滇紫草愈伤组织辐射和磁场效应研究初报

本初步研究了Ｈｅ－Ｎｅ激光和磁场对滇紫草愈伤组织生长及色素形成的影响。结果表明：功率密度０．３７ｍｗ／ｃｍ＾２的Ｈｅ－Ｎｅ激光处理１ｈ刺激愈伤组织生长，而色素含量在２ｈ和３ｈ处理有较大提高，分别达１５．７％和２７．８％。１０ＫＧＳ场强的磁场处理１５ｍｉｎ对愈伤组织生长和色素形成均有促进，当代和第二代色素含量较高９．５％和２７．５％。色素含量提高的稳定正在进一步观察。     

氯化铜对滇紫草细胞色素形成的影响

滇紫草细胞于Ｍ－９培养液中悬浮培养以形成紫草色素。当Ｍ－９培养液中ＣｕＳＯ４·５Ｈ２０由相同浓度的ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ取代后，色素产量比对照提高了５８．７％，ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ的最适浓度为３０μｍｏｌ／Ｌ。滇紫草细胞的继代培养基Ｂ—５中的ＣｕＳＯ４·５Ｈ２Ｏ取代后，培养所得的细胞接种于Ｍ－９培养液中，色素产量比对照提高了３２．０８％，ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ的最适浓度为０．６μｍｏｌ／Ｌ．ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ对细胞生长无不良影响。Ｍ—９培养液中，铜于色素形成的初期，可快速吸附于细胞上，这一现象为ＣｕＣｌ２·２Ｈ２Ｏ促进紫草色素合成机制的深入研究提供参考。     

东北红豆杉培养细胞系的建立（Ⅰ）

东北红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为Ｂ５和ＷＨ。维持愈伤组织正常快速生长的培养基为Ｂ５．２．４－Ｄ对东北红豆杉愈伤组织的诱导和形成起关键作用，其浓度为２ｍｇ／Ｌ。嫩茎作外植本的愈伤组织诱导率高于针叶。添加适当浓度的有机物会促进愈伤组织的生长速度。     

剑麻组织培养诱导产蛋白酶研究

以剑麻株芽或幼叶为外植体,研究了不同培养基、不同培养温度和光照条件下,剑麻愈伤组织的诱导和生长特性．结果证明,Ｎ６培养基诱导剑麻愈伤组织启动最快;ＭＳ、ＬＳ培养基无论对愈伤组织的诱导还是继代培养都具有良好的效果;Ｂ５培养基不适于剑麻组织培养．剑麻愈伤组织诱导和生长最适宜的温度为（２５±２）℃、光照为１２ｈ．剑麻愈伤组织细胞可诱导产生蛋白酶．     

不同色光、温度、pH对草珊瑚愈伤组织的培养效应

报道了草瑚珊愈伤组织生长和次生代谢物与光、温度、ｐＨ不同的物理因子培养条件的关系。结果表明，暗培养的愈伤组织生长和代谢物含量较高，而蓝光在草珊瑚愈伤组织培养中，表现了蓝光效应，诱导出一个优良的愈伤组织系，其相对增长率和总黄酮月产率分别为７５９％，１．８６８ｇ／Ｌ。最佳培养温度为２６℃恒温，最适愈伤组织生长的培养基ｐＨ值为５．５；而最适愈伤组织代谢次级产物的生产培养基ｐＨ值为６．０。     

茴香原生质体培养研究

以茴香（ＦｏｅｎｉｃｕｌｕｍｖｕｌｇａｒｅＬ．）幼苗茎切段在ＭＳ附近２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上诱导产生愈伤组织，经４～５次继代后形成胚性愈伤组织。将胚性愈伤组织转至ＭＳ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．２５ｍｇ／Ｌ的液体培养基中培养，形成胚性细胞悬浮系。悬浮细胞在含有１．５％纤维素酶、１％果胶酶、０．５％蜗牛酶的混合酶液中酶解得到大量的原生质体，原生质体用修改的ＫＭ８Ｐ培养基中做液体浅层培养。２天后细胞发生一裂，两个月后形成０．５～１ｍｍ大小的小愈伤组织，转入含琼脂糖的固体培养基中３周后形成２～３ｍｍ的愈伤组织     

光棘豆（Oxytropis leptophylla DC）愈伤组织超低温冰冻保存技术的研究

光棘豆（ＯｘｙｔｒｏｐｉｓｌｅｐｔｏｐｈｙｌｌａＤＣ）愈伤组织超低温冰冻保存研究结果表明：适宜的保护剂是必要的，本试验所用复合保护剂中以１０％二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）＋０．５ｍｏｌ蔗糖效果最佳；两步冰冻法（即以０．５℃／ｍｉｎ的速度由０℃降至－４０℃，停留２ｈ，再投入液氮）能获得较高的存活率；自来水流水冲洗是较好的解冻方法；回温后不洗涤，通过更换培养基逐步稀释保护剂对恢复再生长有利；各环节均采用最佳处理方法，可使冰冻回温后再培养的愈伤组织存活率高达９５％以上；再培养分化出的植株形态及生长状态正常．     

