一品红离体培养及体细胞胚高频率发生的研究

一品红苞片为外植体进行离体培养,以MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1固体培养基愈伤诱导率及相对生长量最高。此培养基中继代的愈伤组织转入MS+2,4-D 1.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+水解酪蛋白80 mg.L-1固体培养基时体细胞胚分化率最高。加入活性碳1 g.L-1有利于高频率体细胞胚发生。MS培养基优于N6和B5培养基,有利于高频率体细胞胚发生。胚性愈伤组织及时转入液体培养基中悬浮振荡培养有利于高频率体细胞胚发生。     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。     

山苍子带芽茎段的组织培养

以山苍子(Litseacubeba)带芽茎段作为外植体进行组织培养实验。实验以MS为基本培养基,按不同比例添加激素,配制成3种培养基:MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA2.0mg/L,MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA2.0mg/L,MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA3.0mg/L,MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA3.0mg/L,MS培养基作为空白对照,在暗培养和光照培养条件下进行愈伤组织和芽的诱导分化。结果显示:MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA2.0mg/L为诱导愈伤组织的最好培养基,诱导率最高,达55.6%;MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA3.0mg/L为最好的萌芽培养基,萌芽率最高,达60%;MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA3.0mg/L为最好的丛生芽增殖培养基,增殖系数达8±1.4。     

红阳猕猴桃叶片再生体系的建立

文章以红阳猕猴桃组培苗的叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂对愈伤组织的诱导、不定芽的分化及生根的影响。结果表明,MS+0.5mg/L ZT(玉米素)+0.5mg/L 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)诱导产生淡黄色疏松的愈伤组织,MS+3.0mg/L 6-BA(6-苄基腺嘌呤)+1.0mg/L NAA(萘乙酸)诱导产生绿色致密的愈伤组织,愈伤组织诱导率均为100%。在MS+5.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基上愈伤组织的不定芽分化率达到100%。在1/2 MS+1.2mg/L IBA(吲哚丁酸)培养基上不定芽生根率为83.3%。     

高羊茅高频再生体系的建立

目的建立高频再生体系,为相关基因的转化提供良好的受体系统。方法以高羊茅(Fes-tuca.arundinacea)成熟种子为外植体,以MS为基本培养基,进行高羊茅胚性愈伤组织诱导、继代、分化及生根培养。结果初生愈伤组织在MS 2,4-D5 mg/L CH400 mg/L 蔗糖60 g/L 琼脂12 g/L的继代培养基诱导出体细胞胚后,在含6-BA2.0 mg/L NAA0.5 mg/L的MS培养基上分化形成丛生苗,分化率达78.9%;再生苗在1/2 MS NAA0.5 mg/L生根培养基上生根,生根率达100%。结论MS 2,4-D 9 mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基,MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.5mg/L为最佳分化培养基,1/2 MS NAA0.5 mg/L为最佳生根培养基。     

黄毛草莓愈伤组织诱导条件优化

本研究分别以黄毛草莓叶片和茎尖生长点为外植体进行愈伤组织的诱导,并通过比较茎尖愈伤组织在不同培养基以及不同植物激素组合下的生长情况,为建立黄毛草莓高效快速的繁殖体系,筛选愈伤组织诱导的最适培养基奠定基础.结果表明,与1/2MS培养基相比,MS培养基作为基础培养基(0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA条件下)诱导的愈伤组织效果最佳;以MS为基本培养基,通过4因素3水平L9(34)正交实验研究不同浓度组合的4种植物激素对黄毛草莓愈伤组织诱导率的影响.结果表明2,4-D对黄毛草莓叶片愈伤组织的诱导影响最大.黄毛草莓叶片愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA;NAA对黄毛草莓茎尖愈伤组织的诱导影响最大,黄毛草莓茎尖愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.6 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L NAA.     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及植株再生体系的优化

为了建立和优化小麦成熟胚愈伤组织的诱导和植株再生体系,以京411、Brock、春麦S10鉴-6和春麦津强5号4种小麦的成熟胚为外植体,进行愈伤组织的诱导、分化及再生体系优化的研究.结果表明:(1)京411在各种诱导培养基中的平均出愈率高于其他3个品种;(2)京411在MS1(MS+2.0 mg/L 2,4-D+200 mg/L CH+100 mg/L MI+250 mg/L Glu)培养基中的出愈率最高,因此将该培养基定为京411的最佳诱导培养基;(3)同不切相比,采用纵全切的方式处理京411的成熟胚能够获得较高的出愈率和质量较好的愈伤组织;(4)在分化培养基F7(MS+10 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA)中,京411成熟胚的愈伤组织分化率、出苗率和生根率最高,幼苗长势最好,因此该培养基可以用作京411成熟胚愈伤组织的分化培养基.     

