转基因马铃薯中病原诱导GO基因的表达及其对晚疫病的抗性

利用ＰＣＲ技术从黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）中扩增并克隆了葡萄糖氧化酶（ｇｌｕｃｏｓｅ ｏｘｉｄａｓｅ，简称ＧＯ）基因，并将马铃薯病原诱导型启动子（Ｐｒｐ１－１基因启动子）与其融合构建了植物表达载体ｐＣＡＭＧＯ。经农杆菌介导转化获得了转基因植株，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交显示葡萄糖氧化酶基因整合进马铃薯基因组。该基因的表达及所引起的Ｈ２Ｏ２的生成由淀粉－ＫＩ的显色反应得到证实。用马铃薯晚     

硅酞菁染料与SiO2介质的结构关联及强光限幅效应

通过二氯硅酞菁染料（ＳｉＰｃＣ１２）中的活性氯与γ－氨基丙基三乙氧基硅烷（３－ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌｔｒｉｅ－ｔｈｏｘｙｓｉｌａｎｅ，ＮＨ_２（ＣＨ_２）_３Ｓｉ（ＯＣ_２Ｈ_５）_３，ＫＨ５５０）中氨基的亲核取代化学反应，把硅酞菁染料连接到ＫＨ５５０中．反应产物与γ－缩水甘油醚基丙基三甲氧基硅烷（３－ｇｌｙｃｉｄｏｘｙｐｒｏｐｌｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｓｉｌａｎｅ，ＣＨ_２ＯＣＨＣＨ_２Ｏ（ＣＨ_２）_３Ｓｉ（ＯＣＨ_３）_３，ＫＨ５６０）相复合，随着系统物质的水解和聚合反应的进行，ＳｉＰｃ成功地嫁接于无机网络中，使得本来极难溶的酞菁有机分子以较大浓度以单体形式掺杂到无机介质中，制得较好物化性能与光学性能的复合材料．用红外光谱与紫外光谱表征了ＳｉＰｃＣ１_２与ＫＨ５５０的化学反应产物用波长５３２ｎｍ，脉宽８ｎｓ的 Ｎｄ~(３＋)． ＹＡＧ激光对获得的不同 ＳｉＰｃＣｌ_２掺杂浓度的复合材料的光限幅效应作了研究．     

人神经元电压门控钙通道γ-3基因的克隆

将小鼠Ｃａｃｎｇ２基因的编码区与ＥＳＴ数据库进行同源性分析，得到一个与小鼠Ｃａｃｎｇ２基因在 ４３５ ｂｐ中有 ７５％同源的 ＥＳＴ（ＧｅｎＢａｎｋ： Ｗ２９０９５）．在该 ＥＳＴ中设计引物与 ｃＤＮＡ文库载体臂上引物行巢式 ＰＣＲ和 ＲＡＣＥ反应，在人脑前叶皮质 ｃＤＮＡ文库和人脑 Ｒｅａｄｙ ｃＤＮＡ中获得 ｃＤＮＡ序列 １５４５ ｂｐ，其中包含一个 ９４８ ｂｐ的可读框，编码 ３１５个氨基酸．该可读框经确证命名为 ＣＡＣＮＧ３．ＣＡＣＮＧ３基因与大规模测序中定位于１６ｐ１２－ｐ１３．１的ＢＡＣ克隆ＡＣ００４１２５完全一致，从而将该基因定位于１６ｐ１２－ｐ１３．１，并由此获得它的基因组结构，编码区由４个外显子组成．经ＲＴ－ＰＣＲ分析，ＣＡＣＮＧ３在成人脑和胎脑有表达．运用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ在视网膜色素变性家系、视网膜色素变性伴耳聋和癫痫家系进行突变检测，未检测到突变．     

人β-簇珠蛋白基因上游远侧端调控元件与GATA转录因子结合模式

用羟基脲诱导ＨＥＬ细胞，将诱导前后细胞核内蛋白质因子与人β－类珠蛋白基因ＬＣＲ调控元件内ＤＮａｓｅⅠ超敏感点Ⅲ和Ⅳ核心ＤＮＡ序列（ＨＳ３－１４７１６－－１４９９１ＢＰ和ＨＳ４－１８３０６－１８５８６ＢＰ）的结合模式进行了分析，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析结果表明，随着羟基脲诱导ＨＥＬ细胞时间的延长，细胞核内ＧＡＴＡ－２的含暧渐减少；与之相反，ＧＡＴＡ－１的含量却随着诱导的时间而增加。结合竞争性ＥＭＳ     

