带毒梨茎尖的玻璃化法超低温保存及其植株再生

以带毒梨茎尖为材料研究了预培养时间、PVS2处理时间、超低温(-196 ℃)保存时间以及材料大小对超低温保存后梨茎尖再生率的影响. 结果表明,茎尖(1.5～2.5 mm)在预培养基(MS 2 mol·L-1甘油 0.4 mol·L-1 蔗糖 0.7%琼脂)上培养2 d后,先用60% PVS2 于室温条件下预处理20 min,再用100% PVS2于0℃处理2 h,快速投入液氮中保存,24 h后取出,接种到再生培养基(MS 1.0 mg·L-1 6-BA 0.2 mg·L-1 NAA 3%蔗糖 0.7%琼脂)上,暗培养3～8 d后,进行光照培养,最高成活率可达71%,且再生苗与常温苗形态指标差异不大.     

马铃薯脱毒苗的主要病毒检测

为了提高马铃薯脱毒种薯的质量,使其从根本上不含有马铃薯主要病毒,对马铃薯脱毒苗的质量检测尤为重要。本文应用国际通用的双抗体夹心酶联免疫吸附试验方法,对6个品种的96份脱毒苗进行了6种病毒检测。检测结果表明共有20份材料不含有6种主要病毒,能够应用于马铃薯的脱毒种薯生产。检测结果还表明在脱毒苗中PVS的含有率最高,应提高脱除马铃薯S病毒的技术水平。     

不同脱毒方法下马铃薯脱毒效果的比较研究

为探索马铃薯脱毒的最佳方法,提高马铃薯脱毒效率及脱毒苗成苗率,采用超低温疗法＋茎尖剥离技术和热处理法＋ 茎尖剥离技术 ２ 种脱毒方法进行脱毒效果的比较研究。 结果表明:相比于超低温疗法,热处理法处理的马铃薯成苗率和脱毒 效率更高,其最佳处理方式为 ３８ ℃温度条件下热处理 ６ ｈ 后再进行茎尖剥离;同时,在该处理条件下,进一步探索了缩短脱毒 苗培养周期的最适激素配比,并发现 ＭＳ 培养基中添加 ０.５０ ｍｇ / Ｌ ＧＡ３＋０.５０ ｍｇ / Ｌ ６－ＢＡ＋０.０１ ｍｇ / Ｌ ＮＡＡ 激素后茎尖成苗率 较高,达到 ８４.６２％。     

一种简易快速获得脱毒马铃薯幼苗的方法

马铃薯是中国第四大粮食作物,其安全生产直接关系到中国农业经济的稳定增长.马铃薯系无性繁殖材料种植,在连年的种植过程中,通常会受到病毒的侵害,从而影响其产量和品质.分离茎尖组织培养脱毒马铃薯是目前解决这一问题的常见且行之有效的方法之一.通过实验探索出了一种简单易行的分离茎尖组织、培养脱毒马铃薯幼苗的体系,为快速获得脱毒马铃薯幼苗奠定技术基础.     

马铃薯茎尖脱毒、复壮及病毒检测研究

文章研究不同激素组合处理对马铃薯茎尖诱导成活的影响,不同直径大小的茎尖对脱毒率的影响,以及植物生长延缓剂B9对试管苗复壮的影响.结果表明:培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+GA30.02mg/L的激素组合对茎尖的诱导成活率最高,为50%.以直径大小为0.2mm带1～2个叶原基的茎尖为外植体,其成活率与脱毒率较高,分别为68%和56%.当B9浓度为15mg/L时,马铃薯壮苗效果最好.     

怀地黄试管苗脱毒技术研究

对怀地黄试管苗的脱毒技术进行了研究.结果发现:以MS为基本培养基并附加适宜浓度细胞分裂素(6-BA0.5 mg.L-1或KT0.5 mg.L-1)时,茎尖成苗率最高(75%),出愈率较低(20%);切离的茎尖大小为0.2~0.5 mm时,既能保证较高的脱毒率又可保证较高的成苗率;两次切离茎尖并与热处理相结合,试管苗的脱毒率最高(96%~100%),建立了一种有效的怀地黄脱毒方法和技术.     