不同激素配比对直立型扁蓿豆愈伤组织诱导及分化的影响

通过L25(53)正交试验设计,在MS基本培养基上添加不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA三种激素.试验分别用直立型扁蓿豆的下胚轴和子叶作为外植体,探讨三种激素对直立型扁蓿豆愈伤组织诱导及分化的影响以及适合直立型扁蓿豆愈伤组织诱导和分化成苗的培养基.结果表明:6-BA对愈伤组织的形成有很大的影响;2,4-D,NAA对诱导愈伤的形成没有明显的作用.直立型扁蓿豆愈伤组织诱导的较优培养基组合是MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L.同时,2,4-D对直立型扁蓿豆分化成苗的影响是最明显的,其次是6-BA,变化不明显的是NAA.愈伤组织分化成苗的较佳培养基组合是MS+6-BA 1.0 mg/L.     

凌风草组织培养体系的建立

以凌风草为材料,通过对该植株再生条件的优化,获得适宜凌风草愈伤组织再生的外植体材料和基本培养基,建立凌风草愈伤组织再生体系.试验结果表明:愈伤组织诱导的最适外植体为凌风草种子,最适基本培养基为MS培养基,最佳培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L+6-BA0.3 mg/L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+NAA0.1 mg/L+6-BA1.0 mg/L+KT2.0 mg/L;生根最佳培养基为MS+NAA0.2 mg/L+C 0.2 g/L.     

中华芦荟成熟叶组织培养的研究

以中华芦荟成熟叶为外植体,接种于9组不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度配比的脱分化培养基中,诱导外植体的脱分化形成愈伤组织。研究表明,中华芦荟叶愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+1.0g/L活性炭;诱导不定芽的适宜培养基为MS+1mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.7g/L活性炭;及诱导生根的适宜培养基为1/2MS+0.2mg/Lα-萘乙酸(NAA)+20g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.5g/L活性炭,生根率达100%.     

西红花球茎组织培养的研究

以球茎切块为外植体，MS为基本培养基，0．5mg·L^-1 6-BA和2mg·L^-1 2，4-D为激素，在（20±2）℃，黑暗环境下培养，可以获得98％的愈伤组织诱导率．愈伤转入MS＋5．0mg·L^-1 6-BA＋5．0mg·L^-1 NAA培养基中，可诱导丛生芽的产生，将丛生芽切成单个不定芽后转移到MS＋4．0mg·L^-1 6-BA＋0．5mg·L^-1 NAA的培养基中，光照条件下可诱导新生小球茎的产生．     

丹参嫩茎组织培养及无性系建立的研究

为保护濒危植物丹参,实现人工栽培,以嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导与分化、试管苗生根、继代、移栽和定植研究.结果证明:MS+6-BA0.3 mg.L-1+2,4-D2.0 mg.L-1+NAA0.8 mg.L-1是丹参嫩茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基;1/2MS+AgNO30.2 mg.L-1和1/2MS+AgNO30.2 mg.L-1+6-BA 0.1 mg.L-12种培养基是丹参颗粒状愈伤组织块分化培养的理想培养基;以经过浓度为10mg.L-1的NAA溶液处理3 m in的不定芽为材料、以1/3MS+IAA0.4 mg.L-1为培养基的方法是丹参不定芽生根培养的理想方法.试管苗移栽成活率为92.7%,定植成活率为99.2%.定植的试管苗保持了野生丹参的所有生物性,建立起丹参的无性系.     

石防风胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚的发生

石防风幼苗的根在含0.1-50mg/L 2,4-D的 MS 培养基中能诱导产生愈伤组织,最适浓度为0.5mg/L.愈伤组织来源于中柱内部的细胞。在0.5mg/L2,4-D 存在下,细胞分裂生长并发育至胚性细胞团或原胚,转移至无激素培养基后,愈伤组织表面及内部分化出发育阶段不同的体细胞胚,最后发育成为完整植株。在初生幼苗的胚轴上(有时在根或叶)常有次级胚的发生,它们能继续长成次级苗,并在苗上再次长胚,如此不断,直至多次。由此可见石防风体细胞胚发生的能力,是十分强大的。     

