坚强芽孢杆菌B-305对3种病原真菌抗生现象的研究

从土壤中分离纯化出一株拮抗作用强而稳定的坚强芽孢杆菌(B-305),经对扣试验证明,其挥发性代谢产物对立枯丝核菌、腐皮镰孢菌、腐霉菌的抑制率分别为8.43%、9.89%、5.59%;其发酵液中存在抑制立枯丝核菌、腐皮镰孢菌、腐霉菌3种病原真菌生长的非挥发性物质,在第3天或第2天(镰孢菌)的发酵滤液表现出较强的抗菌活性,上述3种病原在含有这些发酵液的培养基中培养64 h后,其抑制率分别为64.04%、29.58%、99.99%;扫描电镜观察表明:B-305菌株的非挥发性代谢产物抑制了立枯丝核菌的生长,其中菌丝端部和中部明显膨胀,呈椭球状和球状,部分菌丝有断裂现象,许多菌丝皱缩干瘪发生折叠,内含物外泄.     

植物提取物对草莓根腐病病原真菌的抑制作用

利用4种葱属植物(大蒜、韭菜、洋葱、葱、)的水提物和8种常见中草药(丁香、大黄、黄连、连翘、生地、桔梗、生姜、花椒)的水煎剂对引起草莓根腐病的2种主要病原真菌进行了体外抑制实验.结果表明:大蒜和韭菜的水提物以及丁香和大黄的水煎剂在较高浓度下对立枯丝核菌和胶胞炭疽菌均有较强的抑制作用,在较低浓度下则无明显影响或有轻微的促进病菌生长的作用;连翘的水煎剂在多种浓度下均只对胶胞炭疽菌有极强的抑制作用,对立枯丝核菌无明显影响.     

棘孢木霉生物防治相关代谢产物研究

对棘孢木霉生物防治相关代谢产物进行了研究.细胞壁水解酶几丁质酶、外切β-1,3-葡聚糖酶、N-乙酰-氨基葡萄糖苷酶和纤维素酶在不同碳源诱导条件下,都随时间的延长而增加;在立枯丝核菌细胞壁为碳源时,在诱导后期四种水解酶活性都迅速增加,说明立枯丝核菌细胞壁水解物能诱导四种细胞壁水解酶.棘孢木霉代谢产物对病原菌尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、杨树烂皮病菌和杨树叶枯病菌都有抑制作用,对立枯丝核菌,尖孢镰刀菌和杨树叶枯病菌的抑制作用较强,对杨树烂皮病菌的抑制作用较弱.最后对棘孢木霉代谢产生的6-戊基-α-吡喃酮进行了测定,其代谢产量为1.32 mg/g菌丝干重.     

蝴蝶兰根腐病及根际真菌的种类鉴定

2010 -2011年从福建省蝴蝶兰腐烂根部及周围介质中分离鉴定出8个属12种真菌,分别为:立枯丝核菌Rhizoctonia solani、茄病镰孢Fusarium solani、尖孢镰孢F.oxysporum、禾谷镰孢F.graminearum、康氏木霉Trichderma koningii:、长枝木霉T.longibrachiatum、哈茨木霉T.harzianum、盘多毛孢Pestalotia sp.、多主枝孢霉Cladosporium,herbarum、常现青霉Penicillium frequentans、拟青霉Penicilomyces sp.和匍枝根霉Rhizopus stolonifer.立枯丝核菌、茄病镰孢和尖孢镰孢为优势菌,分别占分离物总株数的26.19%、15.71%和10.95%.伤口接种实验表明,3种优势真菌均能侵染蝴蝶兰根系引起腐烂.     

3种海藻的粗蛋白对植物病原真菌的抑制作用

以圆弧青霉(Penicillium cyclopium)、绿色木霉(Trichoderma viride)、红色链孢霉(Neurcsporacrassa)、玉米大斑病菌(Helminthosporium turcicum)、稻瘟病菌(Piricularia oryzae)和黄曲霉(Aspergillusflavus)等6种植物病原真菌为供试菌,检测了3种海藻(铁钉菜Ishige okamurae、羊栖菜Sargassum fusiforme、冈村凹顶藻Laurencia okamurai)的粗蛋白对它们的菌丝生长及孢子萌发的影响.实验表明,3种海藻的粗蛋白对6种真菌的菌丝生长及孢子萌发的作用效果不同,其中冈村凹顶藻粗蛋白对红色链孢霉菌丝的生长,羊栖菜粗蛋白对稻瘟病菌孢子的抑制作用最明显,而羊栖菜和铁钉菜粗蛋白对红色链孢霉的菌丝生长,冈村凹顶藻粗蛋白对绿色木霉及黄曲霉的孢子萌发均无抑制效果.3种海藻的粗蛋白能凝集兔血红细胞,表明它们当中含有凝集素.     