半夏的分生组织培养与快速繁殖技术研究

采用茎尖分生组织培养脱毒技术培育半夏的脱病毒试管苗.为加快半夏脱病毒试管苗繁殖速度,对添加不同浓度的外源激素的培养基进行了一系列优化试验,筛选出半夏脱病毒试管苗最佳的繁殖培养基.结果 表明:在MS+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)2.0 mg/L+萘乙酸(NAA)0.1 mg/L+6-糠氨基嘌呤(KT)0.10mg/L的培养基中诱导效果较好,技术上达到了快速繁殖规模生产的要求.经反复的病毒检测,证明脱毒试管苗脱病毒彻底.最终获得了半夏茎尖培养脱毒与诱导、增殖和生根的培养基,以及其生长所需要的外部环境条件和相关配套技术.     

马铃薯脱毒微型薯生产技术

马铃薯在连续多年种植后出现植株变矮、叶片皱缩、生长衰退、块茎变小、产量和品质明显下降的现象,叫做马铃薯退化,可使马铃薯减产20～30％,严重者可减产80Z以上。马铃薯退化是由病毒引起的,而病毒是由蚜虫等媒介传播的,且在植物组织中分布是不均匀的,即病毒愈靠近根、茎顶端生长点分布愈少,依据这一原理形成了茎尖脱毒技术。通过茎尖剥离、     

脱毒甘薯高产开发技术的研究与应用

甘薯具有产量高、稳产性好,用途广泛,适合精深加工等优点.近年来,随着社会经济发生根本性变化,资源循环经济可持续发展尤为重要.甘薯作为一种资源开发,推动了农业产业结构的调整和人们生活水平消费形式的转变,已由传统的粮食作物逐步转化为经济作物,甘薯消费状况基本实现了工业、饲料、加工和食用三分天下.由于甘薯是无性繁殖作物,体内病毒积累会导致种性丧失、品种退化、产量降低、品质下降,减产幅度可达20%～40%.目前利用甘薯茎尖分生组织离体培养脱除病毒病是防治甘薯病毒病最为有效的方法.脱除病毒后能恢复其优良种性,增产效果显著.阜阳市1996年组织引进试验示范甘薯脱毒技术,并对其关键环节进行了研究,组装配套改进和创新完善技术体系,形成了集甘薯育种、茎尖组培、病毒检测、试管苗快繁、工厂化育苗、种薯繁育、高产开发和推广应用于一体的科技运行模式.     

半夏的分生组织培养与快速繁殖技术研究

采用茎尖分生组织培养脱毒技术培育半夏的脱病毒试管苗。为加快半夏脱病毒试管苗繁殖速度,对添加不同浓度的外源激素的培养基进行了一系列优化试验,筛选出半夏脱病毒试管苗最佳的繁殖培养基。结果表明:在MS+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)2.0mg/L+萘乙酸(NAA)0.1mg/L+6-糠氨基嘌呤(KT)0.10mg/L的培养基中诱导效果较好,技术上达到了快速繁殖规模生产的要求。经反复的病毒检测,证明脱毒试管苗脱病毒彻底。最终获得了半夏茎尖培养脱毒与诱导、增殖和生根的培养基,以及其生长所需要的外部环境条件和相关配套技术。     

甘薯脱毒试管苗瓶外生根的研究

试管苗瓶外生根技术是组培工厂化育苗中一项具有很大应用价值的实用技术。以甘薯脱毒试管苗为材料,对瓶外生根进行了研究。结果表明,试管苗质量、基质、生长素均能影响试管苗的瓶外生根;污染试管苗用瓶外生根技术可达到84．5％的生根率;采用瓶外生根后移栽的方式获得的移栽苗比炼苗后移栽的方式高124．74％,可使移栽成活率提高3％。     

芋的脱毒快繁及栽培研究

通过对山东省芋种植区的主要栽培品种进行的病毒病害调查，根据国内外有关报道和受侵染叶片病症，及生物学方法检测，确认了侵染芋的主要病毒种类。利用梯度热处理和茎尖脱毒技术获得脱毒苗，经过检测，脱毒效果良好，然后进行组织培养。通过试验种植，脱毒苗子芋数、单芋重均高于未脱毒的对照组。     

