屎肠球菌JT1701对人体肠系细菌的调控作用

用屎肠球菌JT1701与人体肠系有害菌（大肠杆菌、产气荚膜梭菌、脆弱拟杆菌）和人体肠系益生菌（婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌）分别及共同培养发现,肠球球菌对这些菌均有抑制作用。它能抑制这些菌氨的产生,降低培养基的pH。其原因是,屎肠球菌与氨产生相关的尿酶、氨基酸脱氨酶的种类少,酶活性亦低,而与NH4^ 同化相关的谷氨酸脱氢酶、谷氨酸合酶、谷酰氨合成酶的活性要高得多。表明屎肠球菌对人体肠系菌群具有调控作用。     

肠道菌群模式菌株的HPLC分离条件优化及其表征

采用高效液相色谱分别考察了肠道菌群模式菌株及各单菌的色谱行为,成功建立了HPLC分离分析肠道菌群模式菌株的最佳洗脱方法,即阶梯式梯度洗脱.结果显示,肠道模式混合菌株经过高效液相色谱分离得到5个明显的洗脱组分,分别为0.10 mol·L~(-1)(脆弱拟杆菌和金黄色葡萄球菌)、0.20 mol·L~(-1)(青春双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌)、0.25 mol·L~(-1)(粪肠球菌)、0.30 mol.L~(-1)(奇异变形杆菌、克雷伯肺炎杆菌和产气荚膜梭菌)和0.50 mol·L~(-1)(大肠杆菌和产气荚膜梭菌)洗脱峰.色谱柱的上样浓度为培养菌液(OD600=0.576)的5倍时,其最大上样量为500μL,且方法分辨率高、重现性好、结果稳定.     

固定化混种发酵生产海藻豆乳饮料的研究

以海藻汁液和大豆浆混合液为原料，接种固定化保加利亚乳杆菌于４３℃发酵８ｈ发酵液经过滤后，再接入固定化清酒酵母或产香酵母Ａ－２于２５℃或３０℃下发酵１２ｈ，制成海藻豆乳饮料，经测定该饮料总酸含量为８．２～８．５ｇ／Ｌ，总酯含量为１．６～１．８ｇ／Ｌ，乙醇含量为０．８３％～０．８６％，碘含量为１５～２６μｇ／ｇ。     

幽门螺杆菌感染对肠道菌群的影响

 为研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染对肠道菌群的影响,收集Hp 阴性和Hp 感染(阳性)患者的粪便标本,选择Hp 和肠道菌群中具代表性的大肠杆菌O157、乳酸杆菌、肠球菌、双歧杆菌进行PCR 扩增。实验结果表明,Hp 阴性组中未见Hp 表达,与¹³C 呼气实验结果基本一致;Hp 阴性组中乳酸杆菌、肠球菌、双歧杆菌表达较高,而Hp 感染组中3 者表达较少;Hp 阴性组中未检测到大肠杆菌O157。幽门螺杆菌感染可改变肠道菌群中乳酸杆菌、肠球菌、双歧杆菌等菌落的数量。     

菊芋低聚果糖促进双歧杆菌生长的研究

研究一种自制菊芋低聚果糖（FOS）在体内外对双歧杆菌的促生长效果,体外试验表明,所实验的5种218株双歧杆菌菌株均利用FOS,在FOS浓度为0．5％时,青春双歧杆菌和婴儿双歧杆菌的生长量分别比对照增加6．5倍和5．4倍,培养液中流加0．2％的FOS也能显著促进双歧杆菌的生长;竞争实验显示双歧杆菌的增殖对大肠杆菌和艰难梭菌的生长有一定的抑制作用,体内试验表明,FOS能显著提高受试动物粪合便中的双歧杆菌菌数。     

