暹罗鳄多肽粉的生物效应研究

在获得暹罗鳄(Crocodylus siamensis)多肽粉的基础上,进一步研究了暹罗鳄多肽粉对羟基自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)和1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH)的清除作用以及总还原力,以揭示其抗氧化能力.同时研究了暹罗鳄多肽粉对酪氨酸酶活性抑制作用.结果显示,暹罗鳄多肽粉具有较强的抗氧化、清除自由基作用,其总还原力与暹罗鳄多肽粉含量呈正相关,对.OH、O2-.和DPPH的半清除浓度HSC50分别为1.2,2.1和6.5mg/mL.暹罗鳄多肽粉对酪氨酸酶活力有明显的抑制作用,其IC50为6.60mg/mL.结果表明,暹罗鳄多肽粉具有一定的生物学功效,是一种天然的保健品.     

暹罗鳄多肽粉对小鼠机体免疫力及抗疲劳效应的增强作用

为研究暹罗鳄(Crocodylus siamensis)多肽粉对小鼠免疫力及抗疲劳效应的影响,对小鼠的免疫力及相关血清指标、运动能力及相关酶活力指标进行了测定.实验结果显示:暹罗鳄多肽粉可以促进小鼠胸腺和脾脏的生长,增强机体免疫力.相对于对照组小鼠,暹罗鳄多肽粉组小鼠血清中的白蛋白、总蛋白、血钙含量升高(p0.05),谷丙转氨酶活力和血糖浓度下降(p0.05).小鼠爬杆及负重游泳实验发现服用了暹罗鳄多肽粉的小鼠垂直爬杆时间和负重游泳时间均长于对照组(p0.05).进一步通过建立小鼠力竭游泳模型研究了暹罗鳄多肽粉的抗疲劳功效,结果显示与对照组相比,暹罗鳄多肽粉组小鼠血液中尿素氮和乳酸的含量以及乳酸脱氢酶活力均降低(p0.05),而超氧化物歧化酶活力升高(p0.05).综上结果表明暹罗鳄多肽粉可能有保肝降糖、增强机体免疫力及抗疲劳效应的作用.     

酶解牛肉多肽粉的营养评价

牛肉经酶解后喷雾干燥,得到酶解牛肉多肽粉,对其进行营养成分分析结果显示:其蛋白质含量87.5%,总脂肪含4.54%,氨基酸种类齐全,构成比例符合WHO/FAO标准,其人体需要量最大的赖氨酸和亮氨酸含量高,对人体有益元素含量由高到低分别为Mg、Ca、Zn、Fe、Cu.富含维生素E、B1、B2.酶解牛肉多肽粉是一种高蛋白、低脂肪的功能性保健品,具有很高的开发潜力.     

文蛤多肽粉的成分分析

以文蛤肉为原料,采用复合胰蛋白酶酶解,通过喷雾干燥工艺得到文蛤多肽粉.根据检验标准GB1519.3-2003食品急性毒性试验中最大耐受剂量法,对清洁级KM小鼠无毒害作用,作用后小鼠均健康无异常反应,解剖无明显病变,其LD50>15 g/kg体质量.对文蛤多肽粉组成成分进行分析,测定了其总氮、蛋白质、氨基酸、总糖、还原糖、脂肪、灰分及Na、K、Ca、Mg、Fe、Cu、Zn、Cd、Ag、Pb等金属元素的含量.应用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱法(MALDI-TOF)分析了文蛤多肽粉分子量的分布范围.结果表明,该文蛤多肽粉中蛋白质、氨基酸和对人体有益的金属元素含量丰富,对人体有害的重金属含量都大大低于国家食品检验标准的安全剂量,氨基酸种类齐全;多肽分子量均小于5 200 u,其中分子量小于1 000 u的多肽占总多肽含量的69.03%.     