EPO激活HEL细胞内CREB转录因子

ＣＲＥＢ（ｃＡＭＰｒｅｓｐｏｎｓｅｅｌｅｍｅｎｌｔｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ）是一种细胞核内转录因子，激活的ＣＲＥＢ能与特异调控元件ＣＲＥ（ｃＡＭＰｒｅｓｐｏｎｓｅｅｌｅｍｅｎｔ）结合研究结果显示，ＥＰＯ（Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｎｔｉｎ）诱导ＨＥＬ细胞（ＵＭＡＮＥＲＹＴＨＲＯＬＥＵＫＥＭＩＡＣＥＬＬ）２０ｍｉｎ后分子筛的ＨＥＬ细胞核内ＣＲＥＢ的１３３位丝氨酸残基被磷酸化，并具有转录因子功能，用１３     

转甜菜碱醛脱氢酶基因烟草叶片中抗氧化酶活性增高

转甜菜碱醛脱氢酶（ＢＡＤＨ）基因烟草叶片超氧物歧化酶（ＳＯＤ）的活性比对照增加约３６％，过氧化氢酶（Ｃａｔ）和过氧化物酶（ＰＯＤ）活性分别提高约的６２％和８８％，定位于叶绿体中的抗坏血酸－谷胱甘肽途径的抗坏血酸过氧化物酶（ＡｓＡＰＯＤ），脱氢抗坏血酸还原酶（ＤＡｓＡＲ）和谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）活性分别提高６７．７％，４７．９％和３８．８％，表明由ＳＯＤ催化阴离子自由基Ｏ２所产生的活性氧Ｈ２Ｏ２能被     

黄体酮清除超氧离子作用机理及反应动力学

在０．１ｍｏｌ／Ｌ ＮａＨＣＯ３介质中，用极谱法研究了Ｏ２＾．－与黄体酮（ＰＲＧ）的化学反应。实验表明，与具有类似结构的糖皮质类甾体抑制磷脂酶Ａ２的活性从而间接阻止Ｏ２＾．－产生的机理不同，黄体酮与Ｏ２＾．－自由基的化学反应机制的Ｏ２＾．－氧化黄体酮分子中的烯酮基，Ｏ２＾．－自身被还原生成Ｈ２Ｏ２，ＰＲＧ是Ｏ２＾．－的清除剂，推导了化学反应速率常数公式，测得Ｏ２＾．－氧化黄体酮的表观化学反应速率常     

植物病原细菌中活性氧的释放和调节

一些植物病原细菌,包括Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ ｐｖ．ｏｒｙｚａｅ及其毒性基因突变体Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ ｐｖ．ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ,Ｅｒｕｎｉｎｉａ ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ ｓｕｂｓｐ．ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ等自身具有产生Ｏ２＾－、Ｈ２Ｏ２等活性氧的功能,且受到Ｃａ＾２＋,氧浓度及ＮＡＤＰＨ的调节,热敏感分析表明,病原菌中产生活性氧的成分可能是特殊的蛋白或酶类,并     

含RGD环六肽与整合素蛋白α_(Ⅱb)β_3的结合反应

ＲＧＤ序列普遍存在于细胞外基质蛋白中，并能为许多整合素蛋白所识别．利用 ＥＬＩＳＡ，ＳＰＲ等技术，对表面固定的人工合成生物素－含 ＲＧＤ环六肽［ｃｙｃｌｏ（－Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ－Ｄ－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－）］与人血小板整合素蛋白α_（Ⅱｂ）β_３的结合能力进行了检测结果表明，含ＲＧＤ环六肽与生物素基团之间的间臂长度在 １．４８～２．２ ｎｍ时， ＲＧＤ序列才能有效进入α_（Ⅱｂ）β_３以头部的反应中心并发生结合反应；反应的平衡解离常数为 １．１μｍｏｌ／Ｌ．为在固体表面研究整合素蛋白介导的细胞吸附过程提供了一个理想的模型系统．     

