5＇端序列对hGM－CSF在大肠杆菌中表达水平的影响

设计并构建了三种起始密码子ＡＴＧ上下游不同序列的人ＧＭ－ＣＳＦ原核表达质粒，对其核苷酸序列进行分析验证后，使它们分别在大肠杆菌中表达了人ＧＭ－ＣＳＦ．结果表明：ｐＬＧＭ３对ＧＭ－ＣＳＦ的表达量比ｐＬＧＭ１高约６倍，比ｐＬＧＭ２高约３倍．     

MTT比色法在检测重组人GM—CSF生物活性中的应用

探索了ＭＴＴ比色法的一系列实验条件，并利用ＧＭ－ＣＳＦ依赖细胞株ＴＦ－１，测定了家蚕基因工程生产的重组人ＧＭ－ＣＳＦ（ｇｒａｎｕｌｏｃｙｔｅ－ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｃｏｌｏｎｙ－ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ）的生物活性，并与半固体培养集落刺激法进行了比较。     

血清浓度对SMMC—7721细胞DNA合成的影响

以人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞为材料研究了不同血清浓度对ＤＮＡ合成和细胞生长状态的影响，结果表明几乎在所有处理中短时无血清培养都能刺激ＳＭＭＣ－７７２１细胞的ＤＮＡ合成，且＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量与培养液中ＦＣＳ浓度成明显负相关，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量比值最高可达３９．３２倍．１８ｈ内，随培养时间的增加无血清培养对细胞ＤＮＡ合成的刺激作用逐渐下降，＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量比值从３９．３２倍下降为３．５３倍，     

人抑癌基因nm23—H1在逆转录病毒载体上表达的研究

应用基因工程的方法，将抑癌基因ｎｍ２３－Ｈ１的ＤＮＡ片段克隆到逆转录病毒表达载体ｐＬＸＳＮ，得到重组质粒ｐＬＸＳＮ－ｎｍｈ１。用磷酸钙沉淀技术将重组质粒转染到辅助包装细胞ψＣＲＩＰ中，通过Ｇ４１８筛选，得到抗性克隆。经ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ杂交检测证实：ｎｍ２３－Ｈ１基因已整合到克隆细胞的染色体上，并且得到表达。获得的逆转录病毒滴度达１０５ＣＦＵ／ｍＬ。     

启动子对外源基因在转基因植物中表达的影响

将来自ｐＢＩ１２１质粒的ＣａＭＶ３５Ｓ启动子片段插入到ｐＢＩ１２１的ＣａＭＶ３５Ｓ启动子与ＧＵＳ基因之间，构建了串联的ＣａＭＶ３５Ｓ启动子载体ｐＬＢ３８．通过三亲交配，将ｐＢＩ１２１及ｐＬＢ３８分别转移到含ｐＧｖ３８５０的农杆菌中，成为适合本研究的双元载体。以叶圆盘转化法将外源基因转入烟草，获得了２种转基因植株。经ＤＮＡ分子杂交、ＮＰＴⅡ点分析、ＧＵＳ荧光定性及定量分析，证明外源基因已整合进烟草基因组并获得表达。ｐＬＢ３８的ＧＵＳ表达量为ｎＢｌ１２１的３～４倍，这表明启动子数目的不同会直接影响其启动基因的表达水平。     

醇醚型表面活性剂的质谱研究

对脂肪醇聚氧乙烯醚非离子型表面活性剂的ＥＩ，ｉ－Ｃ４Ｈ１０－ＣＩ，ＮＨ３－ＣＩ，ＮＨ３－ ＤＣＩ和 ＦＤＭＳ的质谱断裂严物进行归纳，并与 ＧＣ，ＴＬＣ法对比讨论了其分子量 分布的测定方法和存在的问题。对表观平均加成数的样品，ＦＤＭＳ取得 比其它方法更好的结果，ＴＬＣ法与 ＦＤＭＳ互相校核，可做为分子量分布的简易常规分析方法使用。     

微波和长春新碱对白血病细胞的体外净化研究

旨在研究一种较好的微波和长春新碱的联合方法,用于白血病细胞的体外净化．将微波和长春新碱分别单独以及联合作用于正常骨髓细胞ＨＬ６０、Ｕ９３７和Ｋ５６２细胞株,通过ＧＭ－ＣＦＵ和ｔＣＦＵ的测定来评价体外净化的效果．结果发现微波和长春新碱对ＧＭ－ＣＦＵ、ｔＣＦＵ存活率均表现出抑制作用,抑制程度呈现出功率相关性和浓度相关性;在一定范围内,微波和长春新碱对３种细胞株ｔＣＦＵ存活率的抑制显著大于ＧＭ－ＣＦＵ（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）;微波和长春新碱联合作用对３种细胞株的杀伤作用比单用长春新碱有显著性增加（Ｐ＜０．０５）,而不显著增加对ＧＭ－ＣＦＵ的抑制（Ｐ＞０．０５）．这一结果提示微波和长春新碱联合用于白血病细胞的体外净化能产生协同效应,值得进一步研究．     

rhGM-CSF/IL-3融合蛋白中残余菌体DNA的检测

本文利用地高辛标记及检测试剂盒,标记ｐｏｐ２１３６（ＰＭＴＧ３）工程菌染色体ＤＮＡ作为探针,检测基因工程药品重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子／白细胞介素－３（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３）融合蛋白中残余的菌体ＤＮＡ．结果符合质量标准每剂＜１００ｐｇ．     