暹罗鳄胆汁提取物对人胆管癌MZ-ChA-1细胞的抑制作用

以暹罗鳄(Crocodylus siamensis)胆汁为材料,应用细胞培养、细胞计数、Hoechst33258染色、流式细胞仪等技术研究暹罗鳄胆汁提取物对人胆管癌MZ-ChA-1细胞凋亡的诱导作用.实验结果显示,胆汁提取物可明显诱导人胆管癌MZ-ChA-1细胞的凋亡,经1.75 mg/mL暹罗鳄胆汁提取物诱导处理24 h后,人胆管癌MZ-ChA-1细胞的增殖活动受到显著的抑制,细胞生长抑制率达86.71%;光镜观察结果显示,暹罗鳄胆汁提取物处理细胞后,细胞体积缩小,细胞核固缩;细胞核经Hoechst33258染色出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光;细胞周期检测出现G0/G1期细胞比例升高,S和G2/M期细胞比例下降.研究结果表明,暹罗鳄胆汁提取物对人胆管癌MZ-ChA-1细胞凋亡的诱导具有显著作用,从而为进一步研究细胞凋亡机制提供重要基础和研究依据.     

海地瓜多糖和多肽提取纯化工艺及抗氧化活性

以低值海地瓜(Acaudina molpadioides)体壁干品为实验原料,优化酶解超滤工艺条件,联合制备出不同分子质量段的海地瓜多糖和多肽,优化确定柱层析法分离纯化海地瓜多糖的工艺参数,对比探究不同分子质量段海地瓜多糖和多肽的体外抗氧化活性。结果表明:先用胰蛋白酶在料液比(m/V)1∶40、加酶量2.4%(质量分数)、p H值7.5、45℃下酶解8 h,然后超滤分离得到分子质量小于10 ku的海地瓜多肽,提取率达到(29.602±1.012)%;再用中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合使用对超滤截留液和一次酶解沉淀进行二次酶解提取多糖,先加入质量分数7%的中性蛋白酶,45℃下酶解4 h;再加入质量分数8%的木瓜蛋白酶,60℃下酶解4 h,p H值均为7.0,粗多糖提取率达到(14.511±0.162)%。确定最佳超滤条件为:操作压力0.20 MPa,料液质量分数6%,操作温度35℃。得到海地瓜多肽P_1(5~10 ku,48.47%)、P_2(1~5 ku,18.46%)和P_3(1 ku,33.07%);得到海地瓜粗多糖G_1(10 ku,63.09%)、G_2(10~100 ku,7.24%)、G_3(100~200 ku,4.67%)和G_4(200 ku,25.00%)。采用Q-Sepharose-Fast-Flow阴离子交换柱层析法对G_4进行纯化,在0,0.5,1.5 mol/L洗脱盐浓度下,得到3个纯化多糖组分G_(4-1)、G_(4-2)和G_(4-3)。体外抗氧化活性检测结果显示,不同分子质量段海地瓜多肽对·OH的清除能力强弱顺序为:P_3P_2P_1,对DPPH·和O_2~-·的清除能力强弱顺序均为:P_2P_3P_1。不同海地瓜粗多糖对·OH、DPPH·和O_2~-·的清除能力强弱顺序依次为:G_4G_1G_3G_2,G_4G_3G_1G_2,G_1G_4G_2G_3;纯化多糖对·OH的清除能力强弱顺序为:G_(4-1)G_(4-2)G_(4-3),对DPPH·和O_2~-·的清除能力强弱顺序均为:G_(4-2)G_(4-1)G_(4-3)。     

响应面法优化胃蛋白酶制备蛋清多肽的研究

以蛋清粉为原料,以酶解液的抗氧化能力为指标,优化了胃蛋白酶酶解蛋清粉的工艺条件。单因素实验结果表明,酶解温度50℃、酶解pH值2.5和质量分数5%的蛋清粉,经酶解后可以获得较佳的抗氧化能力;响应面实验结果表明,在pH值2.1、蛋清粉质量分数3.5%、反应温度49℃时,酶解液产生的多肽具有最优的抗氧化活性。研究结果为进一步开发蛋清多肽打下了一定的基础。     

灰星鲨鱼皮抗氧化多肽的制备及其性能分析

灰星鲨(Mustelus griseus)鱼皮中含有丰富的胶原蛋白,以灰星鲨鱼皮为原料,抗氧化能力为筛选指标,研究了木瓜蛋白酶水解鲨鱼皮的最佳工艺条件.结果表明制备鲨鱼皮抗氧化多肽的最佳水解条件为:温度55℃、pH 4.0、加酶量4%(质量分数)、酶解时间2h.对获得的鲨鱼皮抗氧化多肽进行理化性质分析,结果显示:其紫外最大吸收峰在230和280nm处,符合多肽的特征;其具有良好的吸湿性和保湿性,在湿度为43%的条件下,吸湿率和保湿率分别为(50.76±0.71)%和(85.41±1.33)%;多肽对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和2,2′-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)自由基的半抑制质量浓度(IC_(50))分别为0.55和0.28mg/mL.利用体外蘑菇酪氨酸酶模型初步探究多肽对酶活力的抑制作用,测得其IC_(50)为0.4mg/mL;对其生物活性进行分析发现该多肽对小鼠黑色素瘤细胞B16F10的黑色素形成也具有明显的抑制作用.上述结果可为今后鲨鱼皮多肽在化妆品中的应用提供理论和实践参考.     

