应激对神经内分泌系统影响的研究进展

应激是机体受到强烈刺激后发生的 ,以交感神经 -肾上腺髓质和垂体 -肾上腺皮质功能增强为主要特点的非特异性反应 .本文综述了下丘脑 -垂体 -肾上腺 (HPA)轴 ,下丘脑 -垂体 -甲状腺 (HPT)轴 ,下丘脑 -垂体 -生长 (HPS)轴 ,下丘脑 -垂体 -性腺 (HPG)轴等神经内分泌轴系在各种应激条件下的变化情况及其研究进展 .     

大鼠束缚-浸水应激不同时间段下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴c-Fos蛋白的表达

研究大鼠束缚-浸水应激过程中下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴c-Fos蛋白表达的时空模式.分别给予雄性大鼠束缚-浸水应激0、30、60、120、180min,0 min作为对照组,然后用免疫组化技术检测HPA轴中c-Fos蛋白的表达.与对照组相比,应激30、60、120、180min组下丘脑室旁核、腺垂体中的c-Fos阳性细胞数显著增多(P<0.05),但对每一部位来说,这4个不同时间段c-Fos舶蛋白的表达均无明显差异.5组大鼠的肾上腺皮质束状带中均未观察到c-Fos蛋白的表达.这些结果提示室旁核和腺垂体参与束缚-浸水应激反应.     

R9-FOXM1(1-234aa)重组蛋白批量纯化及其抑瘤效应研究

通过基因工程构建重组表达质粒pET15b-R9-FOXM1(1-234aa),转化大肠杆菌建立构建表达R9-FOXM1(1-234aa)的菌株.采用原核表达系统和His-tag亲和纯化手段,规模化制备纯化穿膜肽R9-FOXM1(1-234aa),获得的蛋白的纯度达到90%以上.用R9-FOXM1(1-234aa)穿膜肽处理不同的肿瘤细胞,通过MTT实验研究其细胞效应.结果显示:当R9-FOXM1(1-234aa)穿膜肽的浓度达到2mM时,肿瘤细胞的死亡率为50%左右.实验表明穿膜肽R9-FOXM1(1-234aa)抑制不同肿瘤细胞的生长,有可能成为治疗肿瘤的潜在蛋白类药物.     

CRH在大鼠脑内不同区域表达的研究

目的:探讨促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)免疫阳性神经元在大鼠脑内不同部位的分布及其特征。方法:用免疫组织化学方法,采用ABC法并通过硫酸镍铵加强呈色和荧光免疫法,在光镜和激光共聚焦显微镜水平观察SD雄性大鼠CRH免疫阳性神经元在大鼠脑内不同部位的表达。结果:CRH神经元多为非锥体形神经元,细胞直径为10~15μm,在胞浆和轴突表达;大鼠的下丘脑室旁核、杏仁核、大脑皮质的前额叶部和其他部分都有分布;在下丘脑室旁核和杏仁核内呈簇团分布,大脑皮质内的Ⅰ~Ⅵ层均有分布,其中Ⅱ、Ⅲ层相对较多,Ⅰ层次之,Ⅳ、Ⅴ层较少,Ⅵ层偶见。结论:大鼠脑内广泛区域分布着CRH神经元,其对应激过程机体的自主神经和情绪行为反应的调节是否仅仅通过下丘脑-垂体-肾上腺轴实现,值得进一步研究和关注。     

鲑点石斑鱼细菌病原的分离鉴定和致病性

对海南省三亚地区网箱养殖的发病鲑点石斑鱼 (Epinephelusfario)进行病原分离 ,通过常规细菌学鉴定和应用ATB半自动鉴定系统及VITEK_AMS_6 0自动微生物鉴定系统 ,并与有关的标准菌株为对照 ,鉴定为溶藻弧菌 (Vibrioalginolyticus)。小鼠毒性实验和不同方式感染鲑点石斑鱼实验的结果表明 ,该菌对小鼠有极强的毒力 ,不同感染方式感染鲑点石斑鱼表现不同程度的致病性。同时测定了溶藻弧菌对小鼠和鲑点石斑鱼的LD50 分别为 3 2× 10 5个 /mL和 2 1× 10 7个 /mL。进一步比较溶藻弧菌对青石斑鱼 (Epinephelusowoara)、真鲷 (Pagrosomusmajor)、平鲷 (Rhabdosargussarba)、黑鲷 (Sparusaurata)、红鳍笛鲷 (Lutjanuserythopterus)、黄斑蓝子鱼 (Siganusoramia)等一些常见海水养殖鱼类的致病性 ,该菌能导致不同海水养殖鱼类死亡并表现一定程度的症状。     

