响应面法优化菌株产淀粉酶培养条件的研究

在单因素试验的基础上,采用响应面分析法对高产淀粉酶菌株的培养条件进行了优化.通过单因素试验,评价了不同温度、pH值、时间、碳源浓度、氮源浓度和摇床转速等6个因素对菌株产淀粉酶含量的影响.对蛋白胨质量分数、玉米粉质量分数、pH值和温度等主要影响因素进行中心组合设计,响应面分析结果为pH值对产酶影响显著,最佳培养条件为pH值为6.5,玉米粉质量分数为0.3%、蛋白胨质量分数为0.5%、培养温度为35℃、培养时间为30 h.     

一株硫氧化菌的筛选与表征

利用液体选择培养基、固体选择培养基从污泥中筛选出一种可以氧化低价硫的菌株,该菌为革兰氏阴性菌,在光学显微镜下有较强的运动能力.对含有该菌的培养基进行pH值检测,在培养的第3天发现pH值有显著下降,继续培养一周左右,pH值下降到0.6;用离子色谱进行检测,培养5天,液体培养基中硫酸根含量从249.2mg.L-1增加到3679.7mg.L-1;将菌液加入FeS培养基中,培养2周后,FeS被氧化,培养基颜色变浅.     

布氏白僵菌液体培养条件的优化研究

本研究从工业生产的角度出发,通过采用单因素筛选方案,对布氏白僵菌(Beauveria brongniartii)菌株CGMCC NO.2382的液体培养条件(培养基中的碳源和氮源成分、pH值、培养时间)进行了优化试验.结果表明,在以黄豆粉或玉米粉为氮源,可溶性淀粉为碳源,在pH值为5.0的条件下培养13d,菌种产生的孢子最多.     

金福菇液体培养条件的优化

采用液体摇瓶培养法,以菌丝体鲜质量为指标从培养温度、起始pH值、摇床转速等方面对金福菇的液体培养条件进行了优化.结果表明,金福菇液体培养适宜的条件为pH值6.0～7.0、培养温度30～32℃、摇床转速160～180 r/min以及250mL三角瓶中装液量100mL.     

石油降解微生物培养试验

从培养液初始pH值、培养温度、摇床转速、培养时间、初始接种量、不同的培养基等6个方面对四株石油降解微生物的发酵培养条件进行了试验研究.研究探明它们的各自适宜实验室培养条件及这些微生物的普适培养条件.结果表明:该四种石油降解微生物有各自的培养适宜条件,它们的适宜条件有一定的差异性和共性.对于初始pH值、培养温度、摇床转速、培养时间、初始接种量、不同的培养基的敏感性不一,但普遍适宜于温度范围为30℃～35℃、pH值范围为6.5～8.0、转速为150 rad/min、接种量范围为0.4～1 ml、培养时间范围为18～24 h.这些研究成果有利于对石油降解微生物的进一步筛选和培养,也为进一步研究石油污染的微生物降解提供理论指导.     

绕线虫培养条件的优化

对分离自饮用水的绕线虫（Plectus sp.）进行培养条件优化的研究.结果表明,温度和pH值对绕线虫的生长影响显著,光照对绕线虫的生长影响较小.采用生菜蛋黄(lettuce eggs,LE)培养基培养绕线虫时,最佳培养条件如下：温度25 ℃,pH=6和无光照.     

产苯丙氨酸解氨酶重组大肠杆菌的培养

L-苯丙氨酸是人体8种必需氨基酸之一。酶法转化是目前生产L-苯丙氨酸的主要方法。为了提高苯丙氨酸解氨酶的产量,对可高效表达苯丙氨酸解氨酶基因的重组大肠杆菌JM105进行培养,对发酵过程中pH值对工程菌生长的影响进行了研究。结果表明,摇瓶培养条件下,控制发酵过程中发酵液的pH值可显著提高菌体产量,当控制pH值为7.0左右时,菌体量比对照高87%。在初始pH值为7.5的情况下,培养10h后将培养液pH值分别调整为5.5、6.0、6.5、7.0、7.5和8.0,则以pH值为7.5时的菌体量最高。10L发酵罐中控制发酵液pH值为7.5,菌体密度可达A600=20mol/L（DCW=11g/L）,比不控制pH值高出33%。试验结果为进一步开展该工程菌的高密度培养提供了一定的参考。     

树头发菌丝体最适培养基的正交试验研究

采用四因素三水平的正交试验设计培养树头发菌丝体,对菌丝体直径进行测量及分析,探讨树头发菌丝体适宜的培养条件.结果表明：树头发菌丝体培养的各因素影响程度为培养基的pH值〉蛋白胨〉磷酸二氢钾〉葡萄糖,最适培养条件为：葡萄糖15g/L,蛋白胨5.0 g/L,KH2PO4 0.25g/L,pH值5.8.     

