高盆樱桃的组培快繁研究

【目的】通过对高盆樱桃外植体灭菌方法的筛选和培养条件的优化,解决高盆樱桃在快速繁殖中存在的丛生芽诱导率低、增殖率低、生根难等问题,为建立高盆樱桃组培快繁体系奠定基础。【方法】以高盆樱桃带芽茎段为外植体,探讨了外植体的灭菌方法、基本培养基类型(MS、1/2 MS和1/4 MS)以及不同外源激素(6-BA、NAA和IBA)对丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根等过程的影响。【结果】高盆樱桃茎段在75%乙醇灭菌20 s,0.1%升汞灭菌300 s时,污染率最低。在MS培养基中添加1.2 mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA时,丛生芽诱导率最高(82.22%)。在MS培养基中同时添加0.8 mg/L 6-BA、0.06 mg/L IBA、0.08 mg/L NAA时丛生芽增殖效果最好,增殖率为7.32。1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)培养基有利于生根,生根率达92.22%。【结论】高盆樱桃带芽茎段适宜的灭菌方法为75%酒精处理20 s后,再以0.1%升汞处理300 s; 丛生芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA(1.2 mg/L)+IBA(0.1 mg/L); 丛生芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA(0.8 mg/L)+IBA(0.06 mg/L)+NAA(0.08 mg/L); 适宜高盆樱桃生根的培养基为1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)。以体积比为1(河沙):1(腐殖质):2(蛭石)的混合基质为移栽基质时,试管苗移栽成活率可达72.2%。该试验结果可为高盆樱桃的规模化生产提供一定的理论基础和技术支撑。     

簸箕柳组培再生体系的建立

【目的】建立簸箕柳组培再生体系,为在簸箕柳中开展功能基因组研究奠定基础。【方法】分别以簸箕柳带腋芽茎段和种子为外植体,比较不同消毒方法、基本培养基类型、光照条件及植物生长调节剂等因素对不同外植体脱分化和再分化能力的影响。【结果】簸箕柳组培基本培养基成分以MS+蔗糖(30 g/L)+Phytagel(植物凝胶)(4.4 g/L)为宜。以幼嫩茎段为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理30 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理10 min,适宜诱导腋芽的生长调节剂组合为6-BA(1 mg/L)+NAA(0.01 mg/L),丛生芽继代增殖的适宜生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.05 mg/L),适宜腋芽生根的生长调节剂组合为IBA(0.2 mg/L)+NAA(0.03 mg/L)。以种子为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理10 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理2 min,光照条件下诱导愈伤组织的生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+ NAA(0.3 mg/L),并利用6-BA(0.5 mg/L)+ NAA(0.5 mg/L)和6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.8 mg/L)两种组合方式交替使用进行愈伤组织的继代培养; 愈伤组织分化成芽的生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+ TDZ(0.2 mg/L),生根培养基只需添加NAA(0.01 mg/L)。【结论】以茎段和种子作为外植体,通过不同的再生途径,均可以建立簸箕柳组织培养再生体系。     

金叶复叶槭水培嫩枝组织培养体系研究

【目的】筛选基本培养基、增殖和生根培养基最佳激素组合,探索炼苗移栽方法,建立金叶复叶槭组织培养体系,为该树种优良种苗规模化生产提供新途径。【方法】以金叶复叶槭水培嫩枝为试材,通过单因子逐步筛选法,研究MS、WPM、B₅培养基对初代培养,6-BA、TDZ和NAA对增殖培养,IBA和NAA对生根培养,以及相对湿度对移栽成活的影响。【结果】MS和WPM诱导外植体腋芽萌发率显著高于B₅培养基,但MS培养基在促进新芽伸长生长方面优于WPM。6-BA、NAA与低浓度的TDZ联合使用可有效地提高不定芽增殖系数,在MS附加0.5 mg/L 6-BA、0.01 mg/L TDZ、0.06 mg/L NAA的增殖培养基中,每个外植体可增殖5.8个新芽。添加生长素可显著提高增殖芽生根率,添加IBA生根效果显著好于NAA,1/2 MS附加0.05 mg/L IBA即可使生根率达100%。85%的相对湿度条件下组培苗移栽成活率可达95%。【结论】适宜金叶复叶槭水培嫩枝组培快繁的基本培养基为MS培养基,最佳增殖培养基为MS + 0.5 mg/L 6-BA + 0.01 mg/L TDZ + 0.06 mg/L NAA;最佳生根培养基为1/2 MS + 0.05 mg/L IBA;金叶复叶槭组培苗对移栽基质要求不高,保湿是关键。     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

栀子腋芽丛生离体繁殖及开花诱导

以栀子(Gardenia jasminoides Ellis)茎尖和腋芽为外植体进行腋芽丛生离体繁殖以及开花诱导的研究.结果表明:在培养基MS 6-BA 1.0 mg/L IBA 0.2 mg/L中,腋芽丛生效果最好,平均每个外植体可得到8～10个丛生芽,每个茎尖可得到15～20个丛生芽;在培养基MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L GA3 1.0 mg/L 中,有花蕾的形成,且最终能够开花并形成果实;生根培养基为:1/2 MS IBA 0.5 mg/L GA3 0.5 mg/L,生根率可达98 %,生根培养4周后移栽,移栽成活率达95%.     