槟榔十三味丸对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响观察

目的：观察槟榔十三味丸对抑郁模型大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴的影响,探讨其抗抑郁作用及机制.方法：将40只SD雄性大鼠,根据蔗糖水消耗量及体重随机分成4组：空白对照组、慢性应激抑郁模型组、阳性药氟西汀组、槟榔十三味丸中剂量组,每组10只.除空白对照组外,其余均采用慢性不可预见性应激刺激加孤养诱导产生抑郁模型,造模同时ig给药,每日1次,连续给药21 d,各组均按10mL.kg-1给药,空白对照组、模型组ig等量去离子水.21 d后,采用敞箱实验、糖水消耗量检测和体重测量等指标评定大鼠行为学改变,并用放射免疫法检测大鼠下丘脑CRH,垂体ACTH和血清CORT的含量.结果：与空白对照组比较,模型组大鼠水平穿越格数、竖立次数、糖水消耗量、体重明显降低（P〈0.01或P〈0.05）;与模型组比较,阳性药氟西汀组、槟榔十三味丸中剂量组水平穿越格数、竖立次数、糖水消耗量、体重明显升高（P〈0.01）;放射免疫检测结果显示,与空白对照组比较,模型组大鼠下丘脑CRH,垂体ACTH和血清CORT的含量明显升高（P〈0.05或P〈0.01）;与模型组相比,阳性药氟西汀组、槟榔十三味丸中剂量组下丘脑CRH,垂体ACTH和血清CORT的含量明显降低（P〈0.05或P〈0.01）.结论：槟榔十三味丸可改善慢性应激抑郁模型大鼠行为学,具有一定的抗抑郁作用,并且抑制抑郁模型大鼠HPA轴的激活是槟榔十三味丸治疗抑郁症的机制之一.     

罗红霉素荧光光度法测定铬(Ⅵ)的研究

基于铬(VI)对荧光试剂罗红霉素的荧光熄灭作用,建立了测定微量铬(VI)的荧光分析方法.选用pH为6.10的HAc-NaAc缓冲溶液,最大激发与发射波长分别为264.0 nm和393.0 nm,罗红霉素质量浓度为0.13g/L的条件下,相对荧光强度与lgc呈良好的线性关系,测定铬(VI)浓度的线性范围为(3.10×10~(-1)-1.12×10~(-3))mol/L,检出限为1.87×10~(-6)mol/L,相对标准偏差为1.06%(n=11),加标回收率为95.8%-98.9%.该法具有良好的选择性,可直接用于测定环境水样中的铬(VI)含量.     

一个新的下丘脑-胰岛轴血糖调解系统激素分泌的非线性动力学模型

提出了一个新的下丘脑-胰岛轴血糖调节系统激素分泌的非线性动力学模型.该模型能够合理地描述健康人群胰岛素、胰升糖素对血糖的调节作用以及这些激素随时间演化的动力学规律.仿真模拟口服葡萄糖耐量实验(OGTT)结果表明,该模型是一个更加符合人体生理实际的血糖调节模型.     

