锚定PCR(Anchored PCR): 一种新的染色体步行方法

基于PCR的技术是克隆已知DNA片段侧翼序列的最常用方法．到目前为止，这些方法大致可以分为3种类型：反向PCR(inverse PCR)、连接介导的PCR(1igation-mediated PCR)和随机引物PCR(randomly primed PCR)．反向PCR是使用最早的方法，其原理是用限制性内切酶消化基因组总     

食物过敏原数据库的建立和使用

过敏性疾病在相当大程度上侵扰着人类的健康．近年来,随着生物技术的迅速发展,转基因产品将不断进入人类社会生活,人类食品中将越来越多地包含来自遗传修饰的生物（ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｏｒｇａｎｉｓｍｓ, ＧＭＯ）成分１）,这些基因的产物在食物中是否安全引起了广泛的关注．因此在转基因食品的商业化之前要对外来基因产物的安全性做出评价,其中包括这种新产物是否为过敏原的评价． 最近,国际食品生物技术委员会和国际生命科学研究院过敏性与免疫研究所一起,制定出一套分析遗传改良食品过敏性的树状分析法［…     

转基因马铃薯中病原诱导GO基因的表达及其对晚疫病的抗性

利用ＰＣＲ技术从黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）中扩增并克隆了葡萄糖氧化酶（ｇｌｕｃｏｓｅ ｏｘｉｄａｓｅ,简称ＧＯ）基因,并将马铃薯病原诱导型启动子（Ｐｒｐ１－１基因启动子）与其融合构建了植物表达载体ｐＣＡＭＧＯ。经农杆菌介导转化获得了转基因植株,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交显示葡萄糖氧化酶基因整合进马铃薯基因组。该基因的表达及所引起的Ｈ２Ｏ２的生成由淀粉－ＫＩ的显色反应得到证实。用马铃薯晚     

厚叶悬蒴苣苔 BcWRKY1 转录因子基因的克隆及初步的功能分析

通过RT-PCR程序,从经过SA诱导的厚叶悬蒴苣苔中获得含WRKY家族保守序列的一条cDNA片段。运用RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技术获得全长1 803bp的cDNA克隆,名之为 BcWRKY1 。序列分析表明: BcWRKY1 与甘薯SPF1 ［D30038］相似性最高,保守区同源性达到84％。初步的Northern杂交分析表明：干旱、低温、高盐等逆境胁迫和外加SA、MeJA、JA、ABA等信号分子的诱导均能提高 BcWRKY1 基因的表达。但是表达情况各不相同。150 mmol/L NaCl对 BcWRKY1 的诱导作用尤为明显和迅速。2 168 bp的 BcWRKY1 的基因组DNA克隆亦已获得,序列分析表明它含有4个内含子。     

三种红豆杉BAPT基因的克隆及序列分析

利用热启动PCR法分别从矮紫杉、欧洲红豆杉以及中国红豆杉基因组DNA中首次克隆到长度为1456bp的BAPT基因全长序列。序列分析结果表明:三种红豆杉BAPT基因序列的同源性达到了97.4%;将三种红豆杉的BAPT序列与NCBI上登录的BAPTcDNA序列相比对,发现其均含有1个核苷酸序列高度保守的110bp左右的内含子。     

受内生真菌调节的草坪草对逆境性的抵抗力

高等植物普遍存在内生真菌(endophyte),在禾本科草类中尤为常见.而且大量研究表明,共生真菌不仅与植物的营养有关,而且与植物对环境的适应能力密切相关.     

粉尘螨过敏原在转基因植物中的致敏活性分析

在转基因食品潜在致敏性的研究中, 将粉尘螨过敏原基因(Derf₂)引入植物中表达. 经PCR, Southern和Northern杂交以及ELISA检测证明, 外源基因已发生整合并正常表达, 表明转基因烟草作为一个实验系统来研究基因产物的致敏性是可行的. 同时, 采用RT-PCR从转基因烟草中扩增出经植物加工后的致敏原基因Derf₂片段, 序列比对证明植物(烟草)能对动物(粉尘螨)的内含子进行正确识别和有效剪切.     

果实专一性启动子驱动ipt基因在番茄中的表达及其对番茄果实发育的影响

用PCR方法获得了番茄果实性启动子（2A12）和农杆菌（C58）Ti质粒上的ipt基因。分别构建由2A12驱动下的gus和ipt基因的植物表达载体，并使中嵌合基因经农杆菌介导转入番茄品种“中蔬4号”的基因组中，GUS组织化学活性分析表明，2A12启动子具有严格的果实表达专一性。2A12驱动ipt基因在番茄中表达，使得果实中细胞分裂素的含量增加，最终导致果实中种子发育的停滞和胎座组织的增厚，并形成无籽番茄果实，同时转基因番茄果实成熟进程受阻且果实采用的储藏保鲜时间延长了1－2周，进一步分析发现，转基因番茄坐果率和产量均有不同程度的增加，虽然可溶性糖含量略有降低，但果实中干物质和粗蛋白含量有所增高。     

关于开发与利用耐旱基因资源的建议

脆弱和趋于恶化的西部生态 占我国国土面积５０％以上的西部和北部地区，降水量稀少，而且季节分配不均，受到严重缺水的威胁，这是造成西部经济滞后的一个重要根源。近２０年来全球荒漠化面积已占陆地面积的２５％。我国西部荒漠化的土地以每年３００万亩的速度扩大。据估计每年因风沙危害导致直接经济损失高达４５亿元。年复一年地陷入干旱的生态危机，严重威胁到人类社会的可持续发展。河流断流、土地沙化、沙尘暴频发、湖泊湿地萎缩、草地退化、森林锐减、生物量和生物多样性急剧下降，已引起全社会的普遍忧虑。生态系统的退化现象甚至…     

Cre/lox定位重组系统共转化烟草及其精确重组

将噬菌体Ｐ１的Ｃｒｅ／ｌｏｘ定位重组系统的ｃｒｅ基因和含ｌｏｘ识别位点的两种结构通过土壤农杆菌介导的共转化方法导入烟草,得到双抗阳性苗。经ＰＣＲ检测表明,共转化苗中已包含上述两种结构,实验证明Ｃｒｅ／ｌｏｘ定位组系统在共转化烟草中已进行Ｃｒｅ酶介导的ＤＮＡ删除。