六种农药对黑斑侧褶蛙的毒理效应

稻-蛙种养是一种绿色农业的发展模式，为了筛选高效低毒农药，优化稻-蛙种养体系，为农药的合理使用与两栖动物资源保护提供基础资料，测定了6种农药对农田常见的黑斑侧褶蛙的毒理效应.结果表明：在水温(25±1)℃条件下施毒96 h后，对黑斑侧褶蛙的毒害作用由强到弱依次为阿维菌素、戊唑醇、毒死蜱、氰氟草酯、吡虫啉和噻虫嗪；以稻田常用农药吡虫啉和戊唑醇为实验试剂进行生长毒性实验后发现，黑斑侧褶蛙生长发育随着这2种农药质量浓度和作用时间的增加而减缓，表明这2种农药在黑斑侧褶蛙体内有一定的蓄积作用，短时间就可以对蛙的生长发育造成较大的影响；不同天数及不同浓度的染毒组都可以激活黑斑侧褶蛙体内的氧化应激机制，低浓度吡虫啉和戊唑醇处理后，黑斑侧褶蛙的过氧化氢酶(CAT)酶活降低、谷胱甘肽(GSH)含量下降；升高2种农药浓度，该抑制现象更为显著，机体自由基清除和抗氧化防御系统被破坏，同时丙二醛(MDA)含量显著上升，引起生物体内蛋白质和核酸等交联聚合，产生毒害作用.研究结果可为稻-蛙综合种养体系的完善提供参考依据.     

金线蛙指名亚种、金线蛙福建亚种和黑斑蛙的脑、心、肝和肾组织的乳酸脱氢酶同工酶的分析比较

本文比较了不同地区产的金线蛙指名亚种(北京产的、杭州产的)、金线蛙福建亚科和黑斑蛙的脑、心、肝、肾组织中的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的酶谱.金线蛙指名亚种和金线蛙福建亚种 LHD 同工酶迁移率较一致,但是,它们的酶谱从 LDH_1—LDH_5各组分含量的多寡有区别。因此,我们认为把它们作为两个不同亚种处理较为恰当.其次,不同地区(北京相杭州)产的金线蛙指名亚种 LDH 同工酶酶谱虽然相似,但是,北京产的金线蛙指名亚种和杭州产的金线蛙指名亚种在脑、肝组织中 LDH 同工酶的组份,还有一些差异.电泳图谱表现出黑斑蛙 LDH 同工酶 LDH_1、LDH_2、LDH_3、LDH_4与金线蛙的相比,都明显地具有较小的迁移率。     

噻嗪酮对黑斑蛙胚胎发育和蝌蚪生长的影响及血细胞DNA损伤效应

运用体视学方法和单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis,SCGE)技术,分析了不同浓度噻嗪酮溶液对黑斑蛙胚胎发育和蝌蚪生长的影响以及对黑斑蛙(Rana nigromaculata)外周血细胞DNA的损伤效应.结果表明,500 mg.L-1和2 000 mg.L-1的扑虱灵(25%噻嗪酮可湿性粉剂)溶液对黑斑蛙蝌蚪的生长发育具有一定程度的抑制作用,并能诱导黑斑蛙外周血细胞DNA出现链断裂损伤.     

黑斑蛙Sox基因的PCR扩增

以特异扩增人SRY基因HMG -box保守区的一对引物 ,扩增了黑斑蛙的Sox基因 (SRY -boxgene) .结果表明 ,雌雄黑斑蛙个体均扩增出了两条带 ,大小分别为 4 50bp和 90 0bp ,显示了Sox基因在黑斑蛙雌雄个体间无性别特异性 ,且可能含有内含子 .本文为探讨黑斑蛙的性别决定机制及Sox基因的进化提供了分子资料 .     

