猪垂体Poly（A）~＋RNA的制备及其体外翻译

本文用ＬｉＣｌ沉淀法提取了猪垂体总ＲＮＡ，经。ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ柱亲和层析，分离纯化了猪垂体Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ．用自制的兔网织红细胞体外翻译体系鉴定，表明该Ｐｏｌｙ／（Ａ）＋ＲＮＡ具有较高的翻译活性．ＳＤＳ－ＰＡＯＥ，放射自显影分析翻译产物提示，在制各的猪垂体Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中，编码猪生长激素前体的ｍＲＮＡ占有较高的比例．     

ClSnoRNA,水稻中的一种新的核仁小分子RNA

通过计算机分析国际分子生物学数据库和ｃＤＮＡ序列分析等方法，在水稻中发现一种新的核仁小分子ＲＮＡ：ＣｌＳｎｏＲＮＡ。该ＲＮＡ具有ｂｏｘＣ，ｂｏｘＤ和末端碱基配对区等典型的核仁小分子ＲＮＡ结构特征；并有１４个核苷酸与水稻１８ｓｒＲＮＡ中一段保守序列互补。     

有效制备核糖核酸的方法研究

核糖核酸的制备和分析受多种因素的影响．因此，在特定条件下制备高纯度和完整性好的ＲＮＡ的方法研究至关重要．本文以大白鼠肝为材料，研究ＲＮＡ的制备方法，建立了有效的ＲＮＡ制备方法．用紫外分光光度计和变性电泳分析所制备的ＲＮＡ，发现其纯度Ａ２６０Ａ２８０＝１．７～２．０，２８ＳｒＲＮＡ与１８ＳｒＲＮＡ的带宽比为２１．本方法具有节约节时，重复性好，产量较高，无ＤＮＡ污染等优点．这为ｃＤＮＡ合成，基因表达和调控等研究奠定了基础．     

一种适用于盐生植物的RNA提取方法

介绍了一种红树ＲＮＡ提取方法，此法无需特殊试剂和贵重仪器设备，可有效地排除红树细胞中大量存在的胶质和多糖类物质的干扰，所得ＲＮＡ样品经紫外分光光度计检测和１％琼脂糖凝胶电泳分析证明具有较高的纯度和完整性，可满足多数分子生物学实验的需要，尤其适用于提取多糖含量较高的植物细胞的ＲＮＡ．     

水分胁迫下不同抗旱性小麦品种核酸代谢的差异

抗旱和不抗旱小麦品种在渗透势为－０．０２５ＭＰａ和－０．０５ＭＰａ ＰＥＧ溶液中根际胁迫３天和５天，叶片的ＤＮＡ、ＲＮＡ含量均呈下降趋势，但抗旱品种７３－１１下降幅度比敏感品种晋２１４８小。ＲＮＡ电泳结果表明：２３ｓＲＮＡ、１８ｓＲＮＡ、１６ｓＲＮＡ以及小分子量ＲＮＡ的含量均下降，２个品种的下降差异不明显，但在峰形上有区别。ＤＮＡ电泳结果表明，ＤＮＡ各组分含量在水分胁迫下也表现为下降趋势，且２个品     

杂交捕获抑制聚腺苷二磷酸核糖聚合酶基因的体外翻译

体外转录载体ｐＳＰ７２—Ｃ１２和ｐＳＰ７２—Ｃ１．４分别经ＸｂａⅠ和ＸｈｏⅠ酶切线性化后，用ＳＰ６ＲＮＡ聚合酶与Ｔ７ＲＮＡ聚合酶进行体外转录得到编码人聚腺苷二磷酸核糖聚合酶基因的ｍＲＮＡ全序列（３．７ｋｂ）及与其５’端编码区的起始密码子ＡＵＧ上游区域互补的反义ＲＮＡ片段（１．４ｋｂ）。等摩尔数的正、反义ＲＮＡ通过酚相乳浊杂交技术进行分子杂交。在网织红细胞裂解物体外翻译系统中，正义ＲＮＡ能正常地翻译出蛋白质；而反义ＲＮＡ与正义ＲＮＡ杂交可阻断翻译的进行。     

免疫沉淀法分离纯化感染细胞保的甲肝病毒RNA

本研究采用抗血清（多抗血清）沉淀甲肝病毒，并用盐酸胍－酸性酚，氯仿一生法分离纯化病毒ＲＮＡ。此方法能排除非病毒ＲＮＡ的污染，操作简单，要求条件较低，ＲＮＡ的纯度和完整性都较好。     

电镜原位杂交对淡水三角头涡虫中期染色体RNA的研究

本文用ＲＮａｓｅ－ｇｏｌｄ标记法定位了淡水三角头涡虫中期染色体内ＲＮＡ，发现ＲＮＡ在染色单体切面内部及边缘均有分布。此外，以玉米１８ｓｒＲＮＡ的ｃＤＮＡ和水稻５ｓｒＲＮＡ的ＤＮＡ为探针，经电镜原位杂交后观察了涡虫１８ｓｒＲＮＡ（也包括４５ｓｐｒｅ－ｒＲＮＡ）及５ｓｒＲＮＡ在中期染色单体切面上的分布特点，证明涡虫染色单体边缘及内部ＲＮＡ的两个来源是核仁核糖体ＲＮＡ和核基质内的５ｓｒＲＮＡ。     

简便分离鉴定酵母细胞总RNA的方法

针对酵母具有细胞壁的特点,建立了一种简便,快速,有效分离鉴定酵母细胞总ＲＮＡ的方法,并对三种便于提取酵母细胞总ＲＮＡ的方法进行分析,所得取的总ＲＮＡ质量高,可用于进行分离ｍＲＮＡ,ＰＣＲ扩增以及ｄｏｔ或Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交。     

