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1.
重组融合蛋白GST—SLT—ⅡeB表达条件的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
通过在不同温度,不同诱导时间,不同异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导浓度条件下,对重组大肠杆菌PPSLT-ⅡeB表达的谷胱甘肽-S-转移酶与类志贺氏菌毒素Ⅱ型变异体B亚单位的融合蛋白(GST-SLT-ⅡeB)的条件,结果表明:在所试条件中,温度是影响表达的主要因素,重组大肠杆菌在28℃温度条件下,可以明显表达融合蛋白GST-SLT-ⅡeB,在IPTG为1mmol.L^-1浓度条件下,2h的诱导即可获 相似文献
2.
将插入pBluescribe的人红细胞生成素受体cDNA,用EcoRI和BamHI酶解,分离得到的基因片段,插入到经EcoRI和RamHI消解的表达载体pGEX-3X中,得到重组表达质粒pGEX-3X/hEPOR。重组质粒pGEX-3X/hEPOR含有tac启动子,EPOR膜外结构域基因5端与谷胱甘肽转移酶(GST)编码基因融合,阳性重组子在大肠杆菌中经IPTG诱导表达GST-hEPOR,重组表达菌裂解上清液经GSH-Sepharose4B亲和柱一步纯化,能除去绝大部分杂蛋白,基本达到纯化的效果。SDS-PAGE和免疫杂交分析显示,重组表达产物确系人红细胞生成素受体 相似文献
3.
利用PCR方法,将羊生长激素(oGH)成熟蛋白编码序列扩增,再将扩增产物接入分泌型表达载体pET12a(SalI位点)中,利用宿主菌自身的OmpT信号肽引导羊生长激素在E.coli BL21(DE3)中分泌,获得正向插入重组质粒pET12-oGH8,对重组子及对照菌进行诱导表达,薄层色谱扫描(SDS-PAGE)检测结果发现,oGH在OmpT信号肽引导下未见明显分泌,推测oGH自身的氨基酸序列可有是 相似文献
4.
应用重组Etp28抗原免疫预防球虫病的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
将构建好的可表达GST融合蛋白的重组病毒AcMNPV-OCC-Etp28感染Sf9细胞,72h后取感染了病毒的细胞裂解物上清液进行SDS-PAGE和Westem-blot分析,结果显示53kDa的融合蛋白在昆虫Sf9细胞中得到了高效表达,表达水平为占细胞总蛋白的21.3%;将GST-6xHis-Etp28注射维菌鸡进行免疫保护试验,结果表明免疫组比对照组在平均增重和盲肠粘膜层卵囊计数方面有一定程度 相似文献
5.
将乙肝病毒表面抗原S-preS1融合基因SA-28插入质粒载体pAO815的EcoR I位点中,将其置于Pichia Pastoris 酵母AOX1启动子控制下,利用电转化技术,融合基因表达单元链同HIS4基因被整合到受体菌SMD1168基因组中。对得到的工程菌进行发酵和表达产物的研究表明:SA-28基因在该系统中的表达受甲醇诱导调控;SA-28融合基因的表达产物具有S和PreS1的双重抗原性。用 相似文献
6.
在scu-PA32K的cDNA分子基础上经定点突变,在N端紧接Leu^1以前引入编码GHRP四肽的寡核苷酸序列(GGTCATAGGCCT),构建了GHRP-scu-PA-32K的突变体cDNA。将它克隆到表达载体pCM-β-dhfr共转染CHO/DHFR^-细胞。筛选到的稳定表达株在无 清培养基的表达量为580IR/(10^6细胞.24h)。经锌离子螯合亲和柱纯化的产物,SDS-PAGE显示为一蛋 相似文献
7.
本文制备了SO4^2-/TiO2/La^3+型固体超强酸。催化剂试验表明:La与Ti原子比,焙烧温度和时间对催化活性都有显著影响。制得的超强酸强度Ho〈-13.75,通过乙酸和丁醇的酯化试验证明:SO4^2-/TiO2/La^3+固体超强酸具有较高的活性和稳定性,选择性好,易于产物分离,与液体酸相比具有不腐蚀设备等优点,适用于乙酸和丁醇催化的酯化反应。 相似文献
8.
固体超强酸ZrO2—SO^2—4催化合成松香甘油酯 总被引:6,自引:0,他引:6
研究了固体超强酸ZrO2-SO^2-4催化松香和城油的酯化反应,探讨了催化反应的条件。实验结果表明,ZrO2-SO^2-4对该反应的催化活性较高,可改善产物性能,且易与产物分离,又不产生三废污染。 相似文献
9.
采用鸟枪法将枯草芽孢杆菌磺胺胍抗性基因克隆到质粒pUB110中建成重组质粒,pBUW4,该质粒的分子量约8.1kb,标记为SG^r为Km^r,将pUBW4转化到肌苷产生菌枯草芽孢杆菌Q2901-4菌株中,得到的转化子产肌苷能力比受体菌提高25.5%。 相似文献
10.
利用苜蓿尺核型多角 体病带β-Galactosidase基因标志的非融合蛋白基因转移载体pBB成功地构了重组杆状病毒AcNPV-G-CSF.在感染重组病毒的草地夜蛾细胞中hG-CSF得到了高效表达。表达产物由WesternBlot检出,其分子量约为19KDa。 相似文献