CB6F1-Tg( HRAS) Nifdc 小鼠与 CByB6F1-Tg( HRAS)2Jic 小鼠的脏器及血液生理指标测定与比较分析

目 的 比 较 自 主 建 立 的 C57BL / 6J-Tg ( HRAS) 转 基 因 小 鼠 与 BALB / cJ 小 鼠 的 杂 交 1 代 小 鼠 CB6F1-Tg( HRAS) Nifdc(简称 CB6F1-NIFDC)与日本转基因小鼠模型杂交 1 代小鼠 CByB6F1-Tg( HRAS) 2Jic( 简称 CB6F1-CIEA)的脏器及血液生理指标异同,丰富自建模型的基础数据。 方法 选取 8 周龄的 CB6F1-NIFDC 及 CB6F1-CIEA 各 10 只,雌雄各半,活体称体质量,随后解剖并测定其主要脏器质量及血液生理指标。 结果 自主建立的CB6F1-NIFDC 及日本引进的 CB6F1-CIEA 小鼠模型的部分脏器质量和血生理参数有差异性,脏器质量结果表明,雌性小鼠的心、肝、肺、左右肾等指标存在一定差异;雄性小鼠的肝、肺、左右肾、胸腺、左右睾丸指标质量有差异。 22项血液生理指标方面,雌性小鼠在 RBC、HGB 等 7 项指标差异极显著( P<0. 01) ;而雄性小鼠在 RBC、HCT 等 5 项指标差异极显著( P<0. 01) 。 结论 本文测定了两种模型脏器指标及生理指标,为自建模型在新药安全评价实验中的应用提供参考。     

C57 － ras 转基因小鼠模型的血液生理生化指标比较分析

摘要: 目的测定C57 － ras 转基因小鼠的血液生理生化正常值,对成年动物两性的正常值进行比较,并比较4 周龄和8 周龄的血液生理生化正常值。方法将20 只8 周龄和20 只4 周龄的近交系C57 － ras 转基因小鼠,采血后,用日本光电MEK － 7222K 血球分析仪测定血液生理指标,用OLYMPUS AU400 全自动生化分析仪测定血清生化指标。结果8 周龄动物血液生化指标中,ALB、GLU 和CHO,3 项指标雌雄间比较有显著性差异( P ＜ 0. 05) ,血液生理指标中WBC和LYM 这2 个指标雌雄差异有显著性( P ＜ 0. 05) ; 在4 周龄和8 周龄的血液生化指标比较,其中ALT、TP、ALB、ALP、P、CHO 和T． Bili,7 项有显著性差异( P ＜ 0. 05) ; 血液生理指标4 周龄和8 周龄比较,WBC、ＲBC、HGB、HCT、MCV、MCHC、ＲDW、PLT、PCT、MPV、NEUT 和LYM 12 项指标有显著性差异( P ＜ 0. 05) 。结论成年的C57 － ras 转基因小鼠的血液生理生化值,部分指标两性间测定值有差异; 4 周龄和8 周龄C57 － ras 转基因小鼠的血液生理生化值中多数指标差异显著; 年龄对C57 － ras 转基因小鼠的血液生理生化值的影响比性别对其影响要大。     

转基因EGFP小鼠血液生理生化指标的测定

目的测定转基因C57BL/6-Tg(ACTB-EGFP)1Osb/J小鼠血液生理生化正常值。方法采用全自动生化测定仪对5～6周雄性、6～7周雌性EGFP小鼠的血液常规及生化值进行测定。结果EGFP转基因雄雌小鼠血常规比较,雌雄鼠的血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)之间比较差异非常显著(P<0.01),单核细胞计数(MO)、红细胞宽度(RDW)之间比较差异显著(P<0.05);血液生化值雄雌小鼠比较,白蛋白(Alb)、甘油三酯(TG)差异非常显著(P<0.01),其它指标差异不显著。结论该小鼠的生理生化指标值在雄雌间有一定的差异,但该值均在正常波动范围。     

p21HBsAg/HBsAg和P21HBX/HBX转基因小鼠不同月龄血液生理指标的测定

目的检测p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBX/HBX转基因小鼠的血液生理指标，分析p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBX/HBX基因引入小鼠基因组p21位点中对其血液指标的影响。方法用日本光电MEK-5126K血球计数仪（动物芯片）及配套试剂盒对四个月龄不同基因型小鼠的血液生理指标进行测定，并且与野生型对照组进行比较。结果多数指标雌雄之间差异显著，并且两种基因型小鼠及野生型在不同年龄、不同指标的动态变化不同。结论p21^HBsAg/HBsAg和p21^HBX/HBX基因转入小鼠基因组p21位点对其血液生理指标具有一定的影响。     

