电磁脉冲各参数对HeLa细胞可逆穿孔影响的研究

通过对HeLa细胞进行电磁脉冲处理,可以看到细胞膜电穿孔.穿孔的几率及深度与脉冲的各参数有关.细胞膜表面的微绒毛受到一定程度的损伤,还可见到火山形的喷口和喷出物.经实验研究,得到了在离体条件下HeLa细胞电穿孔的最佳电脉冲参数.     

电穿孔诱发细胞凋亡和提高抗癌药物细胞毒性的研究

作者报道了电穿孔可以诱发HeLa细胞凋亡 ,采用Giemsa染料、吖啶橙染色及Hoechst33342 ,PI双染的荧光染色 ,研究了电穿孔对HeLa细胞凋亡的影响 .以HeLa细胞和胎儿脐带血淋巴细胞为材料 ,进行了电穿孔提高抗癌药物细胞毒性的研究 ,为电化学疗法在体内实验的可行性提供了依据 .     

电穿孔——解释生物体中非热生物效应的关键机理

介绍了细胞膜电穿孔的形成过程和基本应用，报道了瞬态电磁脉冲和生物细胞相互作用的一些重要实验结果。采用电穿孔机理解释了细胞膜破裂的原因。     

细胞膜电穿孔的机理及应用前景的初步探讨

近年来,国内外众多学者就适当强度的脉冲电磁场作用下 生电穿孔的现象展开了机理研究与应用实践。文中介绍了细胞膜电穿孔现象产生的前提条件,并且从细胞膜的电特性和机械特性变化,分子结构的变化以及对微粒和离子的跨膜运输能力的影响这一个角度展开对细胞膜电穿孔特性的机理研究。同时还介绍了目送２细胞膜电穿孔特性在生物技术和临床医学等领域的广泛应用以及对其进行机理研究的重要意义,展示了电穿孔特性良好的应用前景。     

离子通过细胞膜过程中的能量变化分析与计算

通过建立简化的细胞模型，计算了不同离子穿过细胞膜所需的能量，并得到细胞膜出现微孔后离子穿过细胞膜所需能量大幅度减少的结果，对解释电穿孔产生的非热生物效应及进一步的生物医学应用都具有重大意义。     

家兔红血细胞电穿孔的特殊现象

采用低幅度瞬态电磁脉冲,在超宽频带横电磁波传输室中对家兔红血细胞进行照射,通过扫描电镜观察,发现低幅度瞬态电磁脉冲对家兔红血细胞的影响非常强烈,照射后许多细胞发生了电穿孔,穿孔率可达６０％左右,孔洞直径可达０．６－１．３μｍ,且电穿孔都发生在细胞膜的中心凹陷处。     

佛手叶挥发油对HeLa细胞形态与结构的影响

探讨了佛手叶挥发油对HeLa细胞形态与结构的影响.采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,倒置显微镜、荧光显微镜和电子显微镜观察细胞形态与结构的变化,免疫荧光结合激光共聚焦显微镜观察微管的分布.结果表明:佛手叶挥发油能够抑制HeLa癌细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;不同浓度的佛手叶挥发油处理HeLa癌细胞24 h后,低剂量(200μg/mL)佛手叶挥发油使HeLa细胞皱缩,染色质凝集,出现凋亡小体,微管解聚,表现为典型的凋亡特征;中、高剂量(400和800μg/mL)佛手叶挥发油使HeLa细胞膜裂解,内容物外泄,细胞碎片增多,表明细胞已坏死.     

利用低强度脉冲电磁场对家猪精子电穿孔的研究

用低强度脉冲电磁场对家猪精子细胞进行电击处理，发现台盼蓝染料能够进入细胞，而且通过扫描电镜可以观察到细胞膜表面有明显的孔洞。这证实了低强度瞬态电磁场能够引起猪精子细胞电穿孔和促使外源物质进入细胞内。     

利用电穿孔提高抗肿瘤药物细胞毒性的初步研究

作者运用电磁脉冲使细胞电穿孔并结合抗肿瘤药物观察细胞的毒性 ,比较了电穿孔组与对照组细胞的抗肿瘤药物胞质毒性的差异 ,发现电穿孔组比对照组的胞质毒性显著提高 .结果说明 ,利用电穿孔可提高抗肿瘤药物的细胞毒性 ,为治疗肿瘤提供了新的途径 .     

