丰抗8号小麦悬浮细胞系的建立及遗传转化的初步研究

以丰抗８号小麦的幼胚为起始材料,建立了胚性悬浮细胞系．幼胚的取材时期、培养基的成份和选择继代的方法有明显的影响．取开花后１２～１４ｄ的幼胚、增加无机盐离子和还原态氮的用量、挑选鲜黄致密及松脆类型的愈伤组织能显著地抑制空瘪型、长条型、弯弓形等不良细胞类型出现的频率,促进细胞向圆球型方向分裂生长．通过３个月的选择继代培养,获得了理想的松散状胚性愈伤组织;再经过ＭＳ２Ｌ和ＡＡ液体培养,约２个月后,建立起分散性好、颗粒小、增殖快的小麦悬浮细胞系．以新建立的胚性悬浮系为材料,进行基因枪转化,获得了ＧＵＳ报告基因的短暂表达,平均短暂表达频率为１７．１％．就如何筛选转基因小麦进行了讨论．     

用Ti质粒的双元载体法将抗性基因转入西红柿体细胞

采用Ｔｉ质粒的双元载体法对西红柿（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ）的叶片外植体进行遗传转化，经选择培养基的筛选，从抗性愈伤组织细胞中诱导出具有卡那霉素抗性的幼苗．分子杂交证实，卡那霉素抗性基因通过根瘤农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）的介导，整合到细胞核基因组中，转化子具有较高的新霉素磷酸转移酶活性，说明抗性基因在受体细胞得到表达．     

毛花猕猴桃愈伤组织诱导与植株再生

从毛花猕猴桃（ＡｃｔｉｎｉｄｉａｅｒｉａｎｔｈａＢｅｎｔｈ）田间生长的茎段、种子无菌条件下萌发的下胚轴及试管苗的茎段和叶片得到愈伤组织。田间来源的茎段诱导愈伤组织较难，愈伤组织生长缓慢；下胚轴及试管苗茎段和叶片容易产生愈伤组织，愈伤组织生长旺盛。消毒时间、接种方法、基因型和培养基都可能影响到田间来源的茎段愈伤组织产生。在ＭＳ附加玉米素或６－苄氨基嘌呤（ＢＡＰ）的培养基上下胚轴来源的愈伤组织不经转代即分化芽和根。试管苗茎段和叶片在附加玉米素或Ｎ－（２－氯基－４－吡啶基）－Ｎ′－苯基脲（ＣＰＰＵ）的ＭＳ培养基上培养一代也分化出芽、试管苗茎段在附加０．００２５ｍｇ／ＬＣＰＰＵ和０．１ｍｇ／Ｌ吲跺乙酸（ＩＡＡ）的ＭＳ培养基上产生愈伤组织、芽的分化和苗生长都较理想；试管苗叶片则以附加０．０２５ｍｇ／ＬＣＰＰＵ和０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ或０．５ｍｇ／Ｌ玉米素和０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ的ＭＳ培养基较好。当苗伸长至１ｃｍ或以上时切下，转入ＭＳ基本培养基（大量元素减半）上后可形成完整植株。     

Ti质粒对甘薯叶片和愈伤组织的转化

用根癌农杆菌菌株T_(37)和B_6S_3感染甘薯叶片和愈伤组织,在无激素的MS培养基上诱发产生了转化愈伤组织。两菌株对愈伤组织的转化率明显高于对叶片的转化率。电泳结果表明,转化组织中均具有LpDH或NpDH活性,证明Ti质粒上的T-DNA已转移到甘薯细胞的基因组中。同时还进行了转化组织的过氧化物同工酶分析。     

重庆市主栽优良甘薯品种的茎尖培养脱毒研究

选用重庆市大面积推广的优良甘薯品种进行茎尖脱毒离体培养试验，结果表明：对来源于薯块萌发芽的茎尖进行组织培养，其成苗率最高，达53.2％；连续两次进行茎尖培养可明显增强脱毒效果；对于甘薯病毒病的检测，反转录PCR法（RT-PCR）比硝化纤维素膜酶联免疫吸附检测法（NCM-ELISA）更灵敏和可靠。     