橄榄苦苷对染砷小鼠大脑神经免疫相关基因表达的影响

为了研究橄榄苦苷(OP,oleuropein)对染三氧化二砷(As_2O_3)小鼠大脑神经免疫相关基因表达的影响.将昆明小鼠随机分成对照组、As_2O_3组和As_2O_3+OP组,按不同方式灌胃,连续5周后,利用基因芯片技术来评价OP对染砷小鼠大脑神经免疫相关基因表达的影响.与对照组比较,As_2O_3组小鼠大脑白细胞介素(IL, interleukin)家族基因IL-3、IL-10、IL-11、IL-1a、IL-15、IL-20、IL-23a、IL-31、IL-1f6、IL-13、IL-25和IL-24表达下调,IL-17d表达上调;白细胞介素家族受体基因IL-13受体α1(IL-13ral)和IL-2受体γ链(IL-2rg)表达上调,IL-17受体C (IL-17rc)表达下调;下丘脑-垂体-肾上腺轴受体相关基因精氨酸加压素(Avp)、精氨酸加压素受体1B(Avpr1b)、精氨酸加压素受体1A(Avpr1a)、精氨酸加压素受体2(Avpr2)、促肾上腺皮质激素释放激素受体1(Crhr1)、促肾上腺皮质激素释放激素受体2(Crhr2)表达下调,促肾上腺皮质激素释放激素(Crh)和阿黑皮素原α(Pomc1)表达上调.经OP干预后,As_2O_3致小鼠的神经免疫毒性明显减轻,大脑组织白细胞介素家族部分基因和下丘脑-垂体-肾上腺轴受体相关基因的表达水平与对照组表达无差异.OP可降低As_2O_3对小鼠神经免疫的毒性,其机制与影响大脑组织白细胞介素家族部分基因和下丘脑-垂体-肾上腺轴受体相关基因的表达有关.     

自杀的生物学因素研究现状

自杀是心理、社会和生物诸因素相互作用的结果。目前研究涉及的生物学因素可分为遗传因素和生化因素。近年来自杀的分子遗传学研究发现某些相关基因与自杀可能存在关联,其中研究最多的是5-HT系统的自杀候选基因。目前研究较多的是神经生物学方面,其主要生化因素包括血清素、去钾肾上腺素(NE)、其他神经递质、胆固醇、下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴。     

毛细管气相色谱法同时测定辛酰溴苯腈复配除草剂中各有效成分的含量

采用OV1701石英毛细管色谱柱和FID检测器,以二十二烷为内标物,同时测定辛酰溴苯腈复配除草剂中各有效成分的含量.最佳色谱条件为:柱箱采用程序升温,220℃恒温3min,以40℃/min升至280℃,恒温4.5min,汽化室温度250℃,检测室温度250℃,载气(N2)1mL/min,燃气(H2)30mL/min,助燃气(Air)350mL/min,分流比1:80.回归方程分别为:Y(辛酰溴苯腈)=1.941X+0.2300、Y(辛酰碘苯腈)=2.460X+0.3080和Y(2,4-滴丁酯)=2.116X+0.1075,相关系数分别为0.9996、0.9991和0.9992.平均回收率98%-101%,标准偏差0.09-0.46,变异系数0.08%-1.8%.该方法简单、快速、准确、高效,适用于同时测定辛酰溴苯晴复配除草剂中各有效成分的含量.     

超声-光催化还原铬(Ⅵ)和铜(Ⅱ)废水的研究

以钛酸四正丁酯为钛源,采用溶胶-凝胶法在颗粒活性炭表面合成TiO2前驱体,隔绝空气程序升温制得负载型光催化剂TiO2.利用超声-光催化技术,探寻在废水中还原去除铬(Ⅵ)和铜(Ⅱ)的最佳条件以提高催化效率.结果表明:反应条件在pH值为5,光催化反应时间大于40 min,催化剂的加入量为4 g/L时效果最好,建议使用在500℃下焙烧2 h的光催化剂,可适当延长反应时间以提高铬(Ⅵ)、铜(Ⅱ)去除率.在最佳条件下,与无超声相比,利用超声-光催化技术对铬(Ⅵ)、铜(Ⅱ)的还原去除率分别可提高39.32%和53.78%.     

下丘脑-垂体-睾丸轴激素的振荡行为与非线性动力学模型

提出了一个新的下丘脑垂体一睾丸轴激素分泌的非线性动力学模型.该模型修改了以往模型中的动力学特征参量,考虑了催乳素(prolactin,PRL)等激素对性腺系统的影响以及与体内相关激素的相互作用,得到了系统内各激素浓度的振荡解与实验相符,能较好地说明该系统中性腺激素睾酮的脉冲分泌现象.     