松材线虫病死木中真菌和细菌的分离

从来自江苏省和浙江省几个疫区的松材线虫(PWN)病病死木的木质部中分离出111个真菌菌株，经鉴定种类为木霉(Trichoderma spp．)、轮枝霉(Verticillium spp．)、青霉(Penicillium spp．)、镰孢霉(Fusarium spp．)、曲霉(Aspergillus spp.)、毛壳菌(Chaetomium spp．)、茎点菌(Phoma spp．)、短梗单孢霉(Dicoccum sp．)、头孢霉(Cephalosporium sp．)、交链孢霉(Alternaria sp．)，这些真菌约占分离真菌总数的60％；在43％的未鉴定菌中，除3个菌株为有孢菌外，其余均是无孢菌。可以分离出真菌的病死木占56．42％，从病死木中可分离出细菌的比例达86％，可同时分离到真菌和细菌的比例为43．6％。     

氨基酸铜对6种植物病原真菌生长的抑制作用

用含不同浓度甘氨酸铜、复合氨基酸铜的培养基培养大丽轮枝菌、尖孢镰刀菌、长蠕孢类病菌、灰葡萄孢菌、贝伦格葡萄座腔菌,考察氨基酸铜对几种植物病原真菌生长的抑制作用.结果表明甘氨酸铜、复合氨基酸铜均有一定的抑菌作用,其中甘氨酸铜作用效果较好.     

粗糙脉孢菌BenR基因在哈茨木霉中的定点转化

以β2-微管蛋白基因为定点整合位点,通过原生质体法将多菌灵抗性基因转化到哈茨木霉中,获得了具有多菌灵抗性的生物防治工程菌株．多菌灵抑制抗性转化子菌丝生长的ECso值达471．26μg／mL,比哈茨木霉原菌株提高1200倍以上;转化子对多菌灵的抗性具有遗传稳定性,且在无选择压力下菌丝生长速度及菌落形态与原菌株无显著差别;抑菌活性检测结果表明,3个转化子对立枯丝核菌均具有较强的抑菌活性,对菌丝生长的抑制率分别为87．5％、86．3％和85％．     

短小芽孢杆菌LYMC-3菌株对拟茎点霉的拮抗作用

【目的】短小芽孢杆菌LYMC-3菌株对稻瘟病、黄瓜枯萎病及棉花黄萎病等具有显著的防治效果,测定LYMC-3菌株对8种植物病原真菌的抑菌活性,检测其抑菌谱,为其推广应用提供依据。【方法】采用平板对峙法测定LYMC-3菌株对松球壳孢菌(Sphaeropsis sapinea)、松树脂溃疡病菌(Fusarium circinatum)、金黄壳囊孢菌(Cytospora chrysosperma)、拟茎点霉(Phomopsis macrospora)、七叶树壳梭孢菌(Fusicoccum aesculi)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis theae)、山茶炭疽菌(Guignardia camelliae)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothiorella)8种植物病原真菌的抑菌活性,筛选出抑菌活性最强的病原真菌,进行菌丝生长和孢子萌发抑制试验。【结果】LYMC-3菌株对8种供试植物病原真菌均有抑制作用,抑菌带长度及抑菌活性大小依次为:拟茎点霉>拟盘多毛孢>葡萄座腔菌>松球壳孢菌>七叶树壳梭孢菌>金黄壳囊孢菌>松树脂溃疡病菌>山茶炭疽菌。LYMC-3菌株发酵滤液对拟茎点霉菌丝生长的抑制率为70.36%,对其分生孢子24 h萌发抑制率为88.16%。【结论】短小芽孢杆菌LYMC-3菌株抑菌谱广,其发酵滤液对拟茎点霉有较强的拮抗作用。     