重庆市主栽优良甘薯品种的茎尖培养脱毒研究

选用重庆市大面积推广的优良甘薯品种进行茎尖脱毒离体培养试验，结果表明：对来源于薯块萌发芽的茎尖进行组织培养，其成苗率最高，达53.2％；连续两次进行茎尖培养可明显增强脱毒效果；对于甘薯病毒病的检测，反转录PCR法（RT-PCR）比硝化纤维素膜酶联免疫吸附检测法（NCM-ELISA）更灵敏和可靠。     

四川省马铃薯脱毒种薯生产现状及发展对策浅析

本文对四川省马铃薯脱毒种薯生产现状进行了详细的研究和分析,并对四川省马铃薯脱毒种薯产业化潜力及优势、发展提出了建议.种薯生产体系总的发展趋势是技术更加成熟稳定和简化、繁育年限更短、效益更高,正规的马铃薯供种体系,可为种薯质量提供可靠的保证.     

超声植冰协同海藻糖冷冻保存L-02肝细胞研究

采用海藻糖代替具有生物毒性的二甲基亚砜，利用自行搭建的超声植冰装置研究了超声植冰以及不同浓度海藻糖对L-02肝细胞冷冻保存的影响。结果表明，添加0.3 mol/L海藻糖结合超声植冰的细胞冻存组的肝细胞存活率较高((87.6±2.0)%)，与传统植冰组((84.3±1.0)%)无显著性差异，与非植冰组((76.9±3.1)%)存在显著性差异。     

凉山州气雾栽培法生产微型马铃薯营养液配方的研究

马铃薯原原种气雾栽培法是一种新型的无土栽培技术,相较传统栽培方式,具有较多优势。调控营养液营养元素是获得马铃薯原原种高产的关键技术。以马铃薯"米拉(Mira)"品种的脱毒试管苗为试验材料,在水培壮苗培养阶段采用Box-Behnken设计,对改良霍格兰营养液中硝酸钾、磷酸二氢钾、硝酸铵的比例进行了优化。优化后(即优化霍格兰)的营养液中三者的比例为:硝酸钾645 mg/L、磷酸二氢钾230 mg/L、硝酸铵120 mg/L,采用此营养液用于后续的原原种气雾栽培试验。优化霍格兰在雾培马铃薯植株生长阶段与改良霍格兰和荷兰配方相比,株高和叶面积显著增加,但是匍匐茎数和匍匐茎分枝数低于后两者。在雾培马铃薯结薯期,与营养液中采用230 mg/L磷酸二氢钾喷雾相比,330 mg/L磷酸二氢钾喷雾可显著增加单株结薯数,530 mg/L的磷酸二氢钾喷雾可显著增加单粒重和最大单薯重。雾培马铃薯的不同生育时期可采用不同的营养液,但需要加以验证才能用于大规模生产。     

DAP 玻璃化冷冻液对小鼠2-细胞胚胎的冷冻保存

摘要: 目的探索和优化小鼠2-细胞胚胎冷冻效果,建立小鼠胚胎冷冻保存技术以及超低温保存模型动物胚胎实验室所需的相关技术。方法选择3 个品系( C57BL/6、ApoE － / －、NOS3 － / － ) SPF 级4 周龄雌性小鼠,运用超数排卵、体外受精、玻璃化冷冻法,以及二细胞期胚胎复苏、体外培养等技术方法,观察上述实验效果。结果C57BL/6、ApoE － / －、NOS3 － / － 3 个品系小鼠超数排卵平均值分别为42. 98 个/只、27. 93 个/只、23. 11 个/只,体外受精2-细胞期胚胎率分别为68. 79%、32. 70%、23. 08 %,胚胎冷冻复苏后胚胎回收率72. 77%、80. 87%、83. 33%,存活率分别为56. 92%、54. 84%、70%,存活胚胎体外培养发育到囊胚比率分别为72. 37%、60. 78%、25%。结论选择4 周龄小鼠,按预定相同的技术方法做超数排卵、体外受精、胚胎冻存、胚胎复苏,呈现出较好效果,C57BL/6 小鼠优于基因工程小鼠,基本建立起小鼠2-细胞胚胎冷冻保存技术。