突变无毛小鼠F_2代的血液学和血液生化指标测定

目的　突变无毛小鼠是一种新型的基因定位小鼠 ,为了更好的研究该突变基因对小鼠特性的影响。方法采用日本光电血球计数仪、荷兰半自动生化仪对二月龄的F2 代小鼠血液学及血液生化指标进行测定。结果　雌雄无毛小鼠之间的Bun和Ca差异显著 ;稀毛小鼠雌雄之间的WBC、RBC、HCT、GPT、Alb和Mg差异显著 ,其它指标差异不显著。表型之间比较 ,Tbili、Cl、Ca差异显著 ,其它指标差异不显著。结论　突变无毛小鼠F2 代生化指标、代谢产物及电解质表型之间存在差异 ,体现出该突变对其机体的代谢功能有一定的影响。研究结果为进一步说明突变基因的特性提供了参考     

Spexin转基因小鼠的构建及表型初步分析

Spexin是一种具有多种生物学功能的神经肽,在代谢疾病及神经系统疾病中发挥重要作用.为了深入研究spexin的生理功能和相关机制,构建了spexin转基因小鼠,通过检测血液中spexin含量以及糖耐受实验,对模型小鼠进行了初步的表型分析.利用piggyBac(PB)转座子技术培育spexin转基因小鼠,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分别在基因层面和蛋白层面验证了模型动物是否构建成功.之后用饲喂高脂饲料的雄性小鼠进行糖耐受实验,对转基因模型小鼠进行表型分析.PCR结果显示,以靶向spexin的两对引物扩增,转基因型小鼠基因组DNA中能分别扩增出300 bp和301 bp的片段,而野生型小鼠则不能.ELISA结果中,转基因型小鼠血清中spexin含量较野生型小鼠显著升高;同一表型中,雌雄小鼠间血清中spexin水平无明显差异.饲喂高脂饲料85 d内,转基因型小鼠和野生型小鼠体重变化未观察到显著差异;糖耐受结果显示,转基因型小鼠每个时间点血糖浓度均低于野生型小鼠,且在15 min时具有显著性差异.结果显示成功构建了过表达spexin基因的小鼠模型.spexin表达水平的升高在一定程度上提高了C57BL/6小鼠的糖耐受能力.该模型为进一步研究spexin基因在动物体内的功能以及在代谢疾病发病机制中的作用奠定了基础.     

两种转基因小鼠生长繁殖方法的研究

目的：对两种转基因小鼠的生长繁殖方法进行研究。方法：在SPF环境下,用C57BL／6小鼠做对照,采取近亲交配的繁殖方法研究其生长繁殖性能,并检测两种转基因小鼠体内荧光蛋白的表达。结果：两种转基因小鼠的生长繁殖性能均与C57BL／6小鼠相一致,所有脏器重量和绝大多数正常血液生化指标与C57BL／6小鼠无显著性差异（P〉0．05）;两种转基因小鼠脑片检测可见在不同的年龄段均有相应荧光蛋白的表达。结论：在SPF环境下采用近亲交配繁殖法培育转基因小鼠是成功的。     

9～10周龄CB6F1与B6CF1小鼠血生化、主要脏器质量及脏器系数测定

目的测定CB6F1与B6CF1小鼠血生化、主要脏器质量和脏器系数,并进行比较分析。方法随机选取9~10周龄SPF级CB6F1与B6CF1小鼠各40只,雌雄各半。分别称重,麻醉后摘眼球采血后,颈椎脱臼处死,运用全自动生化分析仪测定血生化指标,并采集脏器测定脏器质量,计算脏器系数。结果 14项血生化指标比较,CB6F1小鼠雌雄之间有11项指标(11/14)、B6CF1小鼠雌雄之间有9项指标(9/14)、CB6F1与B6CF1小鼠雌性之间有10项指标(10/14),雄性之间11项(11/14)指标均存在显著性差异(P0.05)。CB6F1与B6CF1小鼠主要脏器质量与脏器系数比较,同品系雌雄之间,同性别2个品系之间,均有部分指标存在显著性差异(P0.05)。结论以BALB/c和C57BL/6为父母本杂交产生的不同F1代小鼠CB6F1和B6CF1,其血生化指标、脏器质量和脏器系数有所不同。     

Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2转基因小鼠的制备

目的：建立Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2的转基因小鼠模型。方法：构建转基因表达载体,经细胞诱导表达验证后,酶切得到含有CUEDC2的线性DNA片段,并采用显微注射的方法及后续筛选鉴定,得到CUEDC2转基因小鼠。进而通过与乳腺特异表达的MMTV-rtTA转基因小鼠交配,得到CUEDC2/rtTA双阳性转基因小鼠。利用2mg/ml的多西环素（Doxycycline）诱导小鼠体内CUEDC2表达,通过Western Blot、免疫组化检测表达。结果：经诱导,CUEDC2/rtTA双阳性转基因小鼠的2个Founder的F1、F2代在转录水平和蛋白水平均成功表达CUEDC2, 并具有乳腺特异性。结论：Tet-on系统诱导乳腺特异表达CUEDC2的转基因小鼠制备成功.     

SX1近交系小鼠主要脏器及血液生化指标的测定

目的测定SX1近交系小鼠的主要生化及血液指标,为建立该品系小鼠的生物学特性资料提供实验数据。方法从F29、F30代仔鼠中选择1、2、3、4月龄的小鼠,分别测定这些小鼠的体重、体长、尾长;心、肝、脾、肺等12种脏器的重量;总蛋白、白蛋白、血糖、肌苷等16项血液生化指标及白细胞、红细胞、血红蛋白等15项血液常规指标。结果SX1小鼠在1、23、、4月龄时的体重、体长、尾长,心、肝、脾等脏器随小鼠生长而增加,但胸腺随小鼠生长而缩小;各脏器重量均雄性大于雌性,肾上腺为雌性大于雄性;其中14项血液生化指标随小鼠的生长基本无明显变化,而总胆红素和碱性磷酸酶指标随小鼠生长而降低,多数指标无性别差异,但碱性磷酸酶指标雌性大于雄性;其中13项血液常规指标随小鼠的生长基本无明显变化,只有白细胞与平均血小板压积随小鼠生长而降低,且白细胞指标雄性大于雌性。结论各项指标基本符合近交系小鼠的特征,补充了SX1近交系小鼠的资料。     

小鼠同种异体骨髓移植GVHD模型的建立

目的选择C57BL/6(H-2b)→BALB/c(H-2d)、C57BL/6(H-2b)→CB6F1(H-2d/b)分别作为完全异基因移植和半相合基因移植的供、受者;建立小鼠移植物抗宿主病(GVHD)模型。结果此GVHD模型动物于移植后1周体重进行性下降,前3天平均每天下降2g左右,此后体重下降趋势有所减缓。第8~12d体重略有回升,第12d后体重再度开始下降。并伴有皱毛、弓背、脱毛、腹泻及肛门红肿,皮肤增厚等症象。移植后12d开始有小鼠死亡,至移植后3周小鼠全部死亡,死亡时平均体重下降10g左右。病理学检查结果显示,肝脏汇管区大量分叶核细胞和淋巴细胞浸润,肝血窦内也有淋巴细胞浸润;肝血窦和中央静脉扩张瘀血。肠粘膜下层有大量淋巴细胞及分叶核细胞浸润,肠粘膜上皮坏死脱落。皮肤真皮层毛细血管扩张,有淋巴细胞和分叶核细胞浸润,符合GVHD症象及病理诊断。结论本实验动物模型是可靠的,可用于GVHD防治的实验性研究。     