耐酸性硫酸盐还原菌的驯化及处理硫酸盐的研究

采用Starkey培养基对硫酸盐还原菌进行培养,观察不同pH值下其生长特性,pH 5.0～10.0范围内菌种均可以生长,最适pH值为7.0.选择pH值为7.0扩培的菌株S7进行耐酸驯化,对驯化后的菌株进行多次传代,SO24-去除率稳步提高,能够稳定传代.驯化前后菌株通过革兰氏染色和电子显微镜观察,初步表明革兰氏染色特性和形态无显著性的变化,驯化后菌株比驯化前菌株表面更光滑.经驯化传代后的SRB可以在pH值4.0条件下生长,生长情况良好,SO24-去除率由驯化前的1%提高到驯化初期的15%、传代后进一步达32%,从而扩大硫酸盐还原菌的适应范围.     

不同初始pH值酸性土壤净矿化、净硝化和酸度变化分析

采集了4个不同初始pH值酸性土壤,在60%土壤持水量和25 ℃条件下对土壤矿化、净硝化和酸度变化进行了研究.结果表明,Ⅰ号土壤(pH=4.03,茶园土)矿化作用不明显,Ⅱ号(pH=4.81,玉米地)、Ⅳ号(pH=6.02,菜地)土壤矿化模式为Logistic 方程,Ⅲ号土壤(pH=5.41,菜地)为指数方程.不加NH+4条件下Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号土壤净硝化模式为一级反应方程,加NH+4后净硝化速率增加一个数量级.培养结束后不加NH+4条件下Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号土壤pH值没有变化,加NH+4处理后pH值显著降低,同时交换性Al3+显著增加.加NH+4促进酸性土壤(pH=4.81~6.02)硝化和酸化,但pH值过低的土壤(pH=4.03)NO-3-N、pH值和交换性Al3+无显著变化.     

日本对虾肝胰腺的细胞培养

实验采用199培养基,并在其基础上添加胎牛血清和葡萄糖,渗透压用NaCl,CaCl2,MgCl2,NaHCO3等调节.分别在3种pH值、3种渗透压及3种Zn2+浓度下原代培养日本对虾肝胰腺细胞,并以RNA/DNA值为指标来评定其生长状况.实验结果表明,培养日本对虾肝胰腺细胞的适宜pH值为7.6、渗透压为730 μmol/g,培养基中添加Zn2+浓度为80μg/L时,细胞生长较好.     

人工感染呼肠孤病毒对拟穴青蟹部分免疫因子的影响

采用注射和浸泡的方式人工感染拟穴青蟹呼肠孤病毒,研究了其对拟穴青蟹血细胞密度以及血清中酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(AKP)活力的影响.结果表明:注射(第Ⅱ组)和浸泡(第Ⅳ组)方式均能感染健康青蟹,病发死亡时间为7～9 d,死亡率达100%,血细胞平均密度在试验36～72 h间迅速上升并达最高值,其血细胞密度最高值分别为1.4008×107cells/mL与1.8243×107cells/mL;感染病毒的青蟹PO活性均大致呈现下降的趋势,其中,第Ⅳ组感染12 h青蟹PO活性相对对照组显著升高(P<0.05),其值为(6.90±1.54),达实验所测PO活性最高值;各实验组血清SOD活性呈无规律的变化;AKP活性感染组与对照组表现不同.表明测定血细胞密度以及PO和AKP活性可用来辅助诊断青蟹疾病,而SOD活性变化不能很好地表征青蟹受病毒感染的状况.     

杀虾微杆菌血清同源性及血清学检验

以分离于日本对虾（Penaeus japonicus）虾苗的杀虾微杆菌（Microbacterium shrimpcida sp．nov．）代表菌株（HID10406-1）,分别制备全菌（OK）及热处理（121℃作用1h）的菌体（O）免疫原,强化免疫家兔制备相应抗血清,对供试6株杀虾微杆菌纯培养物进行了血清型检定。结果表明,均存在同种的O抗原（血清同源）,不存在不耐热表面（K）抗原。以相应OK抗血清为第一抗体,以标准的羊抗兔IgG荧光抗体为第二抗体,对该6株纯培养菌及用代表菌株人工感染病死虾体组织进行间接荧光抗体染色,结果显示了特异的荧光反应;同时,对从人工感染死亡虾分离的10株纯培养菌以凝集反应方法进行了检验,显示出特异凝集现象。     

猪瘟抗体水平的实验室检测技术

利用已知的血凝抗原检测未知的血清抗体，通过将抗原吸附 (致敏 )在红血球表面，再与相应的抗体结合，红血球便出现凝集现象，不仅肉眼可见，直观性强，而且反应的敏感性也大大提高。     

澳洲鳗、日本鳗和欧洲鳗的RAPD初步比较分析

运用RAPD技术,以日本鳗Anguilla japonicus、欧洲鳗Anguilla anguilla和澳洲鳗Anguilla australia尾鳍DNA作为模板,在20种随机引物中筛选出4种随机引物进行扩增反应,得到这3种鳗鱼DNA的RAPD扩增片段,通过比较这3种鳗鱼的扩增条带的特异性、种间相似性指数(日本鳗和欧洲鳗之间的相似指数为0.556 5,日本鳗和澳洲鳗、欧洲鳗和澳洲鳗的相似指数分别为0.510 2和0.5278)和遗传距离,探讨这3种鳗鱼的遗传差异,为鳗鱼的种质鉴定奠定基础。     