重金属铬对黑斑蛙胚胎和蝌蚪生长发育的影响及血细胞DNA损伤效应

运用单细胞凝胶电泳技术研究了不同浓度重铬酸钾(K2Cr2O7)溶液(2.5,12.5,62.5μmol.L-1)对黑斑蛙(Rara nigromaculata)外周血细胞DNA的链断裂损伤效应,并观察了重铬酸钾对黑斑蛙胚胎和蝌蚪生长发育的影响.结果表明,12.5和62.5μmol.L-1的重铬酸钾具有明显的DNA链断裂损伤诱导效应,染毒15 d的DNA损伤率分别为85%和98%.在测试浓度范围内,重铬酸钾对黑斑蛙胚胎发育的影响不明显;低浓度<(12.5μmol.L-1)重铬酸钾对黑斑蛙蝌蚪生长发育的影响不明显,高浓度(62.5μmol.L-1)重铬酸钾对黑斑蛙蝌蚪的生长发育则具有明显的抑制作用.     

黑斑蛙、虎纹蛙和牛蛙皮肤的比较组织学

应用H.E和V.G胶原染色法对黑斑蛙(Rana nigromaculata)、虎纹蛙(Rana rugulosa)和牛蛙(Rana catesbeiana)皮肤进行了组织学观察和参数测量与比较.结果表明:三种蛙皮肤组织结构相似,但皮肤厚度、各组织层相对厚度及腺体密度存在较明显的种间差异和部位差异.虎纹蛙的皮肤最厚(0.44-0.68mm),牛蛙其次(0.28-0.60mm),黑斑蛙最薄(0.19-0.38mm);在三种蛙中,黑斑蛙躯体多数部位表皮相对厚度为15.1%-22.6%,较虎纹蛙(10.9%-17.7%)和牛蛙(9.9%-21.8%)厚.虎纹蛙和牛蛙皮肤胶原纤维层相对厚度分别为59.9%-68.7%和51.6%-75.3%,较黑斑蛙(44.4%-69.0%)厚;黑斑蛙和虎纹蛙躯体多数部位的颗粒腺密度(4.5-23.1个/mm2;8.9-25.3个/mm2)和粘液腺(54.1-152.2个/mm2;68.6-127.5个/mm2)较牛蛙(1.4-10.8个/mm2;16.8-39.3个/mm2)高.研究结果可供蛙类皮肤的合理开发利用参考.     

两对引物PCR扩增黑斑蛙Sox基因

以人的SRY基因的HMG-box保守区设计的两对引物,对黑斑蛙Sox基因的扩增.结果如下:1)雌雄黑斑蛙均扩增出一条带,大小约为220 bp,说明Sox基因的长度在黑斑蛙雌雄个体间无性别差异;2)两对引物的扩增结果相同,表明Sox基因有高度保守性.     

道路水域对中国林蛙繁殖的影响

2011—2014年,在长白山自然保护区选取3条长10 km的道路样带,分析水体类型、水体面积、水深、距道路距离、相对潮湿度和干扰因素等6个生境因子对中国林蛙产卵量及卵损失率的影响.结果显示:3条样带共调查到479个水体,记录1 451个卵;每个水体样本平均卵数量为(3.02±0.322)个;卵总损失数量为898个,每个水体平均损失数量为(1.87±0.27)个,总损失率为58.44%.研究表明:仅水深(P0.05)显著影响中国林蛙产卵数量;中国林蛙在道路两侧产卵对繁殖地水深60 cm具有一定选择性;相对潮湿度(P0.05)显著影响中国林蛙产卵损失率;相对潮湿度中半干旱类型对卵损失影响最大.     

黑斑蛙(Rana nigromaculata)不同组织器官和不同发育时期同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳 (PAGE) ,对黑斑蛙的五种不同组织器官和五种不同发育时期的个体进行了酯酶 (α—EST)和过氧化物酶 (PO)同工酶的差异比较研究 .结果显示 ,不同组织器官中两种同工酶均存在明显的区别 ;不同发育期的α—EST同工酶也存在质的差异 .从蝌蚪到幼蛙的发育中 ,α—EST同工酶谱逐渐增加 ,但从幼蛙发育到成体蛙 ,α—EST同工酶谱却出现了减少现象 .不同发育时期的个体Rf为 0 .2 3的α—EST酶谱皆得以表达 .     