发根农杆菌A4转化黄瓜获得发状根再生植株

研究以黄瓜栽培品种津研四号为试材,比较了培养基中添激素对自然生根及发状根诱导的影响。无菌苗子叶及下胚轴经发根农杆菌Ａ４侵染后２周诱导出发状根,发状根在无激素的ＭＳ筛选培养基上能够自主生长,在附加ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ,ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ的筛选分化培养基上分化出不定芽,ＧＵＳ染色表明转化植株呈阳性反应。     

四棱豆茎段离体培养的研究

通过茎段离体培养，实现了四棱豆的快速无性繁殖．结果表明：（１）用浓Ｈ２ＳＯ４将其种子处理８ｍｉｎ后再消毒接种可获得最高的发芽率；（２）在附加１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的Ｈ培养基上，每粒种子平均可形成１３个丛芽；（３）在增殖培养阶段，ＩＢＡ浓度为１．０～２．０ｍｇ／Ｌ时对促进四棱豆离体茎段生根成苗的效果最为理想；（４）增殖培养阶段以采用Ｈ培养基的效果最为理想；（５）单独使用ＩＢＡ时，即使其浓度高达４．０ｍｇ／Ｌ也只诱导离体茎段生根，绝大多数外植体不会产生愈伤组织，只有极少数外植体产生少量愈伤组织；低浓度的６－ＢＡ（０．５ｍｇ／Ｌ）或高浓度的６－ＢＡ（２．０ｍｇ／Ｌ）配以低浓度的ＩＢＡ（０．２５ｍｇ／Ｌ）反而会引起大多数离体茎段的基部产生大量愈伤组织．     

麻疯树外植体愈伤组织中毒蛋白的Western-blot鉴定

麻疯树外植体愈伤组织中毒蛋白的Western blot鉴定戎　芳1,2,王胜华1,赵小光1,郭　亮1,魏　琴1,唐　琳1,徐　莺1,陈　放1, (1.四川大学生命科学学院,成都610064;2.安徽大学生命科学学院,合肥230039)麻疯树(JatrophacurcasL.)系大戟科麻疯树属植物,耐干旱贫瘠,抗病虫能力强[1,2],主要生长在热带和亚热带地区,在我国西南地区有丰富的资源.麻疯树种子对整体动物,如小白鼠[3]、羊[4]及人,特别是幼儿[5]表现出一定的毒性,且具有致死作用.麻疯树种子含毒成分主要是种子毒蛋白(curcin),该蛋白是一种单链核糖体失活蛋白,具抗癌活性[6],是一种具开…     

绿色荧光蛋白基因mgfp4在水稻愈伤组织中的瞬时表达

采用基因枪方法将适用于高等植物的绿色荧光蛋白基因ｍｇｆｐ４转化到水稻愈伤组织之中,获得高效瞬时表达,在荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察到强烈绿色荧光。绿色荧光蛋白ｍＧＦＰ４生色团形成迅速,转化４ｈ后就能观察到绿色荧光,并且持续时间较长,２ｄ后才基本消退。     

丹参嫩茎组织培养及无性系建立的研究

为保护濒危植物丹参,实现人工栽培,以嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导与分化、试管苗生根、继代、移栽和定植研究.结果证明:MS+6-BA0.3 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1+NAA0.8 mg.L-1是丹参嫩茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基;1/2MS+AgNO30.2 mg.L-1和1/2MS+AgNO30.2 mg.L-1+6-BA 0.1 mg.L-12种培养基是丹参颗粒状愈伤组织块分化培养的理想培养基;以经过浓度为10mg.L-1的NAA溶液处理3 m in的不定芽为材料、以1/3MS+IAA0.4 mg.L-1为培养基的方法是丹参不定芽生根培养的理想方法.试管苗移栽成活率为92.7%,定植成活率为99.2%.定植的试管苗保持了野生丹参的所有生物性,建立起丹参的无性系.