Cl~- 和 SO_4~(2-) 对厌氧废水处理的抑制阈值

用人工配制高浓度有机废水分别研究了Ｃｌ－和ＳＯ２－４对厌氧生物废水处理的抑制作用和抑制阈值．在全混流厌氧恒化器和上流式厌氧污泥床（ＵＡＳＢ）反应器中分别得到了对厌氧消化基本无抑制作用（全混流恒化器：Ｃｌ－＜４．５ｇ／Ｌ,ＳＯ２－４＜１．８ｇ／Ｌ;ＵＡＳＢ：Ｃｌ－＜７．２ｇ／Ｌ,ＳＯ２－４＜３．０ｇ／Ｌ）;轻度抑制（全混流恒化器：Ｃｌ－＝４．５～６．０ｇ／Ｌ,ＳＯ２－４＝１．８～３．３ｇ／Ｌ;ＵＡＳＢ：Ｃｌ－＝７．２～８．２ｇ／Ｌ,ＳＯ２－４＝３．０～４．１ｇ／Ｌ）;中度抑制（全混流恒化器：Ｃｌ－＝６．０～１３．８ｇ／Ｌ,ＳＯ２－４＝３．３～６．５ｇ／Ｌ;ＵＡＳＢ：Ｃｌ－＝８．２～１０．０ｇ／Ｌ,ＳＯ２－４＝４．１～６．０ｇ／Ｌ）和重度抑制（全混流恒化器：Ｃｌ－＞１３．８ｇ／Ｌ,ＳＯ２－４＞６．５ｇ／Ｌ;ＵＡＳＢ：Ｃｌ－＞１０．０ｇ／Ｌ,ＳＯ２－４＞６．０ｇ／Ｌ）的不同Ｃｌ－和ＳＯ２－４浓度范围．     

双歧杆菌活化及其选择性计数培养基研究

本实验结果表明，对于双歧杆菌，采用适当方法在－１８℃下一般冰箱中保藏半年后，利用添加适当的增菌物质经二次活化，双歧杆菌的凝乳时间小于４ｈ，ＰＨ＝４．６８，总菌数达１０９个／ｍｌ。另实验筛选出一种选择性的培养基即ＭＭＲＳａｇａｒ。对于由Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ和Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ混菌发酵的发酵乳，该培养基能专一性的选择Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ，可用于Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ的活菌计数及分离。     

棒曲霉UA—2木聚糖酶的蔗渣固态发酵

棒曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｃｌａｖａｔｕｓ）ＵＡ－２固态发酵蔗渣产木聚酶的培养基为每克蔗渣加营养液５ｍｌ，初始ｐＨ８．５．营养液的适宜组成为每升含：ＮＨ４ＮＯ３１０ｇ、Ｋ２ＨＰＯ４６ｇ、ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．７５ｇ、ＣａＣｌ２０．７５ｇ、ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ１１．２５ｍｇ、ＭｎＳＯ４·Ｈ２Ｏ３．７５ｍｇ、ＺｎＳＯ４３．０ｍｇ、ＣｏＣｌ２４．５ｍｇ．在上述培养基中接入其湿重１０％（Ｗ／Ｗ）的新鲜的ＵＡ－２种子曲，２８℃培养１０８ｈ，其木聚糖酶，滤纸降解酶和羧甲基纤维素酶的活力分别为２６９５．６、２８．５和４２．７ｕ／ｇ蔗渣．酶反应的最适ｐＨ５．０，最适温度５０℃；在ｐＨ４．０～１１．０内酶活性十分稳定．５０℃保温１ｈ，酶活剩余５５％，８℃下放置２３ｄ，活力几乎不变．磷酸盐，半胱氨酸对酶有激活作用，ＥＤＴＡ和对氯汞本甲酸对酶有抑制作用     

基因重组人Gamma-干扰素发酵和提取优化工艺的研究

对基因重组人Ｇａｍｍａ－干扰素（ｒＩＦＮ－γ）ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株的发酵工艺进行了研究．结果表明,采用在２５０ｍＬ摇瓶中装液量为１５０ｍＬ,按照１∶４０的稀释比进行两次扩大培养,并在大肠杆菌生长最为活跃的对数生长期内进行诱导表达效果最好．收集菌体以后,将菌体进行冷冻和超声破碎,并在２．０ｍｏｌ／Ｌ脲中浸泡８ｈ～９ｈ以清洗杂蛋白,然后用７．０ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍（Ｇｕ·ＨＣｌ）提取．在优化工艺条件下,ｒＩＦＮ－γ的收量为９．０×１０６ＩＵ／Ｌ～１２．８×１０６ＩＵ／Ｌ,总蛋白为７９．５ｍｇ／Ｌ～１２７．２ｍｇ／Ｌ,比活为５．６×１０５ＩＵ／ｍｇ～８．０×１０５ＩＵ／ｍｇ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳含量可达６０％～８０％,使ＰＢＶ２２０ＤＨ５α工程菌株获得了高效表达．     