针叶树苗圃病虫鼠害综合防治技术

苗圃病虫害防治是保证育苗成功 ,为造林绿化提供优良苗木的重要措施 ,特别是在国家实施退耕还林 (草 )和西部大开发战略之后 ,使西部各省育苗规模得到前所未有的迅猛发展。同时随着气候、生物因子及其他方面的不断变化 ,这几年苗圃病虫鼠害到处猖獗发生 ,给育苗工作带来很大困难。为此 ,笔者结合苗圃病虫鼠害的防治 ,对甘肃南部针叶树苗圃主要病虫鼠害做了全面调查和防治试验 ,现将结果综述如下 :1　针叶树苗圃主要病虫鼠害种类1.1　病害种类　据在甘肃白龙江林管局各林场苗圃、莲花山自然保护区苗圃和临洮县杨家湾针叶树苗圃中调查 ,针叶树苗圃的病害有八种 ,主要是松苗立枯病。该病主要发生在一年生以下的幼苗上 ,发病率在 2 0 %以上 ,个别年份达 60— 70 %。该病根据为害时期不同 ,分为种芽腐烂、茎叶腐烂、幼苗猝倒和苗木立枯四个类型 ,其病原菌主要是茄丝核菌 (ＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａＳｏｌａｎｉＫｔｉ ｈｎ)、镰孢霉 (茄腐皮镰孢霉ＦｕｓａｒｉｕｍＳｏｌａｎｉＭａｒｔｉｕｓＡＰＰ .ｅｔ.Ｗｏｌ ｌｅｎｗ和尖镰孢霉Ｆ .ＯｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌｅｃｈｒ)和腐霉 (瓜果腐霉Ｐｙｔｈｉｕｍａｐｈａｎｉｄｅｒｍａｔｕｍ(...     

28种植物样品提取物离体抑菌作用测定

在植物干样的质量浓度为0．1g／ml的条件下，用生长速率法测定了28种植物样品丙酮提取物对小麦赤霉病病菌(F．graminerum Schw．)、油菜菌核病病菌(S．sclerotiorum)、水稻纹枯病病菌(R．solani Kohn．)、番茄灰霉病病菌(B．cirerea Pets．)和棉花黄萎病病菌(V．dahliae)离体抑菌活性．结果表明，酸模(Rumex acetosa L．)、冬青(Hex chinensis Sims)、菝葜(Smilax china L．)、鹅掌楸(Liriodendron chinense Sarg．)、银杏(Ginkgo biloba L．)、槐树(Sophora japonica L．)等12种植物样品对至少其中1种供试植物病原菌的抑制率在60％以上，表现出较强的抑菌作用，其中菝葜对4种供试病原菌的抑制率均大于60％，活性更为突出．     

南澳大利亚丝核菌抑病土中细菌与放线菌的分离及其对病害的生物防治作用

从南澳大利亚埃文采集的土壤样品中计数分离了细菌和放线菌,该土壤对Rhizoctonia．solani融合群8引起的小麦根腐病具有抑制作用。统计了分离物中对R.solani AG-8菌株2l有拮抗作用的百分比。热处理(60℃,10min)能够消除土壤的抑病能力,可显著减少土壤中细菌和放线菌的数量,但是并不改变对病原菌有抑制作用的分离物的总体百分比。依据对R.solani AG-8菌株21,Gaewuarunomyces graminis var．tritici(Ggt)菌株8,Fusarium graminearum菌株Fg,Verticillium dahliae菌株Vd5,Bipolaris sorokiniana菌株Bs,Pythium irregulare菌株BH40,以及引起棉花猝倒病的Rhizoctonia solani solani AG-4菌株1664的抑菌能力,自2700个菌株中筛选了9个最强拈抗菌株;其中7个菌株能够产生几丁质酶,或者产生内切葡聚糖酶,而几丁质酶活性与生物防治效果具有相关性。这9个菌株鉴定为Bacillus megaterium(菌株Ap25),B．subtilis(菌株Ap113),Streptomyces spp．(菌株Ap117),Bocillus coagulans(菌株Ap123),Streptoverticillium reticuIum(菌株Ap89),Cellulomonas flavigena(菌株ApT5),以及放线菌(菌株Ap116,Ap111和Ap139)．B．megaterium Ap25 and B．subtilis Ap113对小麦根腐病及全蚀病的防治效果以及刺激小麦生长的作用最强。这两个菌株能够在平板上抑制一种分离自同一土样的有益菌Trichoderma pseudokoningii菌株ASMH的生长,但对该木霉菌的生物防治效果及其刺激植物生长的作用没有明显削弱。     

一株生防烟管菌几丁质酶表达及抗真菌活性

为了探究烟管菌BK-1的生物防治潜力,本研究测试了一株具有生防菌活性的烟管菌BK-1的抗病效果,并使用RT-qPCR分析了该菌株的8个细胞壁裂解酶基因在与不同病原真菌对峙培养中的表达水平,结果表明,在应对链格孢、茄链格孢、尖孢镰刀菌和灰葡萄孢这4种病原真菌时,几丁质酶基因BaCHIB表达上调了27.3至50.3倍,远高于其他7个基因.BaCHIB属于糖苷水解酶18家族(GH 18),并具有Chic_BD结构域,属于B类几丁质酶(CHIB).结合基因表达谱分析,该基因诱导表达上调情况的出现与抗病效果的出现高度同步.外源表达蛋白BaCHIB显示出较高的几丁质酶活性,且表现出对多种植物病原真菌,包括链格孢,链格孢和灰葡萄孢显著的抗真菌活性,显示其对部分病原真菌具有拮抗能力.     