多重网格方法在通风空调气流数值模拟中的应用

多重网格方法（ＭＧＭ）具有较快的收敛速度．本文讨论了全近似完全的多重网格方法（ＦＡＳ－ＦＭＧ）在三维室内气流数值模拟中的应用．通过对计算实例的结果分析,表明它的收敛速度比单层网格迭代法提高了３～４倍,并明显地改善了收敛过程的稳定性．     

PBT／SBS—g—GMA共混体系的研究

采用溶融共混法制备了ＰＢＴ和甲基丙烯酸缩水甘油酯功能化改性ＳＢＳ的共混物，用ＦＴＩＲ、ＷＡＸＤ，ＤＳＣ，ＭＩ等方法对共混物进行了表征，探讨了熔融共混过程中ＰＢＴ和ＳＢＳ－ｇ－ＧＭＡ的反应机理，研究了ＳＢＳ－ｇ－ＧＭＡ对共混体系相容性，结晶性能，热性能和流变性能的影响。     

重组人粒细胞集落刺激因子在Escherichia coli中的表达研究

根据人天然粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）基因序列设计出引物,通过ＲＴ－ＰＣＲ从人外周血单个核细胞ｍＲＮＡ获得Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ片段,将该片段与原核表达载体ｐＴ７构建成重组体,导入大肠杆菌后发现天然Ｇ－ＣＳＦｃＤＮＡ表达量并不理想,这可能是由于天然ｈＧ－ＣＳＦ５’端Ｇ＋Ｃ的比例过高,使转录后的ｍＲＡ很容易形成二级结构而影响翻译起始,因此在大肠杆菌中很难获得高效表达,根据密码子简并性原则,在不改变编码氨基酸顺序的前提下,通过重新设计ＰＣＲ引物,将ｈＧ－ＣＳＦ的前３个氨基酸密码子中的几个ＧＣ碱基作了改动,获得了新的ｃＤＮＡ突变体,将其与ＰＴ７的重组导入大肠杆菌,获得了高效表达。     

SCF和IL—3对脐血造血细胞长期液体培养的影响

考察了干细胞因子（ＳＣＦ）和白介素３（ＩＬ－３）的不同浓度（５～１００ｍｇ／Ｌ）组合对不同接种密度（分别为３×１０５、６×１０５、１０×１０５ｃｅｌｓ／ｍＬ）的脐血（ＣＢ）细胞扩增和分化的影响。在５种组合下,ＣＦＵ－ＧＭ的扩增倍数都是在ＣＢ单个核细胞培养１２ｄ后达到最高（（１６．４３±２．０８）～（３７．０２±４．６９）,平均为（２５．７５±３．２６））,各组合之间相差较小;而细胞总数的扩增倍数在培养２４ｄ后达到最高（（１４．３８±２．７２）～（３５５．２６±３５．５３）倍,平均为（１０３．４５±３８．７５））,各组合之间相差很大。结果表明,在静态细胞培养过程中细胞密度较高,不利于ＣＦＵ－ＧＭ和总细胞的扩增,如保持在较低细胞密度有利于总细胞数的扩增;细胞因子的浓度对ＣＦＵ－ＧＭ的峰值影响不大,但低浓度能使总细胞数的扩增明显减少。     

血清浓度对SMMC－7721细胞DNA合成的影响

以人肝癌ＳＭＭＣ—７７２１细胞为材料研究了不同血清浓度对ＤＮＡ合成和细胞生长状态的影响，结果表明几乎在所有处理中短时无血清培养都能刺激ＳＭＭＣ—７７２１细胞的ＤＮＡ合成，且３Ｈ—ＴｄＲ掺入量与培养液中ＦＣＳ浓度成明显负相关，３Ｈ—ＴｄＲ掺入量比值最高可达３９．３２倍．１８ｈ内，随培养时间的增加无血清培养对细胞ＤＮＡ合成的刺激作用逐渐下降，３Ｈ—ＴｄＲ掺入量比值从３９．３２倍下降为３．５３倍，结果提示人肝癌ＳＭＭＣ—７７２１细胞对培养液中短时无血清的反应不同于其它细胞株     

微波和长春新碱和对白血病细胞的体外净化研究

旨在研究一种较好的微波和长春新碱的联合方法,用于白血病细胞的体外净化。将微波和长春新碱分别单独以及联合作用正常骨髓细胞ＨＬ６０、Ｕ９３７和Ｋ５６２细胞株,通过ＧＭ－ＣＦＵ和ｔＣＦＵ的测定来评价体外净化的效果。结果发现微波和长春新碱以ＧＭ－ＣＦＵ、ｔＣＦＵ存活率均表现出抑制作用,抑制程度呈现出功率相关性和浓度相关性;在一定范围内,微波和长春新碱对３种细胞株ｔＣＦＵ存活率的抑制显著大于ＧＭ－ＣＦＵ（Ｐ     