钝齿棒杆菌YL_1基因文库的建立及异亮氨酸基因在大肠杆菌中的克隆表达

以ｐＵＣ１９质粒为载体建立了异亮氨酸产生菌钝齿棒杆菌（Ｃｏｒｙｍｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｃｒｅｎａｔｕｍ）ＹＬｌ的基因文库，并通过酶切重组子、斑点杂交得到证实．共筛选５８００个重组子，一个特定ＤＮＡ片断在库中存在的可靠性达９９．９９％．从中克隆重组了带有ｉｌｖＡ基因片断的重组质粒ｐＹＩ９４，转化ＡＨＶ的大肠杆菌ＥＤ８６５４－５，使本来不产Ｉｌｅ的大肠杆菌可以积累Ｉｌｅ１．５ｇ／Ｌ，为进一步高效表达构建工程菌创造了条件．     

红树林内生真菌的分离及代谢产物生物活性的初步研究

从8种红树林植物中共分离出85株内生真菌,经鉴定发现其主要类群为无孢类群(Mycelia sterilia),短梗霉属Aureobasidium spp.和盘长孢属Gloeosporium spp.,分别占菌株总数的50.6%、18.0%、14.6%。对这85株内生真菌的代谢产物生物活性研究发现:其菌丝和发酵液提取物对试验细菌表现出较好的抗性:对大肠杆菌有抗性的菌株比例分别为22.4%、21.2%、金黄色葡萄球菌为12.9%、14.1%,枯草芽胞杆菌为20.0%、36.5%;其发酵液提取物对酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae、白色念珠菌Candida albicans、新月弯孢霉Curvular-ia lunata等试验真菌均有较好的抗性,抗性菌株占菌株总数的比例分别为25.9%,23.5%,28.2%,而菌丝提取物均未表现出抗性;有8株(占菌株总数的9.0%)可产生抑制小麦发芽和芽生长的代谢物,具有除草剂活性;通过本实验建立的全细胞定向筛选模型发现:有14个菌株的代谢产物对耐药性大肠杆菌具有拮抗活性,占菌株总数的16.5%。以上结果表明:红树林内生真菌蕴含丰富的生物活性物质,在新型药物先导物和除草剂的开发方面都表现出潜在的应用前景。     

抗生素在体内外对肠道厌氧菌的作用

在体外实验中,自肠道分离的95株厌氧菌菌株对氯林霉素、甲砜霉素和灭滴灵都比较敏感。用氯林霉素[2.5 mg/(d·小鼠)]处理只结合有厌氧菌并能拮抗艰难梭菌肠道定居的悉生小鼠,可引起菌群屏障可逆性的破坏,使艰难梭菌接种物能在肠道中定居繁殖;在艰难梭菌菌数达到一定水平时,可在动物盲肠中检测到艰难梭菌细胞毒素。文中根据实验结果讨论了与抗生素疗法有关的伪膜性结肠炎产生的可能机制。     

酸乳饮料中杂菌的变化及作用

对酸乳饮料中的微生物进行分离鉴定,除两种发酵剂乳酸菌——嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)以外,其中酵母主要是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisive);细菌主要有植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)和大肠埃希氏菌(E．coli);霉菌主要有黑曲霉(Aspergillus niger)和桔青霉(Penicillum citrinum)。在酸乳饮料腐败变质过程中,其中的微生物数量、酸碱度及含糖量存在一定的变化规律。     

电阻抗法检测低酸性罐头食品商业无菌的方法研究

应用电阻抗法检测低酸性罐头食品商业无菌中的大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、粪链球菌、生孢梭菌、沙门氏菌、蜡状芽孢杆菌等7种主要原因菌,建立一种低酸性罐头食品商业无菌的快速检测方法。电阻抗法全部检测过程可在3d内完成,检测结果快速、灵敏、准确可靠,适用于低酸性罐头食品商业无菌的快速检测。     

P pili in uropathogenic E. coli are composite fibres with distinct fibrillar adhesive tips.

