犬冠状病毒病的新临床特征研究

采用犬冠状病毒酶联免疫检测试纸,发现42只感染冠状病毒犬.通过临床诊断,血常规检查和部分康复犬中和抗体测定,结果表明：犬冠状病毒不仅引起胃肠炎,而且还可引起肝炎、神经炎和呼吸道炎症;冠状病毒不仅可单独感染,还可和细小病毒、犬瘟热病毒混合感染;冠状病毒犬排毒时间为2～4周,康复犬可产生中和抗体.     

猫免疫缺陷综合症的实验研究

<正> 作者描述了具有强烈免疫抑制作用的一株猫白血病病毒(FeLV)的鉴定、实验性感染及致病特性。该毒株从一只自然感染猫白血病病毒的猫胸腺淋巴瘤组织中分离得到。作者称之为猫白血病—艾滋病病毒(FeLVFAIDS)。25只SPF猫经鼻腔、腹腔接种这种病毒后,都能产生持续性的病毒血症及致死性和获得性免疫缺陷综合症(AIDS)。由于接种时猫年龄的不同,可发生急性免疫缺陷综合症和慢性免疫缺陷综合症。前者的接种后存活时间在3月以下,多发生于8周龄以下的猫,后者的存活时间在一年以上,多发生于15周龄以上的猫。猫白血病—艾滋病病毒诱发的免疫缺陷综合症有如下特征:接种后有一个无症状的病毒血症时期;体重逐渐下降;当淋巴组织的淋巴小结增生时,病毒     

柯萨奇病毒与病毒性心肌炎临床研究新进展

柯萨奇病毒(CV)是正链RNA病毒,为小RNA病毒科肠道病毒属。柯萨奇病毒感染人体可引起急性或慢性心肌炎,病毒进入咽部大量繁殖后进入血中引起病毒血症,由血流进入心脏毛细血管进入心肌纤维,两侧心室心内膜下部位损伤极为敏感。急性心肌炎常出现于全身感染后数周,其病程可呈急性或慢性倾向,柯萨奇病毒可能从以下几方面引起人体病毒性心肌炎(VMC)。     

铬对SPF级新西兰兔繁殖性能的影响

目的研究铬离子对SPF级新西兰兔繁殖性能的影响。方法 SPF级新西兰兔50只,10雄40雌,随机分为阴性对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、实验Ⅲ组、实验Ⅳ。对照组给予阴性饲料,实验Ⅰ～Ⅳ分别给予含铬为0.1 mg/kg,0.2 mg/kg,0.4 mg/kg,0.8 mg/kg,连续观察4胎内产活仔数、初生窝重、断奶仔数、断奶窝重、断奶成活率、断奶均重和成活率。结果添加铬可以提高新西兰兔的繁殖能力,提高仔兔的成活率。当铬的添加量从0.1 mg/kg、0.2 mg/kg增至0.4 mg/kg时,初生窝重、断奶仔数、断奶窝重和断奶成活率均随着铬的添加量呈线性增高趋势,各项指标有显著性差异（P≤0.05）,从0.4 mg/kg提高到0.8 mg/kg,各项数据均无显著提高。     

应用酶联免疫吸附试验检测山羊日本血吸虫病抗体的研究

本研究首先制备了日本血吸虫水溶性止卵抗原和兔抗山羊酶标复合物。经测试确定了:抗原的最适包被浓度(5ug/ml);酶标复合物的最佳工作浓度(1:2500)以及血清不同稀释度下的阴—阳临界值,从而成功地建立了山羊日本血吸虫病抗体的酶联免疫检测法。以1:80稀释作参考,对25份标准阳性血.清和19份标准阴性血清的考核结果证实:在最适条件下,该法特异性,敏感性良好,具有临床和科研应用价值。随后,应用酶联免疫吸附试验对7只实验山羊血吸虫病抗体消长作了长期、细致地观察,结果表明:特异性IgG最早于尾蚴感染后第40天出现;吡喹酮治疗后,7个月消失。     