7种植物提取物对几种病菌生物活性的初步研究

以7种植物丙酮提取物为材料,测定了其对几种病菌的生物活性.结果表明:在供试质量浓度为0.1g／mL时,马尾松粗提物对杨树溃疡病菌和番茄早疫病菌的菌丝生长抑制率均在60％以上,对其它3种病菌的抑制率均在50％左右.马尾松作为植物源杀菌剂值得进一步研究.     

新疆五种特色植物提取物抑菌活性初步研究

采用生长速率法测定了阿魏等5种新疆特色植物提取物对10 种常见植物病原菌的抑菌作用.结果表明：有5种植物均表现一定程度的抑菌活性,其中阿魏提取物活性最好,且抑菌谱较广;在0.01g/mL的浓度下,对小麦纹枯病菌、番茄早疫病菌、番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、苹果干腐病菌、苹果霉心病菌等6种植物病原菌72h都有较好的抑制作用,抑制率都在90%以上;其中对番茄灰霉病菌抑菌效果最好,达100%.在0.05g/mL的浓度下,72h抑制效果都有所降低,但都在53.70%以上.     

鄂尔多斯半日花粗提物对七种植物病原菌的抑菌性

为了探讨鄂尔多斯半日花的保护措施及其科学利用价值,测定了该植物6种不同溶剂的粗提物在100g/L时对番茄镰刀茎病菌、稻曲病菌、棉花黄萎病菌V991、黄瓜黑星病菌、芦笋茎枯病菌、葡萄炭疽病菌和苹果黑星病菌7种植物病原菌的抑菌活性.结果表明,乙酸乙酯粗提物的总体抑菌效果最好,对番茄镰刀茎病菌、棉花黄萎病菌V991和黄瓜黑星病菌的抑菌活性很强,抑菌率均高达100%,对稻曲病菌亦达80.1%; 水煮粗提物对5种植物病原菌抑菌活性较强; 6种粗提物对芦笋茎枯病菌的抑菌活性普遍偏低.     

鄂尔多斯半日花提取物对4种植物病原菌的抑菌性

按照极性的高低用6种溶剂对鄂尔多斯半日花进行活性物质提取，以生长速率法测定了半日花6种提取物对棉花黄萎病菌V43-1、扩展青霉病菌、梨黑斑病菌和棉花枯萎病菌的抑菌活性．结果表明，不同溶剂提取物的抑菌活性差异很大，其中乙酸乙酯提取物的综合抑菌效果最好，对棉花黄萎病菌V43-1和棉花枯萎病菌的抑制作用高达100％，对梨黑斑病菌最低也达74％；其次，水煮膏的抑菌率也较高，其他几种有机溶剂提取物的抑菌效果明显低于上述两种．不同浓度乙酸乙酯提取物对4种菌的抑菌效果表明，对棉花黄萎病菌V43-1的抑菌效果最好，最低抑菌浓鹰约为5g／L．     

加工番茄促生拮抗菌的筛选及其抑菌效果测定

针对新疆加工番茄病害发生普遍且为害严重的问题,进行了促生拮抗菌的分离筛选及其促生和抑菌效果的研究.从新疆各加工番茄主产区采集健康加工番茄植株根际土壤164份,共分离纯化得到细菌及放线菌分离物1029个,经室内一次筛选和二次筛选得到54株对番茄立枯丝核菌具有强拮抗作用的细菌菌株.促生试验表明,这54个细菌菌株中有6株细菌能提早加工番茄种子的发芽时间和提高加工番茄的发芽率,并对发芽后植株的株高、株鲜重和地上部干重的提高都具有明显的促进作用.盆栽接菌试验表明,有5株拮抗菌防治立枯病的效果较好,其中SL-23菌株的防治效果为46.96%,优于五氯硝基苯拌种的防治效果.5株拮抗细菌都对病原真菌立枯丝核病菌（Rhizoctonia solani）、早疫病菌（Alternaria solani）、枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici）、疫霉病菌（Phytophthora capsici）、菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）和病原细菌番茄细菌性疮痂病菌（Xanthomonas vesicatoria）有较强的抑制生长的作用,抑菌谱较为广泛.