降低聚腺苷二磷酸核糖聚合酶活性对外源癌基因诱导的NIH…

用ＰＡＲＰ酶抑制剂苯甲酰胺（ＢＡ）处理经ｃ－Ｈａ－Ｔ２４－ｒａｓ活化癌基因转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞得到转化细胞系，结果表明，经苯甲酰胺处理的细胞系，其细胞凝集，血清依赖性，形态特征等均发生了改变呈出现正常细胞的特征，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果表明，已整合到细胞基因组中的外源Ｔ２４－ｒａｓ基因发生了丢失。     

点突变ras癌基因全cDNA真核表达重组体的构建及诱导NIH3T3细胞转化的研究

将活化癌基因Ｔ２４－ｒａｓ的全ｃＤＮＡ序列正向插入真核载体ｐＭＡＭｎｅｏ，构建成重组质粒ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｔ２４－ｒａｓ．将该质粒转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，通过药物筛选，建成细胞系３Ｔ３（Ｔ２４）．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明外源Ｔ２４－ｒａｓ基因已整合于受体细胞染色体中．３Ｔ３（Ｔ２４）细胞表现出形态学方面的明显变化：具失去接触抑制能力，且在裸鼠体内致瘤等恶性行为．本文构建的Ｔ２４－ｒａｓ基因真核表达重组体和建立的转化细胞系可用于肿瘤的诊断、预防、治疗及抗肿瘤药物的筛选、评估等研究．     

点突变ras癌基因全cDNA真核表达重组体的构建及诱导NIH…

将活化癌基因Ｔ２４－ｒａｓ的ｃＤＮＡ序列正向插入真核载体ｐＭＡＭｎｅｏ，构建成重级同粒ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｔ２４－ｒａｓ，将该质粒转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，通过药物筛选，建成细胞系３Ｔ３（Ｔ２４）Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明外源Ｔ２４－ｒａｓ基因已整合于受体细胞染色体中，３Ｔ３（Ｔ２４）细胞表现出形态学方面的明显变化；具失去接触抑制能力，且在裸鼠体内致瘤等恶性行为，本文构建的Ｔ２４－ｒａｓ基因真核表达重组体和     

逆转录病毒载体介导的Anti-ras核酶对T24ras转化3T3细胞的抑制作用

突变ｒａｓ基因存在于多种人类肿瘤细胞中,本文将可特异性切割１２位点突变ｒａｓ（Ｔ２４ｒａｓ）之核酶Ｒ８通过逆转录病毒载体导入Ｔ２４ｒａｓ转化的ＮＩＨ３Ｔ３细胞,以期检测核酶在细胞内对其靶基因的作用．结果表明Ｒ８可特异性地切割突变ｒａｓｍＲＮＡ,导致转化细胞生物学特性如细胞形态、生长速度等在一定程度上发生逆转     

逆转录病毒载体介导的Anti—ras核酶对T24ras转化3T3细胞 …

突变ｒａｓ基因存在多种人类肿瘤细胞中，本文将可特异性切割１２位点突变ｒａｓ（Ｔ２４ｒａｓ）之核酶Ｒ８通过逆转录病毒载体导入Ｔ２４ｒａｓ转化的ＮＩＨ３Ｔ３细胞，以期检测核酶在细胞内对其靶基因的作用，结果表明Ｒ８可特异性地切割突变ｒａｓｍＲＮＡ导致转化细胞生物学特性的细胞形态，生长速度等在一定程度上发生逆转。     

抗氧化剂Isoverbascoside对MGC80—3细胞抗氧化活性和癌？…

以苔酚蓝拒染法,核黄素－ＮＢＴ还原法、ＤＴＮＢ还原法及ＲＮＡ斑点杂交分析法分别对经不同浓度Ｉｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ（Ｉｓｏｖ）处理的ＭＧＣ８０－３细胞的Ⅱ期抗氧化酶（超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶）生和Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ及ｐ５３基因表达作了检测,结果显示：经Ｉｓｏｖ处理后,细胞生长明显受抑;Ⅱ期抗氧化酶活性较处理前明显上升,癌基因Ｎ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ的表达较处理前下降,     