危害川麦冬蛴螬的田间鉴别与分布特征

危害川麦冬蛴螬的防治提供依据,对四川绵阳川麦冬的主产区地下害虫蛴螬进行田间调查和鉴定。危害川麦冬的蛴螬优势种是灰胸突鳃金龟Hoplosternus incanus、暗黑鳃金龟Ho-lotrichia paraullela、铜绿丽金龟Anomala corpulenta和苹绿异丽金龟A.sieversi.它们在麦冬田间形成优势种群,灰胸突鳃金龟H.incanus与其他三种在田间形成共优势种群。在温暖季节,幼虫主要在表层0-20 cm分布,在寒冷冬季越冬;幼虫转入地下20-40 cm的区域越冬。在虫卵孵化后,虫口密度达到高峰。该研究为防治麦冬地下害虫蛴螬提供了理论基础,并可促进麦冬栽培的可持续发展。     

多因子对日本囊对虾Marsupenaeus japonicus氮磷代谢的影响

 对日本囊对虾Marsupenaeus japonicus在不同条件下的无机磷、亚硝酸氮、硝酸氮、氨氮的代谢率进行了测定。结果表明：温度、体质量、盐度、pH值和摄食状态对其代谢存在影响。无机磷、硝酸氮、氨氮的代谢率与体质量呈负相关, 而亚硝酸氮的代谢率与体质量随体质量的上升而增大;在20~30 ℃的温度范围内,随着温度的上升,日本囊对虾磷、亚硝酸氮、硝酸氮、氨氮的代谢率均上升;在10‰~31‰的盐度范围内,随着盐度的升高,日本囊对虾（6.739±0.023）g磷、亚硝酸氮的代谢率升高,当盐度为31‰盐度时,磷代谢率达到（0.736±0.002）μg·g^-1·h^-1,亚硝酸氮代谢率为（0.0778±0.011）μg·g^-1·h^-1,而硝酸氮、氨氮的代谢率与盐度呈负相关,当盐度为31‰时,硝酸氮的代谢率降为（0.257±0.207）μg·g^-1·h^-1,氨氮代谢率降为（4.445±0.259）μg·g^-1·h^-1;在7.5～9.0的pH值范围内,随着pH值的升高,日本囊对虾（6.749±0.013）g磷的代谢率明显下降,氨氮、硝酸氮的代谢率提高,亚硝酸氮的代谢率在pH值为8.5时达到最大值,后又呈下降趋势;日本囊对虾（6.729±0.028）g摄食配合饲料,饱食状态下磷、亚硝酸氮、硝酸氮、氨氮的代谢率比饥饿状态下分别提高了272.02%、91.67%、795.38%、98.54%。     

Selection of anticoagulant solution to the hemolymph of Chlamys farreri by transmission electron microscropy and flow cytometry

Mixtures of hemolymph from Chlamys farreri with three different anticoagulant solutions were incu-bated for an hour in vitro, then the ultrastructural alterations of hemocytes were observed, and the aggre-gation rate was analyzed by using transmission electron microscropy and flow cytometry respectively. The results showed that Formula 3 （glucose 20.8 g L^-1; EDTA 20mM; sodium chloride 20 g L^-1; Tris-HCI 0.05M;pH 7.4）was the desirable anticoagulant solution for C. farreri hemocytes. Further phagocytosis assay showed that no obvious negative effect was given to the hemocyte phagocytic activity when using Formula 3 as the anticoagulant solution.     

百脉根Rac1基因启动子的克隆与表达分析

百脉根小G蛋白Rac1基因促进共生结瘤过程,但其转录调控机制尚不明确.采用生物信息学方法对百脉根Rac1基因的启动子序列进行了预测,并对该启动子中含有的顺式调控元件进行了统计分析.克隆了约1.8kb的启动子片段,并构建了GUS融合的重组质粒p1391Z-Rac1Pro.通过百脉根毛根转化法获得转基因毛根,进一步利用组织化学染色法对Rac1基因在阳性毛根中的表达部位进行了研究.结果显示:该启动子除含有常见的转录调控保守元件TATA-box和CAAT-box外,还含有调控防御和胁迫、激素、光照等信号的应答元件.组织化学染色发现,Rac1基因在接种根瘤菌的根毛、根尖、根瘤原基皮层中表达量较高.     

多疣壁虎和纵斑蜥虎骨骼系统的解剖与比较

解剖、观察并比较了多疣壁虎和纵斑蜥虎的骨骼系统。结果表明，它们具有许多共同特征：眼窝不完整，没有上颞窝，牙齿为同型、侧生齿，椎体双凹型，荐椎两枚，雄性具肛后骨。但纵斑蜥虎头颅骨块愈合程度更高，前颌骨鼻突较短，犁骨较薄弱，腭骨、翼骨相对较宽大等特征表现出比多疣壁虎来得进化。