绿豆几丁质酶的纯化和酶学性质分析

利用亲和色谱Affi-gel和离子交换色谱SP-Toyopearl从绿豆种子中分离纯化出几丁质酶.纯化的蛋白通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定达到电泳纯,分子质量为30.8kDa.还原和非还原状态下的几丁质酶蛋白均显示单一区带,说明该几丁质酶为单倍体蛋白.通过等点聚焦法测得pI为6.3.该酶的最适pH为5.4,最适反应温度为40～50℃.     

红豆中几丁质酶的纯化与表征

利用硫酸铵沉降、离子交换色谱CM-Sephadex C-50、凝胶过滤色谱Sephadex G-75以及高效液相色谱(HPLC)Poros HS-20,从红豆种子中分离纯化出一种具有抗真菌活性的几丁质酶.SDS-PAGE显示还原与非还原状态下该蛋白分子质量分别为27.7和22.7 kDa,这表明该几丁质酶分子内含有二硫键.该酶比活为14.57 U/mg,最适反应pH为5.4,最适反应温度为50℃.它对棉花枯萎病菌、甜瓜枯萎病菌与瓜果腐霉病菌等真菌有明显的抑制作用.     

牦牛乳经凝乳酶作用后的蛋白组分变化

为研究牦牛乳经凝乳酶凝乳后的乳蛋白组分变化,在牦牛乳中加入凝乳酶进行凝乳,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和碱性尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对凝乳酪蛋白和乳清蛋白的组成进行了分析.结果显示,牦牛乳凝乳后酪蛋白发生了显著水解,水解产物存在于凝乳酪蛋白中,同时乳清中新增加了一些低分子量的可溶性蛋白.这些变化可能涉及部分α-酪蛋白的水解.     

中华锯齿米虾卵黄蛋白的纯化鉴定

为了研究中华锯齿米虾卵黄蛋白的性质,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳,采用不同的染色方法对其进行分析鉴定,并采用电泳洗脱法从中华锯齿米虾成熟卵巢中将其分离纯化.研究结果表明,中华锯齿米虾成熟卵巢中的卵黄蛋白为糖脂复合蛋白,该蛋白分子质量为434 ku.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析该卵黄蛋白由3个主要亚基组成,分子质量分...     

果胶酶的分离提纯及某些性质研究

本文报导了一种制备高纯度果胶酶的方法,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得其分子量为32000,用等电聚焦电泳法测得其等电点为pH8.0～8.2,用圆二色谱测得此酶呈无规则卷曲构象。     

棉花枯萎病菌生理小种可溶性蛋白质谱的分析

采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对2002～2003年间从新疆各主要植棉区采集到的31个棉花枯萎病菌菌株及3号、7号和8号生理小种的标准菌株进行了可溶性蛋白质谱分析.结果表明,其不同生理小种的可溶性蛋白质谱存在明显差异,同一小种不同菌株的谱带一致性较高.由此说明可溶性蛋白凝胶电泳对棉花枯萎病菌生理小种的鉴定有重要参考价值.     

人参多肽的分离纯化

运用生物化学的技术和方法,以人参为原料,经乙醇提取后,采用大孔吸附树脂、离子交换、凝胶过滤等层析技术,分离纯化出一种人参多肽,经过HPLC鉴定其纯度为95%以上,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其分子量为3.5 KD到10 KD之间.     

硫酸铵盐析法分级分离大豆酸沉蛋白

利用硫酸铵盐析法分级分离大豆中的酸沉蛋白,并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行分析,初步确定可达到分级分离效果时的硫酸铵溶液饱和度.     

苦瓜籽中抗真菌蛋白MAP13的分离纯化与表征

将苦瓜籽粗提液分别经阴离子色谱柱、阳离子色谱柱交换后,得到一个具有抗真菌活性的蛋白MAP13.该蛋白经鉴定达到电泳纯,相对分子量为12.7 kDa.经还原剂处理后,电泳结果表明该蛋白由分子量分别为7和6 kDa的两个亚基组成,亚基之间通过二硫键连接.体外抑菌实验表明该蛋白对苹果轮纹病菌、瓜果腐霉病菌和棉花枯萎病菌具有较强的抑制作用.     

菠萝焦磷酸:果糖-6-磷酸1-磷酸转移酶的分离纯化及性质研究

应用硫酸铵分级分离、DEAE-纤维素、Sephadex G-200、磷酸纤维素柱层析分离纯化了菠萝叶片焦磷酸:果糖-6-磷酸1-磷酸转移酶(PFP).凝胶过滤和非变性聚丙烯酰胺梯度电泳测定酶的分子量为132kD和140kD,SDS-聚丙烯酰胺电泳分析得到一条分子量为66kD的蛋白主带,表明该酶可能是由同种亚基组成的二聚体.此外,还对该酶的部分酶学性质进行了初步研究.     