三尖杉试管苗生根诱导的初步研究

以三尖杉茎段诱导的腋芽苗为外植体进行生根诱导研究.结果表明,改良WH附加一定浓度的IBA能诱导三尖杉试管苗生根,NAA单独处理时未能诱导三尖杉不定根的发生;IBA、NAA共同使用时生根诱导效果比IBA单独使用时好,其中以改良WH IBA3.0mg/L NAA1.0mg/L培养基组合生根诱导效果较好,生根率为60.7%.     

黑美人葡萄组培育苗技术研究

通过对黑美人葡萄组培外植体选择、灭菌、启动分化、初代、继代、生根培养基进行对比筛选研究,以期建立黑美人的再生体系。结果表明:1/2MS培养基附加6-BA1.0mg/L+IAA0.1mg/L、6-BA0.05mg/L+IAA1.0mg/L、IBA1.0mg/L+活性炭0.2mg/L对茎段腋芽萌发、继代繁殖、生根培养的效果较好;继代繁殖周期在25d较为适宜;河沙:腐殖质=1:1的基质,移栽成活率达92%。     

落叶型冬青雌、雄株茎段的组织培养技术

【目的】建立落叶型冬青(Ilex verticillata L.)雌雄株的组织培养快繁体系。【方法】以落叶型冬青优良雌株和雄株的幼嫩茎段为材料, 通过添加不同浓度的6-BA、IBA、NAA、氯吡苯脲(CPPU)等植物生长调节剂,对外植体消毒时间、诱导培养基、增殖及生根培养基进行了优化。【结果】落叶型冬青雌株、雄株茎段外植体腋芽诱导最好的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,诱导率分别为93.3%和83.3%; 雌株和雄株丛芽增殖效果最好的培养基分别是MS+1.0 mg/L CPPU+0.2 mg/L NAA和MS+1.0 mg/L CPPU+0.1 mg/L NAA,增殖系数分别达3.48和1.25; 落叶型冬青在1/2 MS+0.4 mg/L NAA培养基上雌、雄株的生根率分别为26.7%和20.0%; 添加一种促根剂后,雌、雄株的生根率可达66.7%和46.7%。【结论】该组织培养体系特别是雄株组培体系的建立可为落叶型冬青苗木的快速繁殖提供技术支持。     

蓝桉超级苗组培快繁技术体系研究

以蓝桉超级苗茎段为外植体,分别采用正交试验、单因素试验和两因素全因子试验逐一探讨蓝桉外植体消毒、外植体采集时期、腋芽诱导、不定芽增殖和生根培养等组培快繁主要环节中各自的最佳处理,构建蓝桉超级苗组织培养的技术体系.结果表明:外植体联合消毒的最佳处理为75%酒精消毒20 s,3%洁尔灭消毒1 min和0.05%升汞消毒6.5 min;外植体适宜采集时期为10月份,污染率和褐变率均最低,且存活率和萌芽率均最高;腋芽诱导的最佳体系为改良的MS培养基、0.5 mg/L的KT、0.4 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA,可极显著提高腋芽萌发率且诱导效果稳定;不定芽增殖的最佳处理为改良的1/2 MS培养基、0.3 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA,可极显著提高增殖系数,使20 d的增殖系数达2.75;生根培养的最佳处理为改良的1/2 MS培养基、0.2 mg/L的NAA,0.5 mg/L的IBA和0.8 mg/L的ABT,可极显著提高生根率和单株生根数量且结果稳定,使生根率达64.38%,单株生根数量达2.70.     

濒危药材红芽大戟组培快繁影响因素研究

【目的】研究濒危药材红芽大戟(Knoxia corym bosa Willd)最适宜的组培快繁方法,为规模化生产红芽大戟提供依据。【方法】选取红芽大戟不同组织器官为外植体,采用不同配方的培养基培养,研究影响外植体诱导分化、增殖和生根的因素,筛选获得最佳培养基。【结果】外植体采用茎尖优于叶轴、叶片,茎尖接种于MS+1.5mg/L 6-BA+0.15mg/L NAA,萌芽率为100%,MS+3.0mg/L 6-BA+0.30mg/L NAA最适用于继代增殖培养,1/2MS+2.0mg/L IBA+0.2mg/L NAA最合适生根培养。【结论】选取合适的外植体,采用适宜的培养条件和培养基,可以有效地进行红芽大戟的组培快繁。     

‘南大’蓝莓试管苗快速繁殖体系的建立

以蓝莓南高丛品种‘南大’为外植体,对外植体消毒方法、腋芽诱导、腋芽增殖、试管苗生根等方面确定了其快速繁殖的最佳条件.结果表明:蓝莓‘南大’茎段的最佳消毒方式为75%酒精消毒120 s+0.1%HgCl₂消毒10 min.茎段腋芽诱导最佳培养基为WPM+ZT 1.0 mg·L^-1,腋芽增殖的最佳培养基为WPM+ZT 2.0 mg·L^-1,培养60 d后增殖倍数可达6.0生根的最佳培养基为WPM+IBA 1.0 mg·L^-1 +活性炭0.5 g·L^-1,培养30 d后生根率达到73%.     