裸鼠肝炎病理观察及分析

通过对67只裸鼠(BALB/c nu/nu、nu/+)的病理监测及实验观察,发现在裸鼠饲养群中存在鼠肝炎病毒(Mouse Hepatis Vinrus)的潜在感染。营养不良及某些实验刺激是造成感染的诱因。在感染的早期,出现Kupffer氏细胞增生、肿胀,甚至变性、坏死脱落。当病毒侵入肝细胞,可引起肝细胞坏死。由点状小灶性坏死到大片状坏死。此坏死灶具有一定的特征性,即细胞反应较轻,有融合成片的倾向,边界不够清楚,经酶标抗体染色,在Kupffer氏细胞及少数肝细胞胞浆内出现棕色颗粒,表明有鼠肝炎病毒存在。同时发现,在出现肝炎病变的裸鼠中,有的经酶联吸附试验(ELISA)测定血清抗体呈阴性,而酶标抗体染色却显示阳性反应。由此说明酶标抗体染色,进行抗原定位诊断比血清抗体测定更有诊断意义。     

成果推广

血吸虫病短程抗体检测试剂盒该试剂盒采用单克隆抗体技术 ,制备出抗独特型抗体ＮＰ30 ,可替代虫源抗原检测抗体。用于急性感染病人敏感性可达 95 %以上 ,慢性轻度感染者达 73 % ,特异性 90 % .经卫生部组织的双盲测试结果表明 ,该试剂盒诊断指标已达到经典抗体检测法ＳＥＡ/ＥＬＩＳＡ ,且操作简单、快速 ,适于基层大规模普查和医院临床应用。ＮＰ30检测的抗体是短程抗体 ,治疗一年阴转率达 1 0 0 % ,疗效考核价值与循环抗原检测相同 ,明显高于经典抗体检测法。该试剂盒血微量 ,半小时内即可判读结果。该试剂盒是国内外率先检测短程抗体的诊…     

LPB—ELISA对新生牛血清中口蹄疫抗体的检测

口蹄疫是由于口蹄疫病毒(FMDV)感染引起的一种急性、热性、高度接触性和可快速远距离传播的动物疫病,被国际畜疫局(OIE)列为A类传染病之首.为了掌握新生牛血清中口蹄疫抗体的情况,从而为口蹄疫疫苗企业提供不含该抗体的优质新生牛血清.本试验采用液相阻断酶联免疫(LPB-ELISA)方法对20个批号新生牛血清样品中口蹄疫O型和亚洲I型抗体进行了检测,其中O型病毒抗原对照平均D492nm值50%值(临界值)为0.432;亚洲I型病毒抗原对照平均D492nm值50%(临界值)为0.897;20个新生牛血清样品亚洲I型和O型的D492nm值均大于临界值,表明各样品均显阴性,来自没有感染口蹄疫病毒或没有接种疫苗的动物.     

绵羊嗜皮菌病间接免疫酶标组织化学检测方法的建立

为建立一种用于绵羊刚果嗜皮菌病的免疫酶标组化法,采用兔抗刚果嗜皮菌抗体及羊抗兔HRP抗体,对2只人工感染刚果嗜皮菌的绵羊病变皮肤切片进行了免疫酶标组化检测,并与分离培养、PCR方法进行比较,结果显示2只人工感染绵羊皮肤病料均为阳性,与PCR、分离培养及刚果嗜皮菌阳性对照符合率为100%;而健康绵羊皮肤切片、大肠杆菌、肠球菌阴性对照涂片均为阴性。建立的免疫酶组化方法可用于检测绵羊刚果嗜皮菌,且具有特异性强,操作简便等特点。     

关于615B_6/PBI-beige纯合型裸鼠催产克雷伯氏菌慢性肠炎的研究

在SPF条件饲育的繁育群中,我们发现偶尔有少数6158_6/PBI-beige纯合型裸鼠慢性腹泻。经微生物分离、培养,自4只病鼠粪便中分离出4株占优势的催产克雷伯氏菌。根据Robert koch's原则,用此菌株分别人工感染6158_6/PBI-beige纯合型和杂合型裸鼠、BALB/c-nu纯合型和杂合型等不同免疫缺陷背景的裸鼠,结果仅6158_6/PBI-beige纯合型裸鼠发病,获得疾病模型。并再次自模型鼠粪便中分离到与原始致病菌株特性相同的催产克雷伯氏菌。因此确认催产克雷伯氏菌(Klebsiella oxyfoca)为6158_6/PBI-beige纯合型裸鼠慢性肠炎的条件致病菌。     