喷射沉积Al-20Si-5Fe-3Cu-Mg

利用喷射沉积技术制备了Ａｌ－２０Ｓｉ－５Ｆｅ－３Ｃｕ－１Ｍｇ合金,借助扫描电镜（ＳＥＭ）,Ｘ－射线衍射和拉伸试验等手段研究了喷射沉积合金的微观组织和力学性能,分析了Ｆｅ对合金挤压和热处理后的组织变化,拉伸试验结果表明,喷射沉积Ａｌ－２０Ｓｉ－５Ｆｅ－３Ｃｕ－１Ｍｇ合金具有比粉末冶金Ａｌ－２０Ｓｉ－３Ｃｕ－１Ｍｇ合金更高的高温（３００℃）强度。     

包钴包亚铁磁粉表面的XPS研究

使用ＶＧ ＥＳＣＡＬＡＢ５电子能谱仪对不同产地的ＣｏＦｅ－γ－Ｆｅ２Ｏ３磁粉的表面进行了研究，对不同ＣｏＦｅ－γ－Ｆｅ２Ｏ３磁粉表面Ｃｏ，Ｆｅ元素的可能价态和组分进行了分析，探讨了包钴包亚铁磁粉采用的工艺。     

正常麻醉犬动脉血和脑脊液酸碱电解质关系的初步分析

３０只健康麻醉犬动脉血和脑脊液（ＣＳＦ）酸碱变量及主要电解质检测结果分析发现：ＣＳＦｐＨ、［Ｋ~＋］＜ｐＨａ和［Ｋ~＋］_ａ，相互之间相关显著，其回归方程分别为ＣＳＦｐＨ＝０．４７７×ｐＨａ＋３．７８，ＣＳＦ［Ｋ~＋］＝０．４１８×［Ｋ~＋］_ａ＋１．１２。ＣＳＦＰＣＯ２、［Ｃｌ~－］、［乳酸］［Ｌａｃｔ］＞ＰａＣＯ２、［Ｃｌ－］_ａ和［Ｌａｃｔ］_ａ，相互之间相关显著。其回归方程分别为ＣＳＦＰＣＯ２＝０．５６４×ＰａＣＯ２＋３．５３２５，ＣＳＦ［Ｃｌ~－］＝０．５×［Ｃｌ~－］_ａ＋７６．７，ＣＳＦ［Ｌａｃｔ］＋０．９５×［Ｌａｃｔ］_ａ＋１．０。ＣＳＦ［ＨＣＯ_３~－］与ＣＳＦＰＣＯ２相关显著，回归方程为ＣＳＦ［ＨＣＯ_３~－］＝１．８９８×ＣＳＦＰＣＯ２＋１０．６。     

人干细胞生长因子的克隆与表达

干细胞生长因子能够刺激激造血干细胞生长，并与多种细胞因子有协同作用。研究中，运用ＰＣＲ手段，从中国人胎肝ｍＲＮＡ中扩增得到编码人ＳＣＦ全部胞外部分的ｃＤＮＡ。经测序鉴定后，将其克隆人表达载体ｐＲＳＥＴ－Ｃ，并在大肠杆菌ＤＥ３菌株进行表达。     

Sm─FeCo─N合金薄膜的磁性与微观结构

采用离子注入方法制备Ｓｍ－ＦｅＭ－Ｎ磁性合金薄膜，研究少量Ｃｏ部分取代Ｆｅ对薄膜磁性能的影响，探索研究Ｓｍ－ＦｅＭ－Ｎ磁性材料的新途径．实验发现：Ｃｏ＋注入使样品的饱和磁化强度明显增加，Ｓｍ－ＦｅＣｏ－Ｎ薄膜的饱和磁化强度是Ｓｍ－Ｆｅ－Ｎ薄膜的１．６倍．经ＴＥＭ分析，Ｃｏ＋没有与Ｓｍ或Ｆｅ形成化合物     

2F4特性瓷料中SrTiO3的改性作用

研究了２Ｆ４特性瓷料中加入少量ＳｒＴｉＯ３及ＳｒＴｉＯ３的加入方式对材料介电性能和窑业性能的影响．试验表明，在以ＢａＴｉＯ３－ＣａＳｎＯ３为主的２Ｆ４特性瓷料中加入少量的ＳｒＴｉＯ３有明显的改性作用．ＳｒＴｉＯ３的加入使瓷料居里峰展宽、负温度特性变好、介质损耗降低，耐电强度提高．ＳｒＴｉＯ３加入方式明显影响烧结性能．先将ＢａＣＯ３、Ｓｒ－ＣＯ３、ＴｉＯ２共同合成（Ｂａ１－ＸＳｒＸ）ＴｉＯ３固溶体再进行配料烧结的比用ＢａＴｉＯ３、ＳｒＴｉＯ３进行配料烧结的有较宽的烧成范围和较好的耐潮性．