研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变关系的双基因真核表达重…

本文将聚ＡＤＰ核糖聚合酶基因１．４ｋｂ部分序列反向插入真核表达载体ｐＭＡＭｎｅｏ和ｐＳＭＧ中，同时１２位密码子突变的活化ｒａｓ癌基因也一同克隆到上述载体中，从而获得具有不同真核基因筛选标记的双基因真核表达重组ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｃｌ．４－Ｔ２４，ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｃｌ．４－ａｒＴ２４，及ｐＳＭＧ－Ｃｌ．４－Ｔ２４，上述质粒的构建成功为研究聚ＡＤＰ核糖基化作用与细胞恶变的关系提供了一种新的分子模型。     

Ha—ras和Ki—ras癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒杀伤敏感…

为研究Ｈａ－ｒａｓ和Ｋｉ－ｒａｓ癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒（ＭＶＭ）杀伤敏感性间的关系，两个细胞株，即Ｋｉ－ｒａｓ癌基因转株ＤＴ和Ｈａ－ｒａｓ癌基因转化细胞株ＲＥＦ４－３，被用来作为研究材料，体外细胞集落形成率和细胞在裸小鼠体内的成瘤能力测定显示，和对照细胞ＮＩＨ／３Ｔ３相比之这ＲＥＦ４－３和ＤＴ对ＭＶＭ的杀伤作用更敏感，同时，ＤＮＡ杂交和蛋白免疫沉淀实验结果也显示，在ＲＥＦ４－３和ＤＴ细胞中     

重组PAI—2基因在NIH3T3细胞中的活性表达

构建了人ＰＡＩ—２ｃＤＮＡ睥达质粒，以ＮＩＨ３Ｔ３为转染宿主细胞，ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和ＰＡＩ活性扩散试验结果表明人ＰＡＩ—２ｃＤＮＡ可以在ＮＩＨ３Ｔ３细胞中正确表达出ＰＡＩ—２蛋白，且具有抑制ＰＡ的活性，同时未能检测到ＮＩＨ３Ｔ３细胞表达ＰＡＩ—２蛋白质．为探讨ＰＡ—ＰＡＩ—２系统的调控机制打下基础．     

视黄酸对BEL—7402细胞酶活性及基因表达的影响

人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞分别以５μｍｏｌ／Ｌ、２０μｍｏｌ／Ｌ和５０μｍｏｌ／Ｌ的视黄酸（ＲＡ）处理后,细胞生长明显受抑,平均细胞群体倍增时间延长,并呈ＲＡ浓度及处理时间依赖性关系．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理的细胞中,ｒ－谷氨酰转肽酶（ｒ－ＧＴ）活性自给药后第２天即持续下降,至第６天降至４４．５％,而酪氨酸－α－酮戊二酸转氨酶（ＴＡＴ）活性则持续增高,至第６天较对照组高近１倍．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理５ｄ后,ＲＮＡ斑点杂交分析表明ｐ５３基因转录加强,而Ｎ－ｒａｓ基因表达下降,提示该两基因的表达变化可能在ＢＥＬ－７４０２细胞的生长抑制及逆转过程中起重要作用,有关机制尚待深入研究．     

绿色荧光蛋白基因在裂殖酵母中的表达

将绿色荧光蛋白基因编码区序列克隆到大肠杆菌－裂殖酵母穿梭质粒ｐＲＥＰ３的ＢａｍＨⅠ￣ＳｍａⅠ位点,使之位于一个受硫胺素抑制的启动子和终止子的控制之下,用该质粒转化裂殖酵母,转化菌落于阳光下呈绿色,在３９５ｎｍ紫外光下发出强烈绿色荧光,在荧光显微镜下,用蓝光激发,可见该基因的表达明显受硫胺素的抑制,在没有选择压力的条件下,质粒丢失现象很严重,在完全培养基上,只有２０％的细胞发光,在丰富培养基上,发光     

人纤溶酶原K1—3区基因在大肠杆菌中的表达

将人纤溶酶原Krigle 1-3(K1-3)基因插入融合表达载体pET-17b，获得重组质粒pET-K13,转化E.coli BI21(DE3),在IPTG诱导下，人纤溶酶原K1－3基因在E.coli BI21(DE3,pET-K13)中获得高效融合表达，表达量占菌体总蛋白的24％，表达产物以包函体存在，Western blot证明重组 蛋白对人纤溶酶原抗血清有特异免疫原性。     

