大理州2010年至2012年凝难配血结果分析

目的:全面了解大理州近3年来各医院送检的凝难配血情况。方法:对大理州中心血站2010年至2012年血型参比室处理的凝难配血报告结果作分析。结果:显示送检的26份血样中18份存不规则抗体;而且Rh血型系统不规则抗体检出的比例最高(27.7%);其余次之。8份为医院检验科或输血科聚凝氨试验法或卡式抗人球蛋白法出现凝集;经本室抗人球蛋白等一系列试验检测;未发现异常。结论:受检测患者中Rh血型系统不规则抗体检出的比例最高(27.7%);其余次之。此外,医院配血时忽略了抗人球蛋白试验的操作细节,会将非特异性的凝集误判为特异性抗体引起的凝集。     

大理州Rh(D)阴性无偿献血者血清学表型和不规则抗体的调查

目的:了解大理州无偿献血者Rh(D)阴性血型的血清学表现型及不规则抗体存在情况。方法:检测献血者样本136 803例,采用血清学方法确证Rh表现型,使用抗人球蛋白试剂对不规则抗体作筛查。结果:确证Rh(D)阴性献血者209例(0.15%);其中含不规则抗体1例(0.48%),血清学表现型中:ccdee 123例(58.85%),Ccdee 67例(32.06%),CCdee 7例(3.35%),ccdEe 6例(2.87%),CcdEe 5例(2.39%),CCdEe 1例(0.48%)。该阴性献血者ABO血型分布情况AOBAB。结论:对献血者Rh(D)阴性血型的血清学表现型及不规则抗体作检测,将有利于为临床安全及时有效输血提供保障。     

新生儿溶血病血清学检查分析

通过对我院临床确诊的34例新生儿溶血病血清学检查回顾,对血清学诊断方法进行分析评价。确诊为高胆红质血症,新生儿溶血病患儿进行血型鉴定、直接抗球蛋白试验(DAT)、血清游离抗体测定试验、新生儿红细胞抗体释放试验检测。结果显示34例ABOHDN患儿中新生儿红细胞直抗试验阳性率85.29%,血清游离抗体试验76.47%,新生儿红细胞抗体释放试验100%。说明新生儿红细胞抗体释放试验是鉴定新生儿溶血病最敏感的一项试验。     

GFAP单克隆抗体制备及ELISA检测方法研究

制备抗胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)单克隆抗体,并尝试建立双抗夹心ELISA检测方法,为出血性脑卒中早期诊断提供基础材料.用重组人GFAP作为抗原免疫BALB/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗GFAP单克隆抗体;用HRP标记单克隆抗体,ELISA和Western blot检测抗体的亚类、表位和特异性;采用ELISA技术制备GFAP检测试剂盒.获得了7株抗GFAP单克隆抗体,抗体亚类为Ig G2或Ig G1,抗体特异性好.抗体配对成功,ELISA检测重组人GFAP灵敏且稳定.     

ACCPA,RF及Ig对类风湿性关节炎诊断价值的探讨

目的研究抗环瓜氨酸抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibodies,ACCPA)、类风湿因子(RF)及免疫球蛋白(Ig)对类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的诊断价值,为临床应用提供参考。方法以RA患者作为病例组,健康体检人群为对照组,对两组血浆中ACCPA,RF及Ig水平进行检测,分析判断每种指标对于RA诊断的敏感性和特异性,对其测定结果用SPSS19.0软件进行统计学分析。结果在3种诊断指标中RF的敏感性为81.25%,特异性为77.08%;Ig敏感性为85.42%,特异性为47.92%;ACCPA敏感性为66.67%,特异性为93.75%;但是,三者联合对于RA诊断的敏感性和特异性分别为98.85%和73.9%。结论 ACCPA,RF及Ig三种指标联合用于RA诊断,不仅有较高的敏感性和特异性,而且也可以根据ACCPA来判断RA患者的严重程度,在临床应用中有良好的推广价值。     