兔输血模型的建立

本文对４２只输异体血的兔进行了组织相容性研究，结果表明，可以取任何供血兔的血输给任何受血兔，而不会引起抗宿主反应及溶血反应，在不考虑血型的前提下，本组实验受血者输血已达其身血容量的２０％以上，而没有发生任何溶血性变化。尽管兔存在血型，但抗原性较弱可能是不发生溶血的主要原因。     

我国戊型肝炎全病毒抗原抗HEV·IgM酶联诊断盒的临床应用

我国戊型肝炎全病毒抗原抗ＨＥＶ·ＩｇＭ酶联诊断盒的临床应用廖绵初，干侣仙，黄如统，李晓萸，李德荣（厦门大学抗癌研究中心）（军事医学科学院五所）赵炳华（浙江医科大学第一附属医院）从１９８９年正式确立戊型肝炎ＨｅｐａｔｉｔｉｓＥ以来，许多国家都研制其诊断...     

普通级与SPF级家兔体温变化的比较

目的比较普通家兔与SPF家兔的体温变化范围,筛选合格率及两者之间在体温变化上的异同。方法预检温期间每间隔10 min记录家兔体温,连续监测4 h,除预检温时间间隔外,其他步骤按照2005版中国药典附录ⅫD规定的方法进行。结果通过对196只SPF家兔和166只普通家兔的预检温结果的统计显示,SPF家兔体温变化范围的标准差较普通家兔小0.06,且方差齐性检验验证概率P<0.10;对SPF家兔和普通家兔预检温温差的统计分析显示,普通家兔在不同温度差区间分布的离散程度大于SPF家兔;对合格率的统计显示两者间没有显著差别(P>0.05)。结论SPF家兔在体温变化范围与温差方面的统计数据的离散程度都小于普通家兔,且统计结果显示有显著性差异。     

GnRH-a抗原的制备及不同剂量免疫的效果研究

目的:探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)对动物免疫去势的效果和作用机理.方法:以EDC.HCL为偶合剂,将GnRH-a与BSA连接为复合物,再加入弗氏不完全佐剂制成抗原乳剂;给16只兔子分三组注射不同剂量的抗原,用间接ELISA法测定GnRH抗体效价.结果:制备的GnRH-a抗原为乳白色均匀悬液,物理化学性状稳定良好,安全可靠,无任何不良反应;以50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL剂量的抗原乳剂分别对3个实验组动物进行免疫接种,各组动物均在免疫后两周内检测到GnRH-a抗体,并第4周左右达到高峰,ELISA效价分别为1∶800、1∶1600和1∶1600,说明100μg/mL、150μg/mL剂量的抗原产生的抗体效价致相同,故实践可用100μg/mL的剂量.但抗体达到高峰后持续时间短,下降很快.结论:GnRH-a抗原具有良好的免疫原性,为了延续抗体的高峰水平,有必要加强免疫.     

肝癌,肝硬化病人的戊肝感染状况

肝癌、肝硬化病人的戊肝感染状况廖绵初，干侣仙，尹本康（厦门大学抗癌研究中心）（广东粤北第二人民医院）戊型肝炎是经肠道传播的病毒性疾病，其特点是暴发性流行和散发性流行。感染者多为青、壮年，发病急，死亡率高，尤其对孕妇危害更大￣［１］．我国除新疆等少数地...     