苏尼替尼对HeLa细胞中的CDK4的影响

以不同浓度的Sutent作用于HeLa细胞,采用MTT法检测Sutent对HeLa细胞增殖的影响.流式细胞术检测Sutent对HeLa细胞周期的影响;Western免疫印迹检测不同浓度的Sutent对HeLa细胞中CDK4蛋白表达的变化;探讨苏尼替尼(Sutent)对HeLa细胞中CDK4的影响.结果表明Sutent能够抑制HeLa细胞的增殖,引起HeLa细胞发生G2期周期阻滞,并且呈浓度依赖性降低HeLa细胞中CDK4蛋白表达量.显示了Sutent作为多靶点药物在药物研发中具有潜在的重要的研究价值.     

强电场脉冲致细胞膜电穿孔的观察

用强电场脉冲处理动物细胞后,可使小分子物质台盼蓝进入细胞内,通过扫描电镜观察到细胞膜上有电致孔洞,证实强电场脉冲能引起电穿孔,穿孔率较高,穿孔直径在0.05-1.5μm,经研究作者得到了较佳的实验条件,并得到了形态学证据初步分析了电穿孔形成的机理。     

电晕电场辅助5-Fu作用HeLa细胞的实验研究

探讨了电晕负静电场联合化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)对HeLa细胞生长、增殖及死亡的影响规律.以不同强度的电晕负静电场分别作用于正常体外培养的HeLa细胞和培养液中加有一定浓度5-Fu的体外培养的HeLa细胞,采用MTT法检测HeLa细胞活性,用流式细胞仪(FCM)检测细胞死亡率.发现单纯电晕电场既能促进HeLa细胞的生长(较低电压U≤2kV的条件下),激发了细胞活性,也能够抑制细胞的生长增殖(U≥6kV的条件下),提高细胞的死亡率.而任何强度的电晕电场与5-Fu同时作用,则对HeLa细胞只具有极大的抑制作用,而且对HeLa细胞具有更大的杀伤力,这种杀伤力随电晕电场强度的增加而增加.结果表明:不同强度单纯电晕负静电场对HeLa细胞生长产生不同的促进或抑制效应;电晕负静电场联合化疗药物5-Fu则增强了对HeLa细胞的毒性作用.     

脉冲电场作用下Hela细胞穿孔率研究

以宫颈癌Hela细胞为实验对象，利用自制脉冲电源和台盼蓝染色法计数，针对不同的电脉冲参数作用于Hela细胞上，研究了细胞可逆和不可逆电穿孔的场强阈值范围，重点研究了脉冲个数、脉冲宽度和电场强度对细胞不可逆穿孔率的影响，并选择了优化的参数组合。实验发现，在固定脉冲宽度50 μs和20个脉冲个数不变的情况下，Hela细胞出现可逆电穿孔（存活）的场强阈值范围分别为500～750 \begin{document}$ \mathrm{V}/\mathrm{c}\mathrm{m} $\end{document}，出现不可逆电穿孔（死亡）的场强阈值范围为750～1 000 \begin{document}$ \mathrm{V}/\mathrm{c}\mathrm{m} $\end{document}。在对电脉冲参数优化组合的实验中，Hela细胞的不可逆穿孔率随着脉冲个数、脉冲宽度和脉冲场强的增加而增加，最终趋于饱和。宜选择场强1 500 \begin{document}$ \mathrm{V}/\mathrm{c}\mathrm{m} $\end{document}、脉宽60 μs和70个脉冲的参数组合，不可逆穿孔率为93.42%。     

脉冲电场致细胞膜电穿孔的机理分析

从膜分子的角度,采用昂沙格有效电场分析外加脉冲电场作用对膜分子电势能和运动状态的影响,对脉冲电场致细胞膜电穿孔的机理做出解释.     