舟山蚂蚁岛双齿围沙蚕Perinereis aibuhitensis Grube生态的初步研究

本文报道了舟山蚂蚁岛长沙塘双齿围沙蚕的生境、分布数量、食性和繁殖习性。研究结果表明,长沙塘滩涂平坦,潮水涨退缓慢,年平均水温为15.6℃,盐度为20—30％,中潮区上部底质为细软泥沙,有机质含量平均4.14％,硅藻繁生,平均一平方米沙蚕密度为112条,生物量261克。该生境最适于沙蚕生活,高潮区数量较少,中潮区下部基本无分布。沙蚕的食物为有机质和泥沙,硅藻,极少量浮游甲壳类。繁殖期为4—9月,产卵高峰期为5—6月。产卵时水温为20.2℃,产卵后10—20多小时死亡。最后,还提出人工增养殖和资源保护的若干建议。     

黑斑蛙线粒体DNA提取与纯化的研究

用碱变性法和核酸酶消化法从黑斑蛙的肝脏和肌肉中提取和纯化线粒体DNA,经琼脂糖凝胶电泳及OD值测定显示,所得黑斑蛙线粒体DNA的结构完整,并避免了核DNA、线粒体RNA、蛋白质、有机溶剂等的污染.结果表明:黑斑蛙mtDNA的分子量大小约为17.167kb.其得率和纯度均能满足mtDNA的各种分析要求.     

康县隆肛蛙(Feirana kangxianensis)越冬栖息地调查与分析

为了明确康县隆肛蛙(Feirana kangxianensis)对越冬栖息地的选择,利用样线法、直接计数法与定点观察相结合,对康县豆坝乡的康县隆肛蛙进行调查分析,共计发现17只康县隆肛蛙成体及约(110±25)只蝌蚪,其中10只成体在搬开石块后静栖于原地,仅1只成体在低温情况下(水温低于10℃)未进入冬眠状态.通过主成分分析法得知,康县隆肛蛙越冬期间主要选择河流中且水温低于10℃,距离道路大于50m,植被盖度在30~70%,林缘距离小于10cm的环境下越冬,并且该物种在越冬期间还会选择类似"洞穴"式的栖息地.     

翡翠贻贝(Mytilus smaragdinus Chemnitz)生殖腺的季节变化及性变现象的初步观察

厦门翡翠贻贝生殖腺的成熟季节为7—11月,其中以7—9月为性腺发育最成熟的时期,也就是产卵的季节。 贻贝性腺发育过程可分为四个时期:(1)性腺形成期:时间2—4月,月平均水温13.2—19.9℃,(2)性分化期:时间4—7月,月平均水温19.9—29.2℃,(3)产卵期:时间7—11月,月平均水温29.2—21℃,(4)耗尽期或休止期:时间12—1月,月平均水温16—15.5℃。 翡翠贻贝大多系雌雄巽体,但有少数雌雄同体出现于4—5月间,这种贻贝有性变现象,它的转变和水温及食料有密切关系。     

龙峪湾国家森林公园两栖动物多样性与保护

2001~2008年,对河南省龙峪湾国家森林公园两栖动物资源进行了调查,结果显示:龙峪湾国家森林公园共有两栖动物7种,隶属2目4科7属;区系组成中,广布种4种,东洋界2种,古北界1种,具典型过渡性.蛙科为优势科,太行隆肛蛙为优势种,中国林蛙、黑斑侧褶蛙、中华蟾蜍指名亚种、北方狭口蛙为常见种,花臭蛙为稀有种,大鲵是珍稀濒危种.龙峪湾是花臭蛙已知分布的北限.本文提出了该区两栖动物保护的对策与建议.     

Pb~(2+)对黑斑蛙早期生长发育影响的研究

研究了Pb~(2+)质量浓度在10,20,30,40和50mg/L时对黑斑蛙(Rana nigromaculata)胚胎期及Pb~(2+)质量浓度在0.07,0.30,1.00mg/L时对黑斑蛙蝌蚪期生长发育的影响.结果表明,Pb~(2+)对胚胎期的毒性于孵化期和开口期表现显著,其余各期毒性不如这两期明显.Pb~(2+)能影响黑斑蛙胚胎期和蝌蚪期的生存率,对蝌蚪的生长发育具有明显的抑制作用(P0.01),但组间差异均不显著(P0.05);同时质量浓度为30,40,50mg/L时会导致孵化期胚胎畸形,致畸率50mg/L质量浓度水平最高(4.41%),40mg/L水平次之(3.33%),30mg/L水平最低(2.39%).各质量浓度水平均导致蝌蚪头部泡状膨大、"S"型尾和形体较小(为正常体长的0.50-0.67)等,致畸率1.00mg/L质量浓度水平最高(2.25%),0.30mg/L水平次之(2.00%),0.07mg/L水平最低(0.50%).并对致毒原因进行了初步分析.     