Purification and characterization of a novel antifungal protein from Bacillus subtilis strain B29

An antifungal protein was isolated from a culture of Bacillus subtilis strain B29. The isolation procedure comprised ion exchange chromatography on diethylaminoethyl (DEAE)-52 cellulose and gel filtration chromatography on Bio-Gel® P-100. The protein was absorbed on DEAE-cellulose and Bio-Gel® P-100. The purified antifungal fraction was designated as B29I, with a molecular mass of 42.3 kDa by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), pI value 5.69 by isoelectric focusing (IEF)-PAGE, and 97.81% purity by high performance liquid chromatography (HPLC). B29I exhibited inhibitory activity on mycelial growth in Fusarium oxysporum, Rhizoctonia solani, Fusarium moniliforme, and Sclerotinia sclerotiorum. The 50% inhibitory concentrations (IC₅₀) of its antifungal activity toward Fusarium oxysporum and Rhizoctonia solani were 45 and 112 μmol/L, respectively. B29I also demonstrated an inhibitory effect on conidial spore germination of Fusarium oxysporum and suppression of germ-tube elongation, and induced distortion, tumescence, and rupture of a portion of the germinated spores.     

Streptomyces alboflavus抗真菌物质对串珠镰刀菌的抑制机理研究

研究了Streptomyces alboflavus产生的抗真菌物质对串珠镰刀菌的抑菌机理。通过pH纸层析和捷克八溶剂纸层析实验对抗菌物质进行定性分析;利用荧光显微镜和扫描电子显微镜观察抗菌物质对串珠镰刀菌细胞膜和细胞壁的破坏作用;通过细胞膜和细胞壁主要组分对抑菌物质的拮抗效果,探索抑菌物质的作用靶点;用高效液相色谱法检测抑菌物质对串珠镰刀菌细胞膜中麦角甾醇的抑制作用。极性实验显示,该物质呈中性,捷克八溶剂纸层析表明,该物质属于非水溶性Ⅰ型抗生素;光学显微镜观察,抑菌物质对串珠镰刀菌孢子萌发有抑制作用,同时使菌丝畸形,顶端、中部出现膨大泡囊,呈“念珠状”;经PI染色后荧光显微镜观察,抗菌物质作用后的菌丝细胞膜通透性改变,进一步通过扫描电子显微镜观察,发现泡囊状菌丝表面凹凸不平,并残留有碎片;抑菌物质对细胞壁和细胞膜的组分拮抗作用和高效液相色谱方法检测显示,抑菌物质影响细胞膜中麦角甾醇的合成。研究结果表明,Streptomyces alboflavus产生的抗真菌物质发挥抑菌作用时,影响串珠镰刀菌细胞膜中麦角甾醇的合成。本研究可为抑菌物质的鉴定和拮抗菌的应用提供理论参考。     

苦瓜籽中一种抗胰蛋白肽的分离及抗真菌作用观察

利用凝胶过滤层析Sephadex G-75、强阳离子交换色谱SP-650M,从苦瓜籽中分离纯化出一种活性多肽.该多肽在Tricine-SDS-PAGE上显示为单一的谱带,分子量约为6.8 kDa.在经还原剂二硫苏糖醇(DTT)处理后的电泳结果表明该多肽不含有分子间的二硫键.此多肽是一种胰蛋白酶抑制剂,同时具有抗植物致病菌活性,是一种具有双功能作用的多肽.     

Antifungal Activity of a Synthetic Oil Compound against Fusarium oxysporum,the Causal Agent of Tagetes

This paper evaluated the antifungal activity and mechanism of the main active component of the root extract of Tagetes(Tagetes fungicide), and an emulsion was developed to improve water solubility of Tagetes fungicide, thus improving its application. The results of in vitro antifungal effect assay and scanning electron microscopy(SEM) showed that the Tagetes fungicide had a wide spectrum of fungicidal ability and the antifungal mechanism of fungicide might be associated with a change in hyphae morphology. The total protein expression of Fusarium oxysporum f. sp. Niveum changed after being cultured with fungicide, showing the decreased expression of high molecular protein while increasing expression of low molecular protein. When the hydrophilic-lipophilic balance value was 10, the emulsion was stable. The intracellular organelles of plant leaves infected by F. oxysporum f. sp. Niveum showed some changes after cultured with the fungicide emulsion.     