脉冲电磁辐射对癌细胞的影响

通过对HeLa细胞及艾氏腹水癌细胞进行电磁脉冲处理，可以看到照射后HeLa细胞较对照组有 明显变化，且变化随照射时间的增加逐步显现，加强。艾氏腹水癌细胞经脉冲电磁场照射后摄取3H-TdR 的量明显高于对照组，而且照射时间不同，对3H-TdR摄取量也不等。从而为电化学治疗癌病的理论研究 提供科学的依据。     

3-羟基丁酸对HeLa癌细胞生长与凋亡的影响

研究3-羟基丁酸对HeLa癌细胞生长与凋亡的影响.采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力;AO/EB荧光染色观察细胞凋亡与坏死的形态学变化;单细胞凝胶电泳检测细胞DNA的损伤;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡蛋白的表达.结果表明:3-羟基丁酸能够抑制HeLa癌细胞增殖;使HeLa癌细胞DNA受到损伤;通过caspase依赖性细胞凋亡途径诱导HeLa癌细胞凋亡;在HeLa癌细胞与人脐带正常细胞共培养条件下,3-羟基丁酸诱导HeLa癌细胞先于人脐带正常细胞凋亡.实验为肿瘤的生酮饮食疗法和酮体疗法提供了理论依据.     

强电脉冲对抗癌药物毒性的提高作用

研究了强电脉冲作用下，抗癌药物环磷酰胺对HeLa细胞和胎儿脐带血细胞的毒性变化。实验发现，当强电脉冲（电压500V，电容10μF， 脉冲5个） 结合环磷酰胺处理HeLa细胞后，细胞凋亡比例和死亡比例都比环磷酰胺单独处理组要高；当强电脉冲（电压1000V，电容10μF，脉冲2个）结合环磷酰胺处理胎儿脐带血细胞，发现染色体畸变和微核比例比单独药物处理组高。说明强电脉冲能明显提高抗癌药物对细胞的毒性。     

低表达长非编码RNA MALAT1对人宫颈癌HeLa细胞体外生长和迁移的影响

设计3个针对MALAT1不同靶序列的小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA), 筛选出有效的siRNA序列, 设计并构建短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)干扰质粒, 转染到HeLa细胞中, 构建低表达MALAT1的稳定细胞株.通过细胞的生长曲线和细胞划痕实验验证降低MALAT1对HeLa细胞增殖和迁移的影响.结果显示MALAT1表达水平在HeLa细胞中得到有效地降低, 低表达MALAT1的HeLa细胞生长速度和迁移速度减小.表明MALAT1在HeLa细胞中具有调控细胞增殖和迁移的能力     

SBHL对HeLa细胞c-myc,H-ras和hTRT基因表达的研究

目的 观察澳洲茄胺盐酸盐对HeLa细胞c-myc,H-rass和hTRT基因表达的影响.方法 用鼠抗人c-myc McAb,H-ras McAb和hTRT PcAb作为一抗,生物素化羊抗鼠IgG作为二抗,用免疫组化方法测定澳洲茄胺盐酸盐对HeLa细胞c-myc,H-ras和hTRT基因的表达.结果 澳洲茄胺盐酸盐处理的HeLa细胞与对照组相比,c-myc,H-ras和hTRT基因的表达均明显降低(P<0.05).结论 澳洲茄胺盐酸盐下调HeLa细胞c-myc和H-ras基因的表达,抑制细胞增殖,诱导分化;澳洲茄胺盐酸盐下调HeLa细胞hTRT基因的表达,抑制端粒酶活性,抑制细胞生长.     

PKCθ-EGFP融合蛋白在HeLa细胞中的表达及其对细胞形态的影响

目的:分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与蛋白激酶C-θ(PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa细胞中的表达、亚细胞定位及其对细胞形态的影响。方法:用脂质转染胺(Lipofec-tAMINE 2000)为载体分别以pPKCθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式细胞仪分析其表达率,激光共聚焦显微镜分析其亚细胞定位,同时分析二丁酸佛波醇酯(PDB)和小檗碱对其亚细胞定位和细胞形态的影响。结果:转染pEGFP-N1或pPKCθ-EGFP的HeLa细胞48 h后,表达绿色荧光的细胞百分率分别为(70.9±4.4)%和(45.8±2.3)%(P<0.05)。表达的PKCθ-EGFP融合蛋白均匀分布于细胞内,与EGFP蛋白在细胞内的分布相似。PDB刺激30 min后,表达PKCθ-EGFP的HeLa细胞的形态发生显著变化,即由原来的梭形变成圆形,荧光强度增强。但表达EGFP的HeLa细胞的形态及荧光分布均不受影响。小檗碱对PDB诱导的HeLa细胞的形态和EGFP-PKCθ融合蛋白的分布无明显影响。结论:表达PKCθ-EGFP融合蛋白的HeLa细胞在PDB作用下细胞形态发生显著变化。