Escherichia coli is a frequent cause of several common bacterial infections in humans and animals, including urinary tract infections, bacteraemia and bacteria-related diarrhoea and is also the main cause of neonatal meningitis. Microbial attachment to surfaces is a key event in colonization and infection and results mainly from a stereochemical fit between microbial adhesins and complementary receptors on host cells. Bacterial adhesins required for extracellular colonization by Gram-negative bacteria are often minor components of heteropolymeric fibres called pili which must be oriented in an accessible manner in these structures to be able to bind to specific receptor architectures. P pili mediate the binding of uropathogenic E. coli to a digalactoside receptor determinant present in the urinary tract epithelium. We report here that the adhesin is a component of distinct fibrillar structures present at the tips of the pili. These virulence-associated tip fibrillae are thin, flexible polymers composed mostly of repeating subunits of PapE that frequently terminate with the alpha-D-galactopyranosyl-(1-4)-beta-D-galactopyranose or Gal alpha (1-4)Gal binding PapG adhesin.     

痛风舒片微生物限度检查方法有效性验证试验研究

以建立痛风舒片的微生物限度检查方法为目的。采用500 r min-1离心5min低速离心沉淀处理供试液与平皿稀释法联用测定细菌数;用平皿稀释法测定霉菌、酵母菌数;采用常规方法进行控制菌大肠埃希菌、大肠菌群检查。结果:样品对白色念珠菌有一定抑菌活性、对黑曲霉未显示抑菌作用;对细菌有较强抗菌活性;采用500r min-1离心5min低速离心沉淀处理供试液与平皿稀释法联用,金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌活菌计数回收均可达到70%以上,并通过3个批号样品细菌计数有效性验证试验说明该法可有效消除药物对试验菌的抗菌作用。结论:建立的方法可有效的控制药品质量,准确可靠。     

乳酸菌基因组代谢网络模型的研究进展

基因组代谢网络模型(genome-scale metabolic models,GEMs/GSMM)是基因组规模的细胞生化反应网络,可以定量描述基因与表型的关系,广泛应用于系统生物学、代谢工程、环境科学等领域。微生物基因组代谢网络模型是基于微生物基因组构建的生理生化知识库,通过数学模型实现对目标微生物生理生化反应的模拟,已成为研究微生物代谢调控的重要工具。基因组代谢网络模型的构建步骤通常包括构建模型草图、人工精炼、模型转换、验证评估4个阶段。在介绍以模式微生物(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母)为代表的微生物基因组代谢网络模型发展过程基础上,重点聚焦乳酸菌基因组代谢网络模型的研究现状,系统介绍了已构建的乳酸菌基因组代谢网络模型及其应用。对乳酸菌基因组代谢网络模型的发展方向进行了展望,提出未来乳酸菌基因组代谢网络模型的研究应在现有模型的基础上构建更高质量的代谢与大分子表达模型和泛基因组模型,为乳酸菌的研究提供更高效的工具。     

壳聚糖的抑菌作用及其稳定性研究

研究了壳聚糖对食品中常见微生物的抑制作用,结果表明:3种不同分子量的壳聚糖(50 kD,100kD,200kD)对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、短小棒状杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌等所有被试菌都有明显的抑制作用,随分子质量增大,壳聚糖的抑菌作用逐渐减小,相应最小抑菌浓度在0.5 g/L以上.同时探讨了壳聚糖抑菌作用的稳定性,结果表明壳聚糖的热稳定性良好,环境中的金属离子对壳聚糖的抑菌性能有一定的影响.     

酸适应乳酸菌的筛选及其酸适应条件的研究

对24株包括双歧杆菌、植物乳杆菌、乳酸乳球菌和保加利亚乳杆菌在内的4类乳酸菌酸耐受力进行评价,结果发现除4株保加利亚乳杆菌有较强的酸耐受力外,其余20株均为酸敏感菌株。将这20株酸敏感菌株酸适应（pH 4.5,1h）后,有13株菌的酸耐受力得到提高。其中,乳酸乳球菌KLDS4.0312酸适应能力最强,酸适应后其酸耐受力可提高7542倍。确定了乳酸乳球菌KLDS4.0312最佳酸适应条件为pH 4.5,30min,且稳定期的菌体酸适应后,酸耐受力仅能提高27倍,酸适应能力明显低于对数期菌体。