9～10周龄CB6F1与B6CF1小鼠血生化、主要脏器重量及脏器系数测定

摘要：目的 测定CB6F1与B6CF1小鼠血生化、主要脏器重量和脏器系数,并进行比较分析。方法 随机选取9～10周龄SPF级CB6F1与B6CF1小鼠各40只,雌雄各半。分别称重,麻醉后摘眼球采血后,颈椎脱臼处死,运用全自动生化分析仪测定血生化指标,并采集脏器测定脏器重量,计算脏器系数。 结果 14项血生化指标比较,CB6F1小鼠雌雄之间有11项指标（11/14）、B6CF1小鼠雌雄之间有9项指标（9/14）、CB6F1与B6CF1小鼠雌性之间有10项指标（10/14）,雄性之间11项（11/14）指标均存在显著性差异（P﹤0.05）。CB6F1与B6CF1小鼠主要脏器重量与脏器系数比较,同品系雌雄之间,同性别2个品系之间,均有部分指标存在显著性差异（P﹤0.05）。结论 以BALB/c和C57BL/6为不同父母本杂交产生的F1代小鼠CB6F1和B6CF1,其血生化指标、脏器重量和脏器系数有所不同。     

Establishment of widely expressed<Emphasis Type="Italic">hb1f</Emphasis> transgenic mouse lineage and its morphologic analysis

Human nuclear receptor hB1F is a novel member of the fushi tarazu factor Ⅰ subfamily of nuclear receptor superfamily. The studies about its homologous genes indicate that hB1F may play a key role in regulating the metabolic homeostasis of cholesterol. After obtaining the founder mice carrying the trausgeue of hblf by microiujectiou, each founder was mated to normal C57 mouse and the positive F1 by PCR identification of the same founder were iutercrossed within sisters and brothers to establish the trausgeuic mouse lineage. The results of F1, F2 and offspring of test cross identification showed that the widely expressed hb1f trausgeuic mouse lineage was established successfully in this study. The tissue morphology of the trausgeuic lineage was also analyzed preliminarily.     

三种小鼠血液生理生化正常值的测定

本文通过对三种小鼠－ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠和昆明远交群小鼠的血液学和血液生化指标进行测定。其结果：⑴血液学指标：ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的嗜中性白细胞、淋巴细胞雌雄间差异显著;Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠、昆明小鼠雌雄间差异不显著;昆明小鼠的白细胞比ＢＡＬＢ／ｃ、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小鼠的低;ＢＡＬＢ／ｃ近交系小鼠的单核细胞、嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞记数比Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ近交系小     

BALB/c与C57BL/6小鼠互为供受体心脏移植急性排斥模型的对比

目的建立并比较BALB/c与C57BL/6小鼠互为供受体心脏移植急性排斥模型。方法采用BALB/c与C57BL/6小鼠互为供受体建立心脏移植模型,术后评估免疫排斥情况、并发症、观察移植心脏存活时间并做病理检查。结果手术成功率为94.7%。A组(BALB/c→C57BL/6)与B组(C57BL/6→BALB/c)的生存时间无统计学差异。两组均可见典型急性排斥病理改变,两组间无明显统计学差异。两组移植心脏的心功能情况无明显差异。结论近交系BALB/c和C57BL/6基因小鼠遗传稳定,可以建立稳定的急性排斥反应模型。C57BL/6适合作为受体,移植时间明显缩短,造模成功率较高。     