慈菇中抗真菌蛋白分离纯化初步研究

植物在长期进化过程中,形成了一套天然的防御系统。其中植物抗真菌蛋白(antifungal protein,AFP)是主要成员之一,它对多种植物和人体病原真菌生长有抑制作用。本研究以慈菇(Sagittaria sagittifolia)块茎为材料,运用阳离子交换层析和葡聚糖G50凝胶过滤层析技术,结合活性追踪法,对慈菇中的抗真菌蛋白进行了初步分离纯化。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表明,纯化的抗真菌蛋白并不是单一的组分,至少有3个电泳条带,分子量集中在14.4~20.1 kD之间。纯化的抗真菌蛋白对烟草赤星病菌(Alternari alternata)的菌丝生长具有较明显抑制作用。     

凝结芽孢杆菌TQ33产抗疫霉物质特性研究

凝结芽孢杆菌TQ33是从脱脂奶粉中分离出来的,发现其发酵液中活性代谢产物对甜瓜疫霉菌(Phytophthora drechsleri Tucker)、灰葡萄孢霉菌(Botrytis cinerea)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)、甜瓜枯萎病菌(Fusarium ox-ysporum)、苹果炭疽病菌(Glomerella cingulate)植物致病真菌有很好的抑制作用,其中对甜瓜疫霉菌具有较强的抑制作用,同时对抗甜瓜疫霉物质特性进行了研究,将具有抑菌活性的发酵液分别经过调节pH、加热、蛋白酶处理后发现,凝结芽孢杆菌TQ33发酵液具有一定的热稳定性;在pH,5～6时具有最大抑菌活性,发酵液经胰蛋白酶、中性蛋白、蛋白酶K处理后失去部分抑菌活性,初步分离纯化实验表明其中一种抗菌物质可能是苯乳酸,这表明凝结芽孢杆菌TQ33发酵液中可能含有苯乳酸,以及其他蛋白类抑菌物质.     

油菜饼蛋白提取物对饲料中霉菌抑制作用的研究

通过硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶柱层析和HPLC分离等方法,从油菜饼的水溶性成分中分离得到蛋白质(肽)提取物.采用抑菌圈法测定该蛋白(肽)提取物的抑菌活性,结果表明对受试真菌有明显的抑制作用.对该蛋白(肽)提取物的稳定性测定表明,加热到90℃未丧失活性,对酸碱的适应范围也较大,在pH 7～8的时候抑菌效果最为明显,对蛋白酶K和胰蛋白酶敏感.通过与几种防腐剂对饲料中霉菌抑制作用的比较发现,油菜饼蛋白(肽)提取物的防霉性能优于恩拉鼎(Enramycin)预混剂、富马酸,仅次于复合型防霉剂霉必克,可以开发成为一种高效的植物源性饲料防腐剂.     

1.3—二氧戊环—1H—唑类新型杀菌剂的合成和定量构效关系的研究

本文合成了五个新化合物。它的结构类型如下所示:抑茵活性试验表明:其中的几个化合物对水稻纹枯病菌和棉花枯萎病菌有抑制作用。最后用 Hücrel 分子轨道法,分子连接性法和结构信息量法研究这些化合物的化学结构与抑菌活性的关系。     

Antifungal activity of magnetically separable Fe3O4/ZnO/AgBr nanocomposites prepared by a facile microwave-assisted method

In the present work, magnetically separable Fe-₃O₄/ZnO/AgBr nanocomposites with different weight ratios of Fe₃O₄ to ZnO/AgBr were prepared by a facile microwave-assisted method. The resultant samples were characterized by X-ray diffraction（XRD）, scanning electron microscopy（SEM）, transmission electron microscopy（TEM）, energy dispersive analysis of X-rays（EDX）, and vibrating sample magnetometery（VSM）. Antifungal activity of the as-prepared samples was evaluated against Fusarium graminearum and Fusarium oxysporum as two phytopathogenic fungi. Among the nanocomposites, the sample with 1:8 weight ratio of Fe₃O₄ to ZnO/AgBr was selected as the best nanocomposite. This nanocomposite inactivates Fusarium graminearum and Fusarium oxysporum at 120 and 60 min, respectively. Moreover, it was observed that the microwave irradiation time has considerable influence on the antifungal activity and the sample prepared by irradiation for 10 min showed the best activity. Moreover, the nanocomposite without any thermal treatment displayed the superior activity.     

安徽产大戟属(Euphorbia)药用植物抑真菌活性研究

以小麦赤霉病菌(Gibberella zeae)、油菜菌核病菌(Sclerotinia scleotiorum)、棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)、苹果炭疽病菌(Glomerella cingulata)、甜瓜蔓枯病菌(Mycosphaerella melonis)为供试病原菌,采用琼胶平板法对安徽产大戟属6种药用植物丙酮提取物进行了离体抑真菌活性测定;样品提取物供试质量浓度设为0.1g/mL.结果表明:相同浓度的大戟属不同植物样品对5种供试病原菌均有抑制作用,其中大戟根及月腺大戟根提取物样品对供试病原菌有强烈的抑菌活性.该研究为安徽产大戟属药用植物的进一步开发植物性农药提供理论依据.