肌苷高产菌TSXB29的转化育种及其发酵条件的研究

以枯草杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＴＸ２（遗传标记Ｘａｎ~－）为供体，以枯草杆菌ＴＳＡ１９（遗传标记Ａｄｅ~－＋Ｈｉｓ~－＋８－ＡＧ~ｒ＋６－ＭＰ~ｒ＋ＳＧ~ｒ）为受体，利用转化法成功地获得肌苷产量高、遗传稳定性好的目的转化子ＴＳＸＢ２９。采用均匀设计理论，利用微机对实验数据进行统计处理，找出了该转化子的最佳摇瓶发酵条件，在该条件下，平均产苷为２７．８５ｇ／Ｌ。经连续摇瓶和斜面传代，发现该转化子是稳定的，具有一定应用价值。     

自建 Tg. C57-ras V1. 0 小鼠模型与日本 Tg. rasH2小鼠遗传学及其杂交 1 代生物学特性比较

摘要:目的 比较自主建立的 Tg. C57-ras 小鼠与日本 Tg. rasH2 小鼠模型的遗传学及 Tg. C57-ras 转基因小鼠与BALB / c 小鼠的杂交 1 代小鼠(简称 CB6F1-NIFDC) 与日本 Tg. rasH2 转基因小鼠模型杂交 1 代小鼠(简称 CB6F1-CIEA)的生物学特性,为国内药物安全评价机构提供致癌性模型的多元化选择。 方法 对两种模型的遗传学及生物学特性进行比较,包括模型构建方法、转录水平、蛋白水平、生长曲线、血液生理数据等。 结果 遗传学特性:两种模型均采用转基因方法构建,转入 c-Ha-ras 基因序列无实质差异,拷贝数仅相差一个;两种模型的不同脏器在mRNA 水平基因表达具有相似性;日本模型肺组织的蛋白水平稍高于自主建立模型,但无统计学差异。 生物学特性:根据文献分析两种模型杂交 1 代的生长曲线有差异,但在致癌实验周期内两模型体质量差别不大;血液生理指标有部分差异。 结论 通过遗传学及生物学特性比较,自建模型可作为临床前药物致癌性评价的候选模型。     

碱卤晶体结合能的理论计算

用函数ψ=Ae-λr作为离子晶体结合能中除库仑作用之外的排斥势能,其中A,λ由点阵常数r0和压缩率β决定,计入这个函数得到的碱卤晶体结合能与实验值误差很小。     

人白介素-6表达质粒的构建及在酿酒酵母中的表达

将带有哺乳动物细胞信号肽的人白细胞介素-6(hIL-6)基因片段构建到大肠杆茵-酵母细胞穿梭型质粒pYES2中，获得表达质粒pYES2-hIL-6。另外，将表达质粒pYES2-hIL-6转化到酿酒酵母细胞DBY747中，并将获得的转化子在含2％乳糖的YP培养基中培养到OD600=1．0左右，后用2％的半乳糖进行了诱导表达。结果发现，在培养上清中发现人白介素-6的分泌。     

将GNA基因导入莴苣（L.sativa）及其表达的研究

将含ＣａＭＶ３５Ｓ启动子的雪花莲凝集素基因置换Ｔｉ质粒载体ｐＢＩ１２１中的ＧＵＳ基因得到了ｐＢＩＧＮＡ质粒,将其导入农杆菌ＬＢＡ４４０４,得到ＬＢＡ４４０４菌株。     

营养对C3H/He小鼠生长繁殖功能的影响

探讨营养与环境因素对C3 H/He小鼠繁殖功能的影响 .观察不同营养与环境条件对C3 H/He小鼠初配产仔率、离乳仔数、体重增长等生殖、生长特性 ,并与昆明小鼠比较 .表明C3 H/He小鼠一年四季均具有繁殖能力 ,C3 H/He最长妊娠 2 4d ,最短 19d ,平均 2 0 .9d ,平均窝产仔数 4 .2只 ,较昆明小鼠有更短和更不规则的动情周期 ,营养、环境因素等影响其繁殖行为 .     

Preparation and properties of microencapsulated genetically engineered bacteria cells for oral therapy of uremia

~~Preparation and properties of microencapsulated genetically engineered bacteria cells for oral therapy of uremia~~