双链RNA技术在果树病毒研究中的应用

含ＲＮＡ基因组的植物病毒在复制时会产生双链ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）。本文介绍了用ＣＦ－１１纤维素粉提取ｄｓＲＮＡ的步骤,并列举了ｄｓＲＮＡ在果树病毒研究中的应用,其主要应用有：１）果树病毒病及病原鉴定;２）病毒分化株系的鉴定;３）以ｄｓＲＮＡ为中介对病毒核酸序列进行测定;４）探针制备和ｃＤＮＡ克隆的获得;５）用于检测病毒卫星ＲＮＡ和亚基因组ＲＮＡ;６）侵染性测定和制备抗血清等方面的研究。     

Selection in vitro of an RNA enzyme that specifically cleaves single-stranded DNA.

The discovery of RNA enzymes has, for the first time, provided a single molecule that has both genetic and catalytic properties. We have devised techniques for the mutation, selection and amplification of catalytic RNA, all of which can be performed rapidly in vitro. Here we describe how these techniques can be integrated and performed repeatedly within a single reaction vessel. This allows evolution experiments to be carried out in response to artificially imposed selection constraints. We worked with the Tetrahymena ribozyme, a self-splicing group I intron derived from the large ribosomal RNA precursor of Tetrahymena thermophila that catalyses sequence-specific phosphoester transfer reactions involving RNA substrates. It consists of 413 nucleotides, and assumes a well-defined secondary and tertiary structure responsible for its catalytic activity. We selected for variant forms of the enzyme that could best react with a DNA substrate. This led to the recovery of a mutant form of the enzyme that cleaves DNA more efficiently than the wild-type enzyme. The selected molecule represents the discovery of the first RNA enzyme known to cleave single-stranded DNA specifically.     

DNA与RNA谁是主角?

DNA与RNA相伴而生,是一对孪生分子。生命起源最早出现可能是“核酸世界”,DNA与RNA是后来分化产生的。在当今生命系统中,DNA、RNA和蛋白质起着决定的作用,成为生命系统中的三驾马车。RNA干扰的发现表明,生物基因表型的变化是受RNA控制的。RNA转录后复杂的加工过程反映了RNA的进化历程。因此,重新认识RNA已成为当前生命科学亟待解决的问题。     

RNA干扰:双链RNA引起的基因沉默机制——2006年诺贝尔生理学或医学奖成果简介

RNA干扰现象是指一种由双链RNA分子引起的基因沉默现象,在动植物中普遍存在。RNA干扰不仅在生物的抗病毒反应、抑制转座子活性以及其他许多重要生理活动的调节方面发挥至关重要的作用,而且在基因功能研究和疾病治疗方面也具有广阔的应用前景。鉴于上述原因,2名美国科学家——AndrewZ.Fire和CraigC.Mello,因发现RNA干扰现象而获得了2006年的诺贝尔生理学或医学奖。     

病毒在生物进化中的重要意义

最早的原始 RNA 是地球上的第一批生命。逆转录 RNA 所产生的 DNA 是球上第一批以DNA 为遗传信息载体的生命祖先。当今的一切生物都重现着原始 RNA 的进化方式,即以基因的重排与重组作为产生物种多样化的手段。这些都可由当代病毒学的新发现中获得证据。     

肝癌相关基因MEF2D反义RNA的鉴定及分析

鉴定和分析肝癌细胞中新的天然反义RNA MEF2D-AS根据已建立的双链RNA文库筛选与肝癌相关的反义RNA.通过RT-qPCR验证其反义RNA的存在,采用cDNA末端快速扩增技术获得其全长序列,并检测HepG2细胞经5-Aza-dC处理前后MEF2D基因正反义链表达量的变化.结果显示,成功鉴定出1条全长为1 265bp的新的天然反义RNA,并预测其属于长链非编码RNA(long non-coding RNA,简称为lncRNA),命名为MEF2D-AS.经5-Aza-dC处理后,MEF2D-AS的表达量升高,而MEF2DmRNA的表达量降低.证实了MEF2D-AS的存在并预测其属于长链非编码RNA,且与MEF2D正反义RNA是反相关关系.此研究结果可为进一步探讨肝癌发生机制提供参考.     

RNA干涉

RNA干涉是指双链RNA引发的同源mRNA的降解过程,由于其多发生于转录水平,因此又称为转录后基因沉默。RNA干涉现象是在线虫中首次发现的,通过几年的研究发现它广泛存在于生物体中(包括单细胞生物、后生动物和哺乳动物)。本文对RNA干涉现象的发现、作用机制、相关基因等作了简单的论述。     

Noncoding RNAs: Different roles in tumorigenesis

A major portion of the mammalian genome is transcribed to produce large numbers of noncoding RNAs(ncRNAs).During the past decade,the discovery of small RNAs,including the microRNAs(miRNA) and small interfering RNAs(siRNA),has led to important advances in biology.The breadth of the ncRNA field of study has substantially expanded and many recent results have revealed a range of functions that can be attributed to the miRNAs and other ncRNAs.For example,H19 RNA,HOTAIR RNA,transcribed ultraconserved regions(T-UCRs),natural antisense RNA,transfer RNA and mitochondrial noncoding RNA have been suggested to play important roles in cancers and other diseases as well as in diverse cellular processes.In this review,we focus on the current status of several classes of ncRNAs associated with cancer with the emphasis on those that are not microRNAs.