罗非鱼鱼鳞胶原多肽的优化制备及其生物活性研究

以罗非鱼鱼鳞为原料,采用碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合水解,在单因素试验的基础上,采用响应面法优化酶解工艺,制备鱼鳞胶原多肽.测定胶原多肽的抗氧化活性、细菌低温保护活性、氨基酸组成及相对分子质量分布.结果显示,最适酶解条件为:底物质量浓度30.6 mg·m L-1、胰蛋白酶和碱性蛋白的加酶量分别为1.44和0.70 mg·m L-1、酶解温度50℃、pH值8.5、酶解时间6.35 h.酶解胶原多肽对DPPH自由基和羟基自由基的半数清除质量浓度(IC50)分别为2.89和3.54 mg·m L-1.经过细菌低温保护试验,当胶原多肽质量浓度为1 mg·m L-1时,嗜热链球菌的存活率达到75.6%.鱼鳞胶原肽相对分子质量分布显示,78%多肽片段的相对分子质量分布于180~2 000 u之间.氨基酸组成分析显示鱼鳞多肽富含甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸及天冬氨酸等,这些特定的氨基酸与胶原多肽的抗氧化活性、细菌低温保护活性相关.     

海参内脏酶解制备海参肽工艺

以蛋白水解度和酶解液中海参肽相对分子质量的分布作为指标,考察不同蛋白酶的酶解效果,筛选水解海参内脏的最适合蛋白酶,并通过单因素实验和正交实验优化酶解工艺.实验结果表明:胰蛋白酶的水解效果最佳,可用于水解海参内脏制备海参肽;在底物质量分数为1.0%,加酶量为0.375 1 mkat·g^-1,pH值为8.0,酶解温度为37 ℃,水解时间为5 h的最优酶解条件下,海参内脏的水解度可达到48.90%,酶解液中的多肽(2 000~5 000 u)质量分数为52.68%,寡肽(含氨基酸)(≤2 000 u)质量分数为47.25%.     

四种植物蛋白的成分与营养学特性分析

分析了4种植物蛋白的氨基酸组成特征和营养学特性。玉米蛋白粉、大豆粉、棉籽蛋白粉、花生饼粉蛋白质质量分数分别为61.60%,38.18%,51.49%,43.15%。大豆粉氨基酸组成比较均衡;棉籽蛋白粉、花生饼粉中多种必需氨基酸组成与大豆蛋白接近,但蛋氨酸含量较低;玉米蛋白粉富含亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸等支链氨基酸,但其中赖氨酸、色氨酸含量明显低于其他3种植物蛋白。建议根据蛋白资源的氨基酸特色组成,合理搭配互补,以提高谷物蛋白质营养价值。     

鸭的羽毛组成成分比较分析

用氨基酸分析仪测定北京鸭、金定鸭及其杂种大土北鸭羽毛的氨基酸组成,发现不同种的鸭毛所含的氨基酸种类相同,但相应的各种氨基酸的含量却有差别。大土北鸭羽毛的异亮氨酸、甲硫氨酸和脯氨酸的含量接近于北京鸭;半胱氨酸、谷氨酸(包括谷氨酰胺)、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸的含量接近于金定鸭;天冬氨酸(包括天冬酰胺)的含量略低于两亲本;赖氨酸的含量显著低于两亲本;丙氨酸、精氨酸、组氨酸、苏氨酸和缬氨酸的含量高于两亲本;丝氨酸的含量则与两亲本相近。经光谱分析表明,三种鸭毛所含金属元素的种类亦相同,且铜含量相差无几;北京鸭羽毛的锌、铁含量明显高于金定鸭;大土北鸭羽毛的锌含量接近于金定鸭,而铁含量则接近于北京鸭。     

