株JKW-1、JKW-2和JKW-3,并对3个菌株进行致病性测定、形态学及分子生物学鉴定.结果表明,3个菌株均为致病的镰刀菌,其中菌株JKW-1和JKW-2菌落色泽为紫红色,JKW-3菌落色泽为白色,均能产生大型分生孢子、小型分生孢子和厚垣孢子,但在菌落形态、产孢量、分生孢子大小等方面存在差异;对这3个菌株的核糖体RNA基因内转录间隔区(rDNA-ITS)进行了PCR扩增和序列测定,并在GenBank中进行Blast搜索和比对分析,根据rDNA-ITS序列分析结果结合豇豆病株症状和病菌的形态学特征,判定引起武汉市豇豆枯萎病的病原菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schl.).     

丝状真菌直接转化纤维素生成酒精的研究

本文对 4株Neurosporacrassa和 4株Fusariumoxysporum菌的纤维素酶生产以及它们直接转化纤维素生成酒精的能力进行了研究 ,筛选出 1株酒精产量较高的菌株 (N .crassaAS 3.16 0 2 ) ,并对该菌株的生长、纤维素酶生产和转化纤维素生成酒精的过程进行了初步的研究 .结果表明 :N .crassaAS 3.16 0 2具有较好的直接转化纤维素生产酒精的能力 ,经过初步优化后 ,酒精产量和转化率分别达到 6 .7g L和 33.5 % .     

不同寄主尖孢镰刀菌同工酶异质性的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了来自不同寄主枯萎病原菌尖孢镰刀菌过氧化物酶同工酶(POD)和酯酶同工酶(EST).结果表明,过氧化物酶同工酶共有3条主酶带,其迁移率分别为:Rf=0.08,Rf=0.20和Rf=0.4.但不同寄主的尖孢镰刀菌POD同工酶存在着明显的差别,来源于花生的尖孢镰刀菌只有2条POD同工酶酶带,其迁移率为:Rf=0.20和Rf=0.08;来源于甜瓜的尖孢镰刀菌只有1条POD同工酶酶带,其迁移率为:Rf=0.20;来源于不同寄主的镰刀菌的EST同工酶谱之间也存在着较大的差别.来源于黄瓜、甜瓜和西瓜的镰刀菌的EST酶谱较为相似,都具有Rf=0.018,Rf=0.114和Rf=1.000的3条酶带,其它寄主来源的镰刀菌的EST酶谱间互相则存在着很大的差别.但这些菌株基本上都存在着Rf为0.018和1.000的2条酯酶同工酶酶带.     

几丁质酶在苏云金芽孢杆菌中的分布及抑小麦赤霉菌菌株的筛选

利用几丁质平板法和几丁质酶基因特异引物PCR两种方法,对本室保藏的995株苏云金芽孢杆菌的几丁质酶及其基因进行了检测.结果显示所有被检测的菌株都可以在几丁质为唯一碳源的平板上生长.其中93.0%的菌株PCR检测阳性,54.1%的菌株可产生明显的水解圈.证明苏云金芽孢杆菌中几丁质酶普遍存在.通过研究发现Bt几丁质酶活力高低与其血清型及杀虫晶体蛋白基因的类型无相关性.同时对286个菌株进行了抑小麦赤霉菌实验,筛选出19株抑真菌效果较好的苏云金芽孢杆菌.