SPF家兔的培育及植入肠道正常菌群后生长性能的观察

目的对普通级实验家兔进行剖腹净化建立SPF家兔种群,提高实验用兔的质量,满足科研、生产及检定工作需要。方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内以人工哺乳方法将仔兔培育成无菌兔,再将双岐杆菌等肠道正常菌接种到无菌兔体内,使其成为SPF兔;对SPF环境中植入肠道正常菌兔和未植菌兔离乳后生长性能进行观察比较。结果人工培育出的SPF兔,经微生物和寄生虫检测,符合国家SPF兔标准;植入肠道正常菌群兔体重与未植入肠道正常菌兔生长体重相比极显著增加。结论通过剖腹摘取子宫术,人工哺乳仔兔和植入肠道正常菌群的方法建立了SPF实验用兔种群。     

吗啡人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

利用化学法合成吗啡人工抗原,将此抗原免疫新西兰大白兔制备抗吗啡多克隆抗体.利用混合酸酐法将吗啡人工抗原分别与蛋白质载体BSA及OVA偶联,经蛋白质电泳以及紫外扫描检测,证明吗啡人工抗原合成成功.用间酶联免疫检测法检测,证明制备得到了高效价的吗啡多克隆抗体血清,且与吗啡人工抗原具有高特异性反应,可用于吗啡免疫学检测方法的研究.     

北京地区2008～2011年实验动物绿脓杆菌检测结果与分析

目的了解SPF级实验动物中绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa,PA）感染现状和规律,为防止绿脓杆菌感染提供依据。方法参照国家标准,对SPF级小鼠、大鼠、豚鼠和兔进行检测。结果在2008～2011年中检测的SPF级动物中,PA感染的阳性率为8.9%（267/2988）;不同动物感染率无显著差异;不同时间（不同年份和不同季度）PA阳性检出率无显著差异;其中,免疫缺陷动物的PA阳性检出率为32.5%明显高于免疫功能正常动物的7.6%;PA检出率随着送检单位和动物数量的增加逐年升高;不同动物群体间感染率相当,且保持稳定。结论北京地区SPF级实验动物中PA检出率较高,应加强管理。     

兔抗PEB1多克隆抗体的制备及鉴定

摘要：【目的】利用纯化的空肠弯曲菌表面蛋白PEB1,制备其多克隆抗体。【方法】用PEB1蛋白作为抗原免疫兔,分离血清得到兔抗PEB1多克隆抗体,用ELISA法检测抗体效价,并用Western-Blotting验证。【结果】PEB1蛋白免疫兔后,得到了兔抗PEB1多克隆抗体,间接ELASA法检测表明兔抗PEB 1血清效价达到1：10 000,Western印记检测表明,该抗体能与PEB1蛋白发生特异性结合,其特异性与敏感性均较好。【结论】获得了高效价的PEB1多克隆抗体。     

不同小鼠肝炎病毒对ELISA方法检测其血清抗体的影响

目的 建立小鼠肝炎病毒（Mouse Hepatitis Virus,MHV）血清抗体ELISA检测方法,用于本地区MHV的日常监测,以便对SPF小鼠感染状况及时作出判断。方法 选取3种MHV毒株MHV1、MHV-JHM和MHV-A59,通过L929细胞扩增培养获得纯化浓缩抗原并筛选适合包被抗原类型;免疫BALB/C小鼠,获得高效价免疫阳性血清;优化ELISA反应体系建立规范化的ELISA试剂盒并用于临床小鼠血清样品的检测。结果 筛选出适合本地区的MHV包被抗原类型为MHV1,建立了病毒扩增及浓缩纯化方法,制备的MHV抗血清达到同批次大量高滴度的水平,可作为标准化质控血清。包被抗原、待检血清和酶结合物最佳工作浓度分别为4. 0μg/m L (10 -7. 73 /0. 1 m L TCID50)、1∶40和1∶4 000稀释;批次内和批次间平均变异系数分别为5. 13%和5. 57%;检测灵敏度为1∶4 000稀释;与小鼠仙台病毒（SV）、小鼠肺炎病毒（PVM）、呼肠孤病毒III型（Reo3）、小鼠细小病毒（MVM）和鼠痘病毒（Ect）阳性血清均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于10%。对165份血清样品进行检测,阳性血清相符率97. 37%（37/38）,阴性血清相符率92. 19%（118/127）。结论 本研究建立的ELISA方法检测小鼠血清MHV抗体具有较高的特异性、敏感性和结果可重复性,可以用于本地区MHV日常病原学监测,以便对小鼠感染状况作出准确判断。