荔枝（Litchi chinensis）细胞培养的初步研究

用荔枝无菌苗作为外植体，在添加了ＡｇＮＯ３呈蜂王浆的含１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和１ｍｇ２，４－Ｄ的ＭＳ培养基中诱导出愈伤组织，在同样培养基中继代培养，得到了的２细胞系，这种细胞在含１ｍｇ／Ｌ－６－ＢＡ＋２ｍｇ／Ｌ，２，４－Ｄ的ＭＳ培养基中悬浮培养，培养周期２５ｄ，结果表明，维生素Ｃ和ＮａＣｌ在悬浮２中有良好的防褐作用。     

大花君子兰单细胞培养再生绿色植株

以大花君子兰（ｃｌｉｖｉａ ｍｉｎｉａｔａ） 瘤状结构的胚性愈伤组织为单细胞培养来源,在附加２ ｍｇ／ＬＫＴ、１ｍｇ／Ｌ２ ,４ —Ｄ 及３ ％ 蔗糖的ＭＳ基本培养基上培养,诱导出的愈伤组织经同一诱导培养基长期继代培养后形成幼苗,将较大的幼苗转入状苗生根培养基（ 附加０－５ ｍｇ／ＬＫＴ 和０－１ｍｇ／ＬＮＡＡ的１／２ ＭＳ培养基） 上继代培养形成再生绿色植株。绿苗再生频率随继代时间的延长而提高。     

多变小冠花的组织培养和植株再生

本试验利用未完全展开的多变小冠花(Coronilla varia L.)子叶诱导成愈伤组织,通过体细胞胚胎发生和器官发生两条途径获得了再生植株。愈伤组织在含6-BA 0.5mg/L,KT 0.5mg/L,2,4-D2.0mg/L,CH400mg/L和Gln 225mg/L的MS培养基上培养2—3周后,转移到含6-BA 1.5mg/L,NAA 0.7mg/L,CH 400mg/L,Gln225mg/L的MS培养基上培养4周,再转到6-BA 0.5mg/L,KT 0.5mg/L,椰乳20ml/L,CH 400mg/L和Gln 150mg/L的MS培养基上,5周内形成胚状体。在1/2MS培养基上,胚状体萌发长成植株。愈伤组织在附加6-BA 1.0mg/L,NAA 0.5mg/L,KT 0.5mg/L,CH 400mg/L和Gln 225mg/L的MS培养基上,形成绿色瘤状组织。后者在含6-BA0.7mg/L,NAA 0.2mg/L,椰乳20ml/L,CH 400mg/L和Gln150mg/L的MS培养基上,诱导产生丛状不定芽,不定芽在生根培养基上诱导成完整植株。     

裂叶秋海棠的离体快速繁殖

利用野生裂叶秋海棠叶片及叶柄培养，通过两种方式获得大量再生植株。(1)直接从外植体表面诱导出不定芽，最佳诱导培养基为MS 6-BA 3mg／L，不定芽在培养基MS NAA0．5mg／L 6-BA0．5mg／L增殖成丛生芽．(2)先诱导出愈伤组织，再由愈伤组织分化出大量不定芽．最佳愈伤组织诱导培养基为MS NAA0．5mg／L 2，4-D0．5mg／L 6-BA0．5mg／L,愈伤组织不定芽分化培养基为MS 6-BA 1mg／L,试管苗在含1／5MS无机盐的培养基上生根，之后移栽成活率达85％。     

由野大豆愈伤组织诱导再生植株

在种子萌发过程中,经6-BA(2.0mg/L)和2,4-D(20.mg/L)预处理,野大豆(GlyCine Soja)的上胚轴、子叶和子叶节外植物的愈伤组织在含6-BA(1.0～5.0mg/L)和 IAA(0.5～1.0mg/L)的 MS 培养基上分化出根和苗,获得再生植株。培养基中加入 KT(1.0mg/L)可提高苗的分化率。     

湖北诸葛菜若干外植体再生能力的比较研究

湖北诸葛菜花托、花线在ＭＳ＋０．５－５mg/L6-BA 0．２mg/LNＡＡ的培养基上直接出芽,形成愈植株,无菌苗叶柄、叶片在附加６－ＢＡ或ＫＴ与ＮＡＡ不同浓度及及组合的ＭＳ培养基上诱导形成伤组织或胚状体,愈伤组织分化出芽,再生植株在ＭＳ＋３mg/L6-BA 0.2mg/L NAA培养基上现蕾开花。