B6-Trp53tm1 /NIFDC 小鼠在MNU 给药后的体质量、脏器质量、血液学及血生化指标的测定

摘要: 目的测定自主建立的p53 + / － 基因敲除小鼠( B6-Trp53tm1 /NIFDC) 在N-甲基-N-亚硝基脲( N-Methyl-Nnitrosourea,MNU) 给药后体质量、脏器质量、血液学及血生化指标,为临床前药物安全评价致癌性实验短期体内替代试验候选遗传修饰动物模型提供背景性数据。方法共设计4 个组: 阴性对照组( 野生型小鼠) 给予生理盐水、溶媒对照组( B6-Trp53tm1 /NIFDC 小鼠) 给予枸橼酸缓冲液、MNU 组1 ( B6-Trp53tm1 /NIFDC 小鼠) 给予75 mg /kg MNU、MNU 组2( 野生型小鼠) 给予75 mg /kg MNU,阴性对照组和MNU 组2 每组野生型小鼠各20 只,雌雄各半,溶媒对照组和MNU 组1 每组B6-Trp53tm1 /NIFDC 小鼠各20 只,雌雄各半,测定其体质量、主要脏器质量、相对脏器质量、血液学及血生化指标,并进行统计分析。结果MNU 组1、MNU 组2 动物体质量降低与阴性对照组、溶媒对照 组相比都存在显著性统计学差异( P ＜ 0. 05) 。MNU 组1、MNU 组2 动物心脏、肝脏、脾脏、肺脏、胸腺和颌下腺的绝对质量与阴性对照组、溶媒对照组相比有显著性统计学差异( P ＜ 0. 05) 。MNU 组1 和MNU 组2 动物心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑、胸腺和颌下腺的相对质量与阴性对照组、溶媒对照组相比有显著性统计学差异( P ＜ 0. 05) 。MNU 组1 和MNU 组2 动物均发现NEU、LYM%、LUC%、ＲBC、HGB、HCT、MCV、MCHC、ＲDW、HDW、CHCM、CHDW、PDW、MPV 及PLT 等15 个指标与阴性对照组和溶媒对照组相比有显著性统计学差异( P ＜ 0. 05) 。另外,MNU 组1 和MNU 组2 均发现TP、ALB、CＲEA、UＲEA、TCHO、TG、CA 等7 个指标与阴性对照组和溶媒对照组有显著性统计学差异( P ＜ 0. 05) ,MNU 组2 的AST 与阴性对照组和溶媒对照组有显著性升高( P ＜ 0. 05) ,但MNU 组1 和MNU 组2 组间没有显著性统计学差异。结论本文测定并分析了自主建立的p53 + / － 基因敲除小鼠( B6-Trp53tm1 /NIFDC) 和野生型小鼠分别给予MNU 及枸橼酸缓冲液后的体质量、脏器质量、血液学及血生化指标,该模型有望将来用于临床前药物安全评价致癌性实验短期体内替代试验。     

四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠建立肝纤维化模型

目的 比较不同剂量四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠肝纤维化模型的效果,以建立稳定的肝纤维化模型。方法 选择5周龄的C57BL/6近交系小鼠,分别腹腔注射给予高、中、低剂量的四氯化碳诱导肝纤维化,实验结束后取血及肝脏组织,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的水平及肝脏病理变化。结果 近交系C57BL/6小鼠药物诱导后,各剂量组动物均能存活到8周,高剂量组存活率仅为20%远低于中、低组;血清转氨酶含量升高程度、肝组织病理改变存在剂量时间效应关系。病理分析表明,各剂量组均可见肝细胞变性/坏死、中央静脉周围/汇管区混合细胞浸润及肝脏纤维化。结论 10%四氯化碳给药8周后能诱导近交系C57BL/6小鼠形成较稳定的肝纤维小鼠模型,为后续肝纤维化机制研究及药物筛选工作奠定了基础。     

小鼠非清髓性单倍体相合骨髓移植模型的建立

目的建立小鼠非清髓性单倍体相合骨髓移植模型,为研究移植前诱导免疫耐受或移植后输注供者细胞促进植入提供研究平台。方法以CB6F1雌性小鼠为受鼠,移植前1 d予450 cGy全身照射（TBI）后,随机分为2组,实验组移植0 d输注C57BL/6雄性小鼠骨髓有核细胞5×107/只,对照组不予移植。然后监测受鼠造血恢复、检测供鼠性别决定基因（SRY）判断植入情况,以及外周血供者细胞尤其CD3＋细胞嵌合状态,同时观察小鼠急性移植物抗宿主病（aGVHD）的发生情况。结果对照组小鼠均存活,仅表现轻度aGVHD,血象移植后30 d内基本恢复正常水平。实验组小鼠SRY基因在移植后＋14 d、＋30 d、＋60 d时检测PCR结果均阳性,供鼠外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞嵌合率在移植后14 d分别为23.8%、36.9%%、19.4%;30 d分别为49.9%、53.2%、54.4%;60 d分别为67.6%、51.6%、56.9%,其中CD3＋细胞嵌合率分别为4.4%、21.2%、54.4%。结论 450 cGyTBI的非清髓性预处理方案,可以诱导受鼠免疫耐受、供者骨髓细胞植入,嵌合率处于中低水平混合嵌合状态。