五种不规则抗体检测方法的比较研究

比较盐水法、木瓜酶法、凝聚胺法、试管间接抗人球蛋白法、全自动微柱凝胶间接抗人球蛋白法检测受血者血清中不规则抗体的敏感性、特异性。选取解放军总医院门诊及住院输血患者5000例,分别采用盐水法、木瓜酶法、凝聚胺法、试管间接抗人球蛋白法、全自动微柱凝胶抗人球蛋白法对其输血前标本进行抗体筛选,对阳性结果进行抗体鉴定。盐水法未能检出阳性结果;木瓜酶法检出其中的15例,特异率86．7％;试管间接抗人球蛋白法检出了其中的19例,特异率为89．5％;凝聚胺法检出阳性结果18例,特异率100％;全自动微柱凝胶间接抗人球蛋白法检出阳性标本22例,特异率90．9％。说明盐水法不适合不规则抗体检测;木瓜酶法检出率低,具有一定局限性;试管间接抗人球蛋白法需要反复洗涤红细胞,费时较多,不便于开展大规模筛查;凝聚胺法简便、快速,但手工操作,不易标准化;全自动微柱凝胶抗人球蛋白法灵敏度高、重复性好、易于标准化,适于临床输血前大批量抗体筛选。     

卵黄抗体(IgY)及其在蛇伤治疗中的研究进展

传统抗蛇毒血清存在生产成本高、得率低、多种副作用等不足,使得寻找更理想的蛇毒解毒剂变得十分迫切;因卵黄抗体(Ig Y)在生产及中和蛇毒毒性等方面所体现的独特优势,成为开发新蛇毒解毒剂的重要研究对象。当前研究表明:Ig Y与哺乳动物Ig G功能相似但结构不同;Ig Y据有良好的耐压及耐酸碱稳定性,但对高温及蛋白水酶敏感;相比Ig G,Ig Y的生产成本低且具有非侵略性,其运用于免疫分析可降低假阳性率;产蛋鸡的免疫应答受抗原(剂量、分子量)、佐剂类型、免疫途径、免疫间隔等4种主要因素共同影响;纯化方法影响Ig Y纯度与活性;已制备出的多种抗蛇毒Ig Y对蛇毒引起的毒理作用有很好的中和效果。随着生物技术的快速发展,抗蛇毒Ig Y有望被开发成解毒剂、诊断试纸、亲和配体、口服制剂等,在蛇伤研究领域的应用前景广阔。
     

Rh血型遮断现象1例

红细胞表面血型抗原完全被某种抗体结合后 ,进行血型鉴定时发生遮断现象 ,易导致血型定型错误。笔者遇见一例 ,现报告如下。1　病例简介王某 ,女 ,37岁 ,怀孕 40周 ,孕 3胎第二产 ,产程 1小时 ,羊水清 ,胎盘、脐带无异常 ,无家族遗传病史。王某之子 ,男 ,1天 ,皮肤、巩膜重度黄染 ,怀疑新生儿溶血病。2　血型血清学检查( 1 )试剂与方法 :血型鉴定、抗体筛查、抗人球蛋白试验、吸收及放散试验均按文献 [1,2 ] 方法 ;试剂谱细胞为本实验室自配。( 2 ) ABO血型鉴定 :王某 A型 ,丈夫 O型 ,王某之子 O型。( 3)抗体筛查 :王某血清与不同红细胞…     

一种新型体外溶血检测技术的建立及应用

目的:建立一种新型体外溶血检测技术,检测血清中处于低水平的血型抗体.方法:取33份分离后的患者单个核细胞用自体血浆重悬后,与本研究的溶血检测体系反应,通过Hb胶体金试纸条进行定性检测,然后与盐水法和凝胶卡法的间接抗人球蛋白检测结果比较,通过SPSS 19.0非参数检测(Mann-Whitney Test)对数据统计分析.结果:新型溶血技术与盐水法和凝胶卡法的间接抗人球蛋白检测相比,新型溶血技术对不同性质不规则抗体(IgG/IgM型)检出率高于盐水法和凝胶法.针对不同种类(Rh、MNSs、Duffy、Kidd、Lewis及JMH系统和自身抗体)的不规则抗体,该技术检出率高于其他两种方法(P0.05).结论:新型体外溶血检测技术提高了检测灵敏度,有效检出各种不规则抗体,避免反复输血患者的溶血性输血反应,保障输血安全.     