整肤疗法对运动性疲劳大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

[目的]观察整肤疗法对运动性疲劳大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响,以探索整肤疗法对中枢神经系统的作用机制.[方法]将40只SD雄性大鼠随即分成安静对照组、运动后即刻处死组、运动后自然恢复组及运动后整肤治疗组.除安静组外,其余组游泳运动至疲劳,即刻组立即处死取下丘脑,自然恢复组休息30min,整肤疗法组施以整肤治疗(提拉皮肤刺激)30min,两组均断头处死取出下丘脑,采用高效液相色谱一电化学检测法检测各组大鼠下丘脑中5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)水平.[结果]大鼠运动性疲劳后,下丘脑中的5-HT水平明显升高,DA水平则较明显降低;经过整肤治疗后,5-HT和DA水平虽然变化不明显,但是5-HT水平比自然恢复组低,DA水平已经比运动后即刻略有回升.[结论]整肤疗法在短时间内对运动性疲劳大鼠下丘脑中5-HT和DA水平的影响不明显,但能看出有促进疲劳恢复的趋势.     

PC12细胞对急性缺氧耐受的体积调节

采用大鼠嗜铬细胞瘤克隆株PC12细胞研究了高渗(450mOsm)诱导对PC12细胞缺氧耐受的影响及其相关机制.在诱导培养3d后,PC12细胞的醛糖还原酶基因表达水平显著升高.急性缺氧24h后其乳酸脱氢酶(LDH)漏出率为(20.4±6.0)%,与正常对照组(17.5±7.0)%接近,而未诱导细胞的LDH漏出率为(49.6±13.8)%.经过诱导的PC12细胞其细胞体积的变化幅度相对较小,急性缺氧24h后,细胞体积增加为正常对照的3.6倍.而未诱导细胞的体积增大至正常对照的6.6倍.加入0.5mmol/L的奎尼丁阻断醛糖还原酶-山梨醇系统对效应分子山梨醇的释放后,急性缺氧24h其乳酸脱氢酶(LDH)漏出率达(83±2)%.以上结果提示高渗诱导后PC12细胞缺氧耐受能力提高,其保护作用可能与细胞体积调节机制有关.推测醛糖还原酶-山梨醇系统可能通过维持细胞体积的稳定,保护细胞结构的完整从而阻断了进一步细胞死亡发生的启动.     

高铁酸盐对偶氮类染料的降解脱色研究

以电化学法制备的高铁酸盐对甲基橙、酸性铬蓝、铬黑T等偶氮类染料进行降解脱色.实验结果表明,经高铁酸盐处理后,偶氮染料红外谱图的主要谱峰消失,代之以CO32-的振动吸收峰;紫外光谱分析表明,染料的特征吸收峰逐渐减小直至消失.经对比,发现复合混凝剂FeO42-/Al(OH)4-比FeO42-对染料有更佳的降解脱色效果.     

促性腺激素释放激素(GnRH)结构与功能及其受体的进化发展

促性腺激素释放激素是下丘脑分泌产生的神经激素,对脊椎动物生殖的调控起重要作用.自1971年从猪和羊的脑分离出GnRH以来,到目前GnRH家族至少已有24个类型,其中14种来自脊椎动物,10种来自无脊椎动物.除章鱼GnRH(octo GnRH)外,所有的GnRH肽都由10个氨基酸组成,其分子长度和部份氨基酸序列非常保守.每种脊椎动物都产生多种GnRH类型.无脊椎动物鉴别的10种GnRH类型、9种来自被囊类,1种是由12个氨基酸组成的章鱼GnRH.生理学研究表明GnRH和无脊椎动物的生殖功能有密切联系;此外,GnRH在一些无脊椎动物还起着性外激素的作用,刺激它们自行产卵.自克隆小鼠GnRH受体转录物以来,已在22种动物克隆32个GnRH受体cDNA,其中11种是哺乳动物,11种是其他脊椎动物.无脊椎动物只在果蝇鉴别出一种类GnRH受体.以鱼类为例,氨基酸序列分析表明鱼类的GnRH-R属于G-蛋白偶联受体家族(GPCRs)中视紫红质亚族中的β-亚群,它们由3个主要功能域组成,包括N-端细胞外功能域,7个跨膜功能域和C-端细胞质功能域.系统发生分析表明鱼类的GnRH-R主要有两个类型,即Ⅰ型和Ⅱ型;每个类型还包括2到3个亚型.编码不同的GnRH-R类型的基因,具有不同的基因结构.GnRH-R基因的表达主要集中在生殖系统及相关的器官与组织,但每种鱼类GnRH-R的不同类型与亚型在组织或细胞中的具体分布有所不同.     