控制麻疹病毒血凝集性的重要功能位点

ＩＭＡ．ＳＭＤ是经Ｂ９５ａ细胞系培养纯化的２株麻疹病毒，其血凝集性呈阴性。将其在Ｖｅｒｏ细胞系中培养数代后其血凝集性转变为阳性。对在２种细胞中培养获得的病毒进行序列分析发现：以上２株病毒Ｈ蛋白的第５４６位均由Ｓｅｒ（ＨＡＤ阴性）突变为Ｇｌｙ（ＨＡＤ阴性）。利用位点专一性诱变并在ＣＯＳ细胞中对２种Ｈ蛋白进行表达证实：该突变导致血凝集性的改变；进一步利用抗ＣＤ４６的单克隆抗体证实：该突变同时导致Ｈ蛋白     

小麦黄花叶病毒72ku蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗血清制备

采用逆转录－ＰＣＲ方法，扩增获得小麦黄花叶病毒（ＷＹＭＶ）ＲＮＡ２上的７２ｋｕ蛋白基因，将其克隆到ｐＥＴ３０ａ（＋）上，构建了该基因的原核表达载体ｐＥＴＰ７２。ＳＤＳ－ＲＡＧＥ分析结果显示，经ＩＰＴＧ诱导，７２ｋｕ蛋白基因在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中得到高效表达。以含表达产物的凝胶作为抗原，免疫家兔，首次制备了小麦黄花叶病毒ＲＮＡ２７２ｋｕ蛋白特异性抗血清。     

人δ珠蛋白基因启动子区-64位C→T点突变对DNA结合蛋白的影响

用凝胶迁移改变实验研究了人δ珠蛋白基因启动子区－６４Ｃ→Ｔ点突变对ＤＮＡ结合蛋白的影响,人工合成两条３６ｂｐ该基因启动子区－８３－－４８ｂｐ之间的片段ＷＯＧ和ＭＯＧ,ＷＯＧ含有野生型“ＣＡＡＴ样盒”以及,ＭＯＧ含有变异型“ＣＡＡＴ样盒”。结果表明：（１）在红系细胞ＭＥＬ,ｋ５６２以及经Ｈｅｍｉｎ诱导的ｋ５６２细胞中,ＭＧ对ＣＣＡＡＴ结合蛋白和ＧＡＴＡ－１的要和力显著增加;（２）经Ｈｅｍｉｎ诱导的ｋ     

钠离子对 γ-Al2O3表面的修饰作用

用＾１Ｈ＾２３Ｎａ核磁共振双共振新技术研究了钠离子对γ－ＡＬ２Ｏ３载体表面羟基的修饰作用。＾１Ｈ＾２３Ｎａ交叉极化（ＣＰ）实验明确地区分出３种与表面羟基有相互作用的钠离子，而与表面羟基无相互作用的沉积盐－Ｎａ２ＣＯ３Ｒ信号则被完全抑制掉。＾１Ｈ〔＾２３Ｎａ〕自旋回波以共振实验明确地揭示了这种相互作用的细节，当Ｎａ＾＋负载量较低（５％，１０％）时，Ｎａ＾＋优先与γ－ＡＬ２Ｏ３表面上的酸性ＯＨ配位，随     

热休克基因mRNA定量RT-PCR检测方法的建立及其应用

广泛存在于生物细胞中的热休克蛋白（ｈｅａｔ ｓｈｏｃｋ ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＨＳＰ）不仅在机体的应激保扩、生长发育中起重要作用，而且与疾病的发生密切相关因此，建立准确检测细胞中ＨＳＰ基因表达水平的ＲＴ－ＰＣＲ方法对基础及临床研究均具有重要意义。首先应用ＤＮＡ重组技术及体外转录体系制备了一种能用作测定ｈｓｐ７０，ｈｓｐ９０α及ｈｓｐ９０βｍＲＮＡ的复合内参照ＲＮＡ；然后，通过对反应条件的优化、选择，建     

Pfu酶基因的克隆、表达、纯化及长距离PCR的研究

用ＰＣＲ方法从Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕｓ的总ＮＤＡ扩增出了含有Ｐｆｕ ＤＮＡ ｐｏｌＡ基因的２．３ｋｂ片段,并将该基因克隆入ｐＧＥＭ－Ｔ载体。用ＮｃｏＩ和ＸｈｏＩ对重组质粒ｐＴ－ｐｆｕ进行了酶切。并将ｐｆｕ ｐｏｌＡ基因捶 入表达载体ｐＥＴ－３ｄ－Ｘ。     

