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| 人红细胞生成素受体膜外结构域在大肠杆菌中的融合表达及其纯化 | |
| 引用本文： | 华子春,孙爱龙,王少雄.人红细胞生成素受体膜外结构域在大肠杆菌中的融合表达及其纯化[J].南京大学学报(自然科学版),1998(2). |
| 作者姓名： | 华子春 孙爱龙 王少雄 |
| 作者单位： | 南京大学生物化学系，南京大学强化部 |
| 摘 要： | 将插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｂｅ的人红细胞生成素受体ｃＤＮＡ，用ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ酶解，分离得到的基因片段，插入到经ＥｃｏＲＩ和ＲａｍＨＩ消解的表达载体ｐＧＥＸ－３Ｘ中，得到重组表达质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ／ｈＥＰＯＲ。重组质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ／ｈＥＰＯＲ含有ｔａｃ启动子，ＥＰＯＲ膜外结构域基因５端与谷胱甘肽转移酶（ＧＳＴ）编码基因融合，阳性重组子在大肠杆菌中经ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ｈＥＰＯＲ，重组表达菌裂解上清液经ＧＳＨ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱一步纯化，能除去绝大部分杂蛋白，基本达到纯化的效果。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫杂交分析显示，重组表达产物确系人红细胞生成素受体 |
| 关 键 词： | 人红细胞生成素受体，融合表达，大肠杆菌，受体 |
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