蛙类的早期胚胎发育,特别着重于原肠背壁形成中的某些问题

观察了我国常见的四种蛙,即北方狭口蛙(Kaloula borealis),黑斑蛙(Rana nigromaculata),大蟾蜍(Bafo gagarizens)和多疣狭口蛙(Kaloula verrucosa)的早期胚胎的石蜡切片,主要结果如下:1.中胚层形成时,在胚体前端也首先成层,随之分散;2.原肠背壁细胞来源于背唇转入层,3.原肠背壁细胞在神经胚形成过程中,形成了短暂存在的原肠背褶和底索。     

湖拟鲤繁殖生物学研究

本文分析研究了赛里木湖湖拟鲤卵巢各期发育特征,成熟系数变化,生殖力与体长、体重的关系:F=10829.8+92.99(?);F=72.2264L~(2.6654)繁殖群体组成和繁殖习性,繁殖季节5月下旬至6月,产卵水温9°～13℃。     

黑斑蛙消化道淀粉酶的活力

采用3,5-二硝基水杨酸比色法对黑斑蛙( Rana nigromaculata )消化道淀粉酶的活力分布以及pH、温度和NaCl对淀粉酶活力的影响进行了研究.结果表明,黑斑蛙消化道淀粉酶的活力从高到低依次为中肠、后肠、前肠、胃和食道.胃和肠道淀粉酶的最适pH值分别为7.4和8.0,最适温度均为35℃.NaCl对淀粉酶有一定的激活作用,其最适浓度为0.15mol/L.     

泽蛙(Rana l.limnocharis)染色体高分辨带型初步分析

本文用简化的高分辨显带方法,直接将5——溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)注射到泽蛙体内,替代胸腺嘧啶脱氧核苷(TdR)渗入正在复制的DNA中,干扰染色体三级结构,使染色体伸长,从而获得了大量带纹清晰、丰富的早中期、中期染色体,并成功地进行了高分辨带型分析。结果和衡红强等、赵亚力用外周血淋巴细胞培养制备的黑斑蛙,绿臭蛙染色体高分辨带型一致。     

北京无尾两栖类杂交实验

一、将北京所产的6种无尾两栖类作相互杂交实验。除了狭口蛙一种没有成功外,其余5种的互相杂交可以归并于下列5类:1.能够发育成幼蟾或幼蛙者有大蟾蜍与花背蟾蜍或黑斑蛀与金线蛙的相互交配。2.发育至蝌蚪期的有金线蛙♀X 花背蟾蜍(?)的少数受精卵。3.发育至囊胚期的有哈士蟆♀X 黑班点(?)。4.只能使卵产生不规则的卵裂沟的有黑斑蛙♀X 花背蟾蜍(?)或哈士蟆(?),金线蛙♀X 大蟾蜍(?),金线蛙♀X 花背蟾蜍(?)的多数精受卵。5.没有卵裂现象的有大蟾蜍♀X 黑斑蛙(?)或金线蛙(?)或哈士蟆(?),花背蟾蜍♀X 黑斑蛙(?)或金线蛙(?)或哈士蟆(?),黑斑蛙♀X 大蟾蜍(?),金线蛙♀(?)哈士蟆(?),哈士蟆♀X 大蟾蜍(?)或花背蟾蜍(?)。二、自大蟾蜍与花背蟾蜍相互杂交得到在形熊上不同的蟾蜍,说明了大蟾蜍和花背蟾蜍的卵细胞质是不同的。虽然自相互交配所得的杂种蟾蜍的染色体是相同的,但是由于卵细胞质或其含物的不同,也能够影响它们的胚胎发育,说明了在发育过程中,细胞核与细胞质的相互关系。