怀地黄离体培养再生植株及其生长调控

本文对怀地黄愈伤组织的诱导、分化和再生植株的生长调控进行了研究．结果表明：（１）６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ（单位下同）＋ＮＡＡ０．１的组合有利于叶片愈伤组织的形成，２，４－Ｄ２＋ＮＡＡ２的组合有利于根茎愈伤组织的形成；（２）诱导愈伤组织产生再生植株的最佳组合为６－ＢＡ１＋ＮＡＡ０．０１；（３）ＰＰ３３３对再生植株的生长调控具有良好的效应，ＰＰ３３３１处理后，再生植株生长健壮，根系发达，叶色浓绿．     

激光培育珍珠母贝的研究

以合浦珠母贝为材料，采用流水诱导加Ｈｅ－Ｎｅ激光方法处理，激光波长为６３２８Ａ，功率５ＭＷ，作用剂量可以调控，结果促进了贝苗、幼贝快速生长。平均单位水体产苗量为３２．７万只／ｍ＾３，收苗期比对照短１７ｄ￣２０ｄ。下海培苗育贝的成贝率比对照高１６％￣２１％，抗逆性较强。     

微弹射击将大麦黄矮病毒外壳蛋白基因转入小麦获可育植株

以小麦品种济南１７７、３８４、４７１的幼胚和济南１７７的胚性愈伤组织为材料，质粒为ｐＰＰＩ２［含大麦黄矮病毒外壳蛋白（ＣＰ）基因和ＧＵＳ（β－葡萄糖苷酸酶）基因］；ｐＰＰＩ５（含ＣＰ基因）＋ｐＥｍｕＧＮ（含ＧＵＳ基因），用高速基因枪轰击钨粉质粒进入幼胚和胚性愈伤组织细胞．ＧＵＳ基因的瞬间表达平均频率幼胚约为４２％，愈伤组织为１８．５％．转化处理后用ＰＣＲ扩增技术检测植株中ＣＰ基因是否存在并稳定遗传．检测结果表明，来源于幼胚的Ｔ０代转化频率为２～９％（１９９３～１９９４年），并获得Ｔ１、Ｔ２和Ｔ３代稳定表达的转化植株．用愈伤组织转化，其转化频率３月龄者为０．４％；２年龄者为零．潮霉素（Ｈｍ）用于对转化幼胚和愈伤组织的筛选，低浓度时不能抑制非转化细胞的生长，高浓度则使细胞受伤害，不能再生正常健壮的植株     

He-Ne激光辐照对平菇菌丝体DNA的影响及增产效应的研究

为研究He Ne激光辐照对平菇菌丝体的影响,本实验采用低剂量He Ne激光处理平菇菌丝体,从形态水平和生理生化水平进行分析.结果表明:与对照组相比,He Ne激光辐照平菇菌丝体后菌丝体的生长速度加快、生长势增强、DNA含量增高、子实体生物学效率显著提高.     

Influence of He-Ne laser irradiation on the excision repair of cyclobutyl pyrimidine dimers in the wheat DNA

Using agarose gel electrophoresis and T4-endodeoxyribonuclease-V, which is a kind of restriction endonuclease of cyclobutyl pyrimidine dimer (CPD), the impacts of He-Ne laser (5 mW · mm⁻²) irradiation on DNA excision repair capacity in damaged wheat cells induced by enhanced ultraviolet-B (10.08 kJ ·m⁻² ·d⁻¹) radiation were studied. The results indicated that the content of endonuclease sensitive sites (ESS) was reduced by He-Ne laser irradiation, which formed in cells irradiated by enhanced ultraviolet-B. With the irradiation of He-Ne laser, the excision of CPDs and the reduction of single strand breaks (SSB) contents which were the endonuclease sensitive sites (ESS) digested by T4-endodeoxyribonuclease-V had been stimulated in the wheat cells.     

He-Ne激光和增强UV-B辐射对小麦幼苗氮代谢的影响

为研究He-Ne激光对增强UV-B辐射后损伤的修复作用,采用5 mW.mm-2He-Ne激光辐照、10.08 kJ.m2.d1的UV-B辐射及二者组合对舜麦1718号小麦幼苗进行处理,测定各处理组小麦幼苗硝酸还原酶活性、一氧化氮合成酶含量和膜透性的变化.分析结果显示:He-Ne激光辐照可使UV-B辐射后小麦幼苗硝酸还原酶活力升高1.2倍,显著改善了增强UV-B辐射后硝酸还原酶活性降低的程度;而一氧化氮合成酶(NOS)含量B组和BL组分别高于CK组45.1%和17.8%,现促进作用.     