银边红雀珊瑚(Pedilanthus tithymaloides(L) Poir.var.cuculatus Hort.)快速繁殖研究

顶芽或腋芽在添加６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）３ｐｐｍ和萘乙酸（ＮＡＡ）０．５ｐｐｍ的ＭＳ培养基培养３０ｄ，长４－６ｃｍ，腋芽３－７个。此时，将它们分切成单芽切段，围到添加６－ＢＡ２ｐｐｍ的ＭＳ培养基，继代培养周期２１ｄ，繁殖系数５－８。芽长２－３ｃｍ时用添加吲哚丁酸（ＩＢＡ）１ｐｐｍ的ＭＳ培养基进行生根培养，培养２１ｄ，生根率８７％，移载成活率９３％。     

牛樟的组织培养和植株再生

以牛樟侧枝茎段为外植体,建立了牛樟高效离体再生体系,研究取材季节、消毒方式、不同激素配比等因素对茎段再生的影响。结果表明:牛樟外植体采集最佳季节为春夏两季,此时采集的外植体其污染率与褐化率均较低,且出芽快、出芽率高。依次用1 000倍甲基托布津处理10 min、75%酒精消毒30 s和0.1% HgCl₂消毒8～10 min的消毒方式能明显降低牛樟外植体的污染率,且对外植体伤害较小。MS培养基为牛樟生长最适基本培养基,牛樟外植体诱导的最佳培养基为MS + 6-BA(1.0 mg/L)+ IBA(0.1 mg/L),芽诱导率高且芽体粗壮; 丛芽增殖的最佳培养基为MS + 6-BA(1.5 mg/L)+ IBA(0.1 mg/L),丛芽增殖率高且芽体健壮; 生根培养的最佳培养基为1/2MS + ABT(0.2 mg/L)+ IBA(0.05 mg/L)+ 活性炭(0.5 g/L),30 d后生根率可达100%且根系状态较好。     

杜鹃‘胭脂蜜’组织培养与快速繁殖体系

以杜鹃‘胭脂蜜’(Rhododendron obtusum‘Yanzhimi’)的新生茎段为外植体,以WPM为基本培养基,研究不同生长调节物质对杜鹃组织培养过程中芽诱导、增殖壮苗及生根的影响.结果表明,启动培养中诱导腋芽的最佳培养基为WPM+0.1 mg·L^-1 IBA+1 mg·L^-1 ZT,腋芽平均诱导率为43.67%,增殖系数为1.18;采用NAA+TDZ与NAA+ZT的组合分别进行增殖壮苗培养,两种在生长及诱导情况上均呈现不同状态.在添加0.5 mg·L^-1 NAA和0.1 mg·L^-1 IBA的1/2WPM基本培养基上,杜鹃的生根效果最佳,生根率达82.5%.该研究为杜鹃优质种苗的繁殖与生产,杜鹃遗传转化体系的建立以及转基因育种奠定了一定基础.     

龙柚离体培养快速无性繁殖技术研究

龙柚的茎尖和幼嫩的茎段离体培养快速繁殖试验研究结果：外植体用75％的乙醇浸泡0.5min后再用0．1％的HgCl2溶液浸泡10min灭菌效果最好；不同外植体的培养结果是茎段（带腋芽的）的繁殖系数大于茎尖，差异达到显著水平；培养基以MS添加6-BA0．5mg／L和IBA0．2mg／L对不定芽诱导效果最好，增殖比例达到4．2，与其它处理差异达到极显著；无根苗转入1／2 MS附加IBA1．0mg／L的培养基中不定根诱导率为78．3％．添加活性炭对培养材料生根诱导有促进效果．     

麻疯树根高效再生体系的建立及不定芽起源研究

为了克服现有麻疯树快繁技术的不足,分别以麻疯树胚根和子叶外植体诱导的不定根为外植体诱导不定芽.麻疯树子叶不定根诱导的最佳培养方式为:MS+5 mg/L IBA上培养4天,然后转至MS0培养基上生根.诱导生根率和生根数分别达到93.33%和6.54个/外植体.子叶不定根诱导不定芽的最佳培养基是MS+3.0 mg/L 6-BA+3 mg/L IAA,诱导率达到83.33%.麻疯树胚根的最佳不定芽诱导培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA,分化率达67.80%,平均出芽数为3.25个/外植体.对麻疯树胚根再生的各阶段进行了石蜡切片观察,明确了不定芽起源于根的薄壁细胞层.与现有技术相比,本方法具有周期短、再生效率高的特点.