基因工程人表皮生长因子（rhEGF）单克隆抗体的制备与初步鉴定

以基因工程人表皮生长因子(rhEGF)为抗原,免疫BALB/c小鼠,将免疫的小鼠脾细胞与小鼠Sp2/0-Ag14骨髓瘤细胞进行融合,经多次筛选和再克隆化,获得3株能稳定分泌抗rhEGF单克隆抗体(McAbs)的杂交瘤细胞株.对该3株杂交瘤细胞小鼠腹水进行了抗体效价测定,结果显示在1×10-6～2×10-7之间.对上述3种杂交瘤单抗(分别命名为:AE-2A4,AE-2G5和AE-3E11)进行了特异性、抗原决定簇及相对亲和力测定.结果表明,它们都具有抗rhEGF高特异性;并分别抗两个不同抗原决定簇;相对亲和力大小次序为:AE-3E11>AE-2A4>AE-2G5.Ig亚类鉴定结果显示:AE-2A4,AE-3E11同为IgG1亚类,而AE-2G5为IgG2b亚类.确定AE-2A4单克隆抗体可用于制备高纯rhEGF.     

抗心磷脂抗体与不明原因复发性自然流产的相关性研究

目的 探讨抗心磷脂抗体在不同孕育状态下妇女人群中的表达情况,研究抗心磷脂抗体与复发性自然流产的相关性.方法 应用前瞻对照的研究方法,收集正常生育组、早初孕组、复发性自然流产组、继发不孕组、偶发流产组5组病例.采用ELISA法检测各组病例中的抗心磷脂抗体IgG、IgM、IgA.运用统计软件,以x2检验分析各组抗心磷脂抗体IgG、IgM、IgA阳性率的差别.结果 得到抗心磷脂抗体IgG、IgM、IgA的阳性率,正常生育组：0.00％、3.70％、3.70％;早初孕组：0.94％、4.72％、0.94％;复发性自然流产组：9.76％、7.32％、2.44％;继发不孕组：3.57％、1.79％、3.57％;偶发流产组：0.00％、3.70％、7.41％.RSA组与早孕组均有统计学意义,p＜0.05;余组间比较无统计学意义.结论 抗心磷脂抗体阳性率在RSA最高19.52％、早初孕组6.60％、继发不孕组8.93％、偶发流产组11.11％、正常生育组7.40％.不明原因复发性自然流产的发生和抗心磷脂抗体的产生密切相关.     

用酶联免疫吸附试验诊断蓝氏贾第鞭毛虫病免疫价值的研究

用蓝氏贾第鞭毛虫纯培养虫株和超声粉碎可溶性虫体部分作为抗原,采用ELISA方法检测人体感染蓝氏贾第鞭毛虫血清免疫抗体并讨论其寄生虫学诊断价值．检测65份成人贾第虫病血清,其中55份IgG和／或IgA阳性,阳性率84．62％．20份10岁以下儿童贾第虫病人血清无1份阳性．结果提示蓝氏贾第鞭毛虫感染产生的体液免疫反应存在有年龄依赖性,酶联免疫吸附试验用于蓝氏贾第鞭毛虫病免疫诊断具有局限性．     

全国11城市的O型血液抗体效价调查研究

为了研究不同地区的O型血液中国人血清中的抗体效价是否有明显的差异和不同地区的抗体效价水平,对11个城市的O型血液抗体效价水平进行了检测。用全自动微板法,对调查的440份O型血抗-A、B抗体的IgM和IgG效价进行统计,表明IgM抗体效价较低,1:16出现的频次最高;IgG抗体效价较高,1:64出现的频次最高。各省市之间的抗体水平没有明显差异。     

2010—2011年宾川县麻疹IgM抗体检测结果分析

目的：通过IgM抗体检测结果,分析宾川县麻疹有效接种率状况,为预防和消除麻疹提供科学依据。方法：采用描述流行病学方法对宾川县2010-2011年麻疹IgM抗体检测资料进行统计分析。结果：宾川县2010-2011年共检测麻疹血液标本781人份,其中麻疹IgM抗体阳生率95.51%,7～10岁组阳性率最高达96.36%,0～1岁组阳性率最低为94.56%。结论：宾川县近年来麻疹疫苗免疫接种工作成效明显,人群麻疹IgM抗体处于一个较高水平,下一步要继续抓好麻疹基础免疫接种工作,注重接种质量和效果,消除人群免疫空白,提高人群麻疹抗体水平。     