猪血蛋白源利用初探

1.采用动物酶一次性水解猪全血与干血粉获得含17种氨基酸的水解物,蛋白质含量达83.33%。对该水解物进行了氨氮、总氮、蛋白质含量、氨基酸组成的一系列分析。以水解物连续饲养小白鼠30天,未见毒性,分析饲喂30天后的小白鼠血浆蛋白及 SH 含量,发现血清蛋白含量增长,SH 含量未见变化.30天后肝组织重量及指数不变,解剖观察小白鼠也未见病变.进一步说明水解物无毒性,唯免疫器官脾脏增大21%,最后以1%浓度水解物添加普通酱油,结果提高氨氮32.43%.2.对比研究了硫酸水解猪血粉提制复合氨基酸工艺,又研究了猪血蛋白质水解液用石灰乳脱酸制备复合 L—氨基酸的方法。     

食用蓝藻螺旋藻和葛仙米中金属元素的分析

采用硝酸和高氯酸(4∶1)混合酸消化2种可食用蓝藻螺旋藻和葛仙米,原子吸收光谱法检测螺旋藻和葛仙米中的K、Na、Mg、Ca、Zn、Fe、Cu、Mn、Cr、Pb和Cd共11种金属元素含量。结果表明,2种蓝藻中矿质元素含量均较高,特别是Ca含量高达61 905.132mg·kg~(-1);而有害重金属Cr,Po和Cd含量均远低于国家规定标准,表明这2种食用蓝藻均无重金属富集或污染。本结果显示,螺旋藻和葛仙米是极好的天然富钙营养食品,可作为人体矿质元素和微量元素缺乏症的补给品.     

中药“催情促孕散”营养成分的分析

利用日立Ｚ－８０００型原子吸收分光光度计测定了复方“催情促孕散”和其中７味中药Ｋ、Ｎａ、Ｃａ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｃｏ含量，利用７２２型分光光度计测定了Ｐ含量，利用日立８３５－５０型氨基酸自动分析仪测定了各样品中的１７种氨基酸，采用国标法测定了各样品的粗蛋白、粗纤维、粗脂肪、粗灰分。     

驼奶中氨基酸和人体必需微量金属元素的测定

对驼奶中氨基酸和人体必需微量金属元素进行了测定,并同牛奶做了比较．计算结果表明：驼奶含氨基酸总量为牛奶的１．０７倍;人体必需氨基酸总量为牛奶的１．０８倍;人体必需微量金属元素含量多数高于牛奶．     

奶粉和豆粉混合食物中蛋白质计算分离测定──偏最小二乘－高效液相色谱法

应用高效液相色谱与偏最小二乘法相结合研究了奶粉和豆粉混合食物中蛋白质同时分离测定的方法。在酸性介质中蛋白质水解为氨基酸，用衍生试剂衍生水解产物，并且用高效液相色谱分离及定量氨基酸。各种蛋白质水解的１７种主要氨基酸的比例不同，用偏最小二乘法（ＰＬＳ）预测混合食物中奶粉和豆粉蛋白质的含量。另外还讨论了偏最小二乘法中各参数的取值对未知样品预报结果准确度的影响。将该法用于模拟混合食物中奶粉和豆粉的分离预测相对误差为６．６５％和２．５８％，标准偏差为２．４％和４．７％。     

肉茴复合散对肉仔鸭肌肉营养成分的影响

采用肉桂、小茴香、良姜、花椒、六曲等中草药组成肉茴复合散,对肉仔鸭进行饲喂试验.结果表明：肉仔鸭肌肉中水分和脂肪含量无显著性差异（P〉0.05）;肌肉中的蛋白质和肌苷酸的含量,试Ⅱ组、试Ⅲ组、试Ⅳ组极显著高于对照组和试Ⅰ组（P〈0.01）;肌肉中胆固醇的含量显著降低（P〈0.05）;并提高了不饱和脂肪酸的含量和降低了饱和脂肪酸的含量（P〈0.05）;同时,除个别氨基酸外,能显著提高肉仔鸭的肌肉中氨基酸尤其是必需氨基酸和鲜味氨基酸的含量（P〈0.05）或（P〈0.01）.有效地改善了肉仔鸭的肌肉品质.肉茴复合散在肉仔鸭日粮中的添加量宜以1%为最佳.