针刺对焦虑障碍大鼠作用的部分机制研究

目的：分析针刺对焦虑障碍大鼠肾上腺心房利钠肽、C型利钠肽水平和血浆皮质酮含量的影响,探讨针刺治疗焦虑障碍的部分机制.方法选取SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、针刺组.模型组、针刺组大鼠建立慢性情绪应激刺激焦虑模型,针刺组同时针刺“内关”、“神门”,每2 d针刺1次,45 min/次,共15 d.空白对照组和模型组用相同方法固定,不做任何干预.使用高架十字迷宫观察大鼠行为学变化,计算进入开臂次数( OE)和停留时间( OT)分别占进入总次数和停留时间的百分比;ELISA法检测大鼠血浆皮质酮水平;免疫组化S-P法检测大鼠肾上腺心房利钠肽、C型利钠肽水平.结果针刺组大鼠OT值明显高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),与空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05);3组大鼠OE值之间差异均无统计学意义(P>0.05).模型组大鼠浆皮质酮含量明显高于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);针刺组大鼠浆皮质酮含量明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);针刺组与空白对照组之间差异无统计学意义(P>0.05).模型组大鼠肾上腺皮质和髓质中的心房利钠肽水平均低于空白对照组,C型利钠肽水平均高于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);针刺组大鼠肾上腺皮髓质心房利钠肽明显高于模型组,C型利钠肽明显低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05);针刺组肾上腺髓质心房利钠肽、C型利钠肽与模型组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论针刺可通过调节外周肾上腺髓质心房利钠肽、C型利钠肽水平,进而影响血浆皮质酮释放,抑制HPA轴活性,发挥抗焦虑作用.     

脑室注射r-氨基丁酸(GABA)对大鼠垂体-甲状腺分泌功能的抑制效应

脑室注射10μl含8molGABA的人工脑脊液后60min,大鼠血清TSH、T4、T3含量与注射人工脑脊液的对照组比显著降低(P<0.001、0.01、0.05);若在注射GABA前1min,预先注射10μl多巴胺受体阻断剂氟哌啶醇(5g/1)、10μl肾上腺素受体阻断剂酚妥拉明(10g/1)或10μlGABA受体阻断剂青霉素(3.35×10~(-2)mol/l),可以阻断GABA对TSH、T4、T3分泌的抑制效应.结果证明脑中GABA能系统参与垂体-甲状腺功能的调制,提示GABA通过多巴胺能和肾上腺素能神经元,抑制下丘脑分泌TRH,从而影响垂体分泌TSH,最终抑制了甲状腺的分泌功能.     

高速逆流色谱法一次性分离制备藏药蓝玉簪龙胆中的三个化合物

目的:通过高速逆流色谱法(HSCCC)从藏药材蓝玉簪龙胆中分离制备得到三个高纯度化合物.方法:选择乙酸乙酯-正丁醇-水(4:0.5:5,v/v/v)为二相溶剂系统,上下两相分别作为固定相、流动相,主机转速设置为900 r/min,流动相溶剂流速为2 m L/min,紫外检测波长为254 nm,柱温为20℃.所采集的组分减压浓缩后烘干得到龙胆苦苷、异荭草素、异牡荆苷,应用ESI-MS/MS分析鉴定,并用HPLC测定其质量分数.结果:在260 min内可一步纯化150 mg藏药材蓝玉簪龙胆水粗提物中的龙胆苦苷、异荭草素、异牡荆苷,三者完全分离,纯度分别达到98.2%、94.5%、96.0%.结论:利用高速逆流色谱法可快速、简单、高效地富集蓝玉簪龙胆中龙胆苦苷、异荭草素、异牡荆苷三种化合物.