改进双抗夹心ELISA用于筛选单抗杂交瘤细胞株

本文利用改进双抗夹心ELISA筛选一种可测定血清样品中与血浆蛋白结合的蛋白质药物的单抗。用兔抗K102多抗经亲和层析纯化并包被后,加入用10%猴血浆PBS还原后的抗原K102,再加入杂交瘤细胞株上清液和HRP-羊抗鼠IgG、底物反应液筛选阳性单抗杂交瘤细胞株。结果用改进后的双抗夹心ELISA筛成功地选出6株能稳定分泌针对K102的单抗杂交瘤细胞株,分别命名为1C9、2D7、3E2、5F4、5F6、6B9;细胞株产生的单抗用ELISA法能检测出血清样品中的K102的浓度。提示改进的双抗夹心ELISA可用于针对与血浆蛋白结合的蛋白质药物的单抗杂交瘤细胞株的筛选。     

大理地区精神病患者弓形虫感染情况调查

目的：了解大理地区精神病患者弓形虫感染情况,探讨弓形虫感染与精神疾病之间的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验对219例精神病患者及91例健康体检者进行血清弓形虫IgG抗体检测。结果：精神病患者弓形虫抗体阳性率为31．96％,健康体检者为20．88％,两者之间差异显著（P〈0．05）。结论：本地区精神病患者弓形虫抗体阳性率高于健康人群。临床医务工作者应加强对弓形虫病的认识,重视精神病患者的弓形虫感染情况．对门诊和住院病人进行常规弓形虫检测。     

免疫球蛋白IgG和IgM分离纯化技术现状与展望

抗体是动物有机体在抗原刺激下产生的具有抵抗外源物质侵袭的生物活性物质,是大分子糖蛋白,是免疫学研究和临床应用较多的物质,研究与应用都要求较高的纯度和生物活性,这对此类物质的分离纯化提出了很高要求.文章以IgG和IgM为目标抗体,重点阐述了其纯化技术,比较分析了各种方法的应用范围、优化条件及优缺点,以期为今后分离纯化IgG和IgM提供参考.     

心肌肌钙蛋白I-C复合物酶联免疫检测方法的建立

为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3G9.三株杂交瘤细胞中6G3和6A6为IgG1,3G9为IgG2b,腹水效价分别为4×10-5,4×10-5和10-5.亲和常数为5.0×109,6.4×109和3.8×109mol-1.Westernblotting结果表明6G3和6A6能够识别cTnI-C复合物.把6G3抗体生物素化并制备抗cTnI、cTnC和cTnI-C的大鼠多克隆抗体.以多抗作为固相捕捉抗体,生物素化6G3抗体作为检测抗体,建立检测cTnI的双抗体夹心ELISA方法并初步应用于临床病人标本检测.以cTnI-C复合物多抗捕捉检测方法具有良好的灵敏度、特异性和准确性,灵敏度为0.9ng/mL,较包被其他抗体捕捉方法提高1~2倍.批内变异系数为5.03%,回收率为94.56%.测定17例AMI病人和18例血清样本临床诊断结果符合率为100%.     

特异性抗体和特异性免疫复合物的检测对结核病的诊断意义

以ＥＬＩＳＡ检测１０８例活动性肺结核、３９例稳定期肺结核、３０例肿瘤、１０１例非结核性肺部疾病患者及２０２例正常人血清的抗结核菌纯蛋白衍生物（ＰＰＤ）ＩｇＧ抗体（简称抗－ＰＰＤ）和循环免疫复合物（ＣＩＣ）中的抗－ＰＰＤＩｇＧ抗体（简称ＣＩＣ－ＰＰＤ）。结果表明，活动性肺结核患者的抗－ＰＰＤ和ＣＩＣ－ＰＰＤ水平明显高于正常人和各疾病组患者的水平（Ｐ＜０．００１），但与其病变范围无关。单一测定活动性肺结核患者的抗－ＰＰＤ，敏感性为８５．２％，特异性为９８．５％；测定ＣＩＣ－ＰＰＤ，敏感性为８６．１％．特异性９６．９％。以两者任一项阳性作为诊断活动性肺结核的标准，则敏感性为９３．５％。此外，对１１例活动性肺结核患者的动态观察表明，随着治疗天数的增加和临床症状的改善，患者的抗－ＰＰＤ和ＣＩＣ－ＰＰＤ水平会逐渐降低，前者于治疗后第２０～２４周降至正常水平，后者则于治疗后第１２～１６周降至正常值。研究结果提示测定患者的抗－ＰＰＤ和ＣＩＣ－ＰＰＤ的水平，可用于结核病诊断，对结核病的疗效判定亦有帮助。