用低能氩离子束介导将水稻几丁质酶基因导入小麦

用低能氩离子束介导将构建的ｐＣＡＭＢＩＡ１３０８质粒载体上携带的几丁质酶基因（ＲＣＨ８）导入３个小麦栽培品种扬麦１５８，皖９２１０，皖麦３２号的成熟胚细胞，来自成熟胚的初生愈伤组织转Ｈｍ浓度为１０－２０ｍｇ／Ｌ潮霉素（ｈｙｇｒｏｍｙｃｉｎ，Ｈｍ）的培养的筛选培养，获得的抗性伤组织转入Ｈｍ浓度为１０－２０ｍｇ／Ｌ的培养基上进行分化培养，３个小麦品种都获得了再生植株，再生苗ＰＣＲ和ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅ     

VK3诱导的植物细胞凋亡及其机理

ＶＫ３可诱导烟草细胞的凋亡，表现为：染化体凝集，凋亡小体形成，ＤＮＡ末端断裂、降解形成梯状电泳，此过程伴随特异核酸酶的激活，其活性依赖于Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋，可被Ｚｎ＾２＋和ＥＤＴＡ（Ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ）抑制。ＤＮＡ降解可被ＤＥＶＤ（Ａｃ－Ａｓｐ－Ｇｌｕ－Ｖａｌ－Ａｓｐ－ａｌｄｅｈｙｄｅ）抑制。核纤层蛋白降解为３５ｋｕ片段，ＤＥＶＤ，ＰＭＳＦ（Ｐｈｅｎｙｌｍｅｔ     

α-酮戊二酸腙稀土配合物的合成、表征及弛豫性能研究(Ⅱ)--α-酮戊二酸苯甲酰腙Gd配合物的弛豫性能

报道了α－酮戊二酸苯甲酰腙（Ｈ_２ＬＰＢ）配体及它的６种稀土配合物（Ｌａ，Ｐｒ，Ｎｄ，Ｓｍ，Ｇｄ和Ｅｒ）的合成，用元素分析、热分析、红外、紫外和核磁共振谱对配合物的组成和结构进行了表征，通过ＩＮＶＲＥＣ．Ａｕ程序用反转恢复法测定了 Ｇｄ配合物对质子的弛豫效率，Ｒ_１＝８．０５ ｍｍｏｌ· Ｌ~（－１） ｓ~（－１）并对 Ｇｄ配合物进行了动物急性毒性实验， ＬＤ_５０＝（４６８．２±３０） ｍｇ／ｋｇ．     

稻瘟病病原物诱导启动子的构建及表达

利用ＰＣＲ技术从小麦和马铃薯中分别扩增并克隆了病原诱导性谷胱甘肽－Ｓ－转移酶基因ＧｓｔＡｌ和Ｇｓｔｌ启动子片段，将它们分别与水稻肌动蛋白基因（Ａｃｔｌ）核心启动子序列、５’端非翻译前导序列以及ＧＵＳ基因融合构建出植物载体ｐＷＭＩＧ－５０和ｐＰＭＩＧ－５０，然后转化水稻，并对嵌合启动子的诱导活性进行了分析。结果表明：（１）在转基因水稻细胞中嵌合启动子可受稻瘟病病原物的诱导；（２）水稻Ａｃｔｌ第一内含     

硅酞菁染料与SiO2介质的结构关联及强光限幅效应

通过二氯硅酞菁染（ＳｉＰｃＣｌ２）中的活性γ－氨基丙基三乙氧基硅烷（３－ａｎｉｎｏｐｒｏｐｙｌｔｒｉｅｔｈｏｘｙｓｉｌａｎｅ，ＮＨ２（ＣＨ２）３Ｓｉ（ＯＣ２Ｈ５）３，ＫＨ５５０）中氨基的亲核取代化学反应，把酞菁染料连接到ＫＨ５５０中，反应产物γ－缩水甘油醚基丙基三甲基硅烷（３－ｇｌｙｃｉｄｏｘｙｐｒｏｐｌｔｒｉｍｅｔｈｏｘｙｓｉｌａｎｅ，ＣＨ２ＯＣＨＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）３Ｓｉ（ＯＣＨ３）３，ＫＨ５６