激光辐照处理洋葱种子生理生化效应进一步分析

采用CO_2和He-Ne两种激光的三种剂量,分别辐照两个洋葱品种的湿种子,采用生理生化的方法,从净同化率、净光合速率、呼吸速率、蛋白质含量等四个方面研究洋葱各处理的生物学效应。结果表明:He-Ne激光辐照洋葱的净同化率、净光合速率、呼吸速率、蛋白质含量的变异大于CO_2激光辐照,采用He-Ne激光辐照洋葱容易从其变异后代中选择出高产、优质的优良变异株,进而育成符合育种目标的优良新品种。     

药用真菌猪苓的紫外线及氦-氖激光诱变育种研究

目的选育药用真菌猪苓的速生高产菌株。方法采用氦-氖激光和紫外线对猪苓菌丝体进行诱变处理,以菌丝生长速率和胞外多糖含量为指标进行筛选。结果筛选出一株高产突变菌株LU-7,与出发菌株相比,其最大菌丝体干重高出25.1%,单位培养基胞外多糖含量增加了83.4%,而且具有良好的遗传稳定性。结论经氦-氖激光和紫外线诱变选育出了菌丝生长和胞外多糖产生能力都明显提高的猪苓突变菌株。     

He-Ne激光诱变对分葱外部形态及生理的影响

对He-Ne激光诱变分葱种子幼苗外部形态及生理指标影响的研究有助于进一步研究和指导分葱激光诱变育种工作。实验采用He-Ne激光(功率为0.8mW,波长为632.8nm)分别照射分葱种子0、4、16、32、64、96、128和152min。待种子萌发实验后,移入放有腐质土的育苗盘育苗,45d后对分葱幼苗进行外部形态、叶绿素含量、根系活力、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量的测定。在He-Ne激光照射128min处理后,分葱的根长、株高和鲜重等外部形态指标,以及叶绿素a/b和可溶性蛋白含量均表现出一定的促进作用;在96min照射处理后分葱根系活力和可溶性总糖含量也高于其余各组。相反,在4min剂量处理后,发芽率、发芽势、根长、株高和鲜重等外部形态指标,根系活力及叶绿素a/b、可溶性总糖和可溶性蛋白含量等各项指标均低于对照组。总的来看,与较低剂量相比,较高剂量的激光诱变对分葱的生长与新陈代谢活动具有积极的作用。     

黄芩愈伤组织培养及细胞形态学观察

采用不同的植物激素、碳源、水解乳蛋白(LH)和水解酪蛋白(CH)、光暗条件对黄芩愈伤组织进行培养,通过石蜡切片观察愈伤组织细胞形态。结果表明:0.5mg/LNAA和2.0mg/LKt组合时愈伤组织生长量最多;1.0mg/L2,4-D和0.5mg/LKt组合时,黄芩甙含量最高;蔗糖为2%,葡萄糖为3%或4%时,都不利于黄芩甙的积累;LH、CH、黑暗条件能促进愈伤组织的生长而不利于黄芩甙的积累;光照能显著提高黄芩甙的含量;胚性愈伤组织占优势,已出现明显的微管组织的分化。     

激光辐照激发诱变滇糯稻

对云南姚安三角大香糯稻用He-Ne激光(1.5mW,632.8nm)加电场磁场(电场强度1.2×10~6 V/m,2.0×10~6 V/m和磁感应强度4.8 T)辐照进行诱变育种试验。通过育种和田间试验发现,激光的诱变有一定的作用,被辐照过的稻种性状有部分变异。     

黄芩生长与黄芩苷积累规律研究

试验研究了黄芩愈伤组织和栽培黄芩的生长特性和黄芩苷积累规律.研究表明,黄芩愈伤组织的生长和黄芩苷的积累并不同步,而是先生长后合成.栽培黄芩在6～7月和8～9月有两个生长高峰期,其中6～7月的黄芩地上部分增长量最为显著,增长了582%,在此期间主要进行初级代谢,在9～10月,根部的黄芩苷含量快速积累,其含量提高了76.4%,而茎叶中的黄芩苷含量均明显减小,分别减少了33.8%和21.5%,说明黄芩生长由初级代谢向次级代谢快速转化,这与在黄芩愈伤组织中的积累规律非常相似.     

产物释放促进剂对固定化紫草细胞生产紫草色素的影响

研究了多种产物释放促进剂对海藻胶包埋的紫草细胞生产紫草色素的效果。结果表明，在色素生产培养基中加入合适的产物释放促进剂可显著地刺激紫草色素的分泌及合成，并且该种处理方式的作用效果明显优于细胞透性预处理方式的效果。将固定化紫草细胞培养在质量分数为0.08%、 0.24% Tween 80和0.2% Tween 20培养基中，培养12 d紫草色素产量分别为每克干细胞含42.20、62.52和38.73 mg，比对照分别提高2.82、 4.66和2.51倍。在质量分数为0.2% Tween 20培养基中培养35 d时，细胞合成色素总产量达每克干细胞含181.5 mg，比对照提高4.2倍。