不同浓度掺镁透钙磷石骨水泥修复骨质疏松家兔骨缺损及BMP-2表达的实验研究

健康家兔36只,进行骨质疏松造模后随机分为空白对照组、透钙磷石组(DCPD组)、掺镁6.67%组、掺镁26.67%透钙磷石组,在家兔双侧前腿桡骨中段制作骨缺损,术后每组动物分别于4、8、12周各处死3只,观察组织切片中BMP-2表达情况与X线片显示骨缺损修复状况。免疫组化结果显示同组不同时期比较,4周时BMP-2表达最高,8周时较4周时减弱,12周时阳性表达最弱。同一时期组间比较掺镁6.67%组阳性表达最强。在骨质疏松家兔桡骨骨缺损修复中,掺镁6.67%透钙磷石组成骨效果较其他组显著,同时期组间比较BMP-2阳性表达最强。     

新型多孔β-磷酸三钙对羊腔隙性松质骨缺损修复的实验研究

建立一种新型松质骨缺损的动物模型,观察和评价新型多孔β-磷酸三钙(β-TCP)对该骨缺损的修复能力.成年中国青山羊双侧股骨下端、胫骨上端制备腔隙性松质骨缺损(直径10 mm、深20 mm),以颗粒型多孔β-TCP(A组)、粉末型多孔β-TCP(B组)进行修复,同时设立冻干异体骨(C组)和空白对照组(D组).术后4周、12周、24周进行X线片、CT及组织学以观察和评价骨缺损修复情况.结果表明D组不能自行愈合;X线、CT示24周时A、B、C组均骨性愈合,图像数据分析示A组和C组、B组和C组间有统计学差异(P＜0.05);组织学示A、B、C三组4周新骨开始长入,24周骨缺损基本修复,4周、12周、24周三组新生骨面积比分别为(6.82±0.84)%、(6.68±1.13)%、(19.98±1.32)%,(16.32±2.21)%、(16.88±2.43)%、(38.63±3.31)%,(37.67±5.52)%、(39.11±6.43)%、(55.67±4.38)%,统计学分析示C组修复效果好于A组、B组(P＜0.05),A组、B组间无差异(P＞0.05).该骨缺损模型稳定、可靠,可较好得模拟一些临床中的腔隙性骨缺损环境;新型多孔β-TCP可良好修复该腔隙性松质骨缺损.     

日粮钙磷含量及比例对大鼠肝组织微量元素的影响

目的探讨钙磷含量及比例对大鼠肝组织微量元素含量的影响。方法将1月龄清洁级Wistar雄性大鼠随机分成7组,每组10只,饲喂7种不同钙磷含量的试粮,试验期42 d。结果相同磷进食水平下,肝铜、肝锰含量在不同钙磷比之间无显著性差异(P>0.05);肝铁含量随日粮钙水平的提高而显著下降(P<0.05);肝锌、肝镁含量在低钙组与高钙组之间存在显著性差异(P<0.05)。相同钙进食水平下,钙磷比4.0∶1组(低磷)的肝铜含量显著高于其它两组(P<0.05);肝铁、肝锰含量在三组之间存在显著性差异(P<0.05)。相同钙磷比水平下,高钙高磷组的肝铁、锰、镁含量明显低于其它组(P<0.0 5)。结论钙影响肝铁、锌、镁的含量,对铜、锰影响不明显。磷影响肝铜、铁、锰的含量,对锌、镁影响不明显。钙磷比为4.0∶1(Ca 1.00%,P 0.25%)时肝中微量元素含量最高,而钙磷比为1.2∶1(Ca 3.00%,P 2.50%)时肝中微量元素含量最低。     

多孔CPC材料复合转染VEGF的骨髓间充质干细胞修复大鼠颅骨缺损的实验研究

为研究转染血管内皮生长因子(VEGF)基因的骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合多孔CPC构建的组织工程化骨对骨缺损的修复作用,用脂质体介导质粒pIRES2-EGFP/VEGF165转染大鼠BMSCs,与多孔CPC复合体外构建组织工程化骨,植入大鼠颅骨缺损模型,未转染VEGF165的组织工程化骨作对照。分别在4周、12周取材,以组织学组织形态学分析骨缺损修复情况.比较两组的骨形成差异。结果转染VEGF组骨缺损的修复效果明显好于未转染组。组织形态计量学分析显示,4周时,转染组材料内新生骨面积为31.9%,未转染组为19.7%。12周时,转染组材料内新生骨面积为75.9%,未转染组仅为49.7%。差异具有统计学意义(P<0.000 1)。转染组的骨形成速率明显快于未转染组,两者分别为分别为6.18±1.62μm/d和3.56±0.93μm/d。说明VEGF转染细胞组较对照组血供加强,骨缺损修复加速。     

不同移植骨材料修复骨缺损的病理学研究

目的研究比较3种不同骨移植材料对修复骨缺损的病理学的影响。方法分别对骨缺损动物模型进行实验性治疗,通过病理形态学观察,比较这些移植骨的成骨能力。结果各组移植物均可形成骨组织,修复骨缺损。POB/TBCc植入4周后,可见大量成骨细胞围绕在TBCc材料周围,并有类骨组织,8周后形成骨小梁,16周形成板层骨,骨细胞成熟并出现髓腔。结论三组材料比较,TBCc/POB组为较好的骨移植材料。     

中华猕猴桃营养生物学效应研究——Ⅳ.浓缩果汁的营养评价

对中华猕猴桃浓缩果汁所含的蛋白质、脂肪、糖、酸度和维生素A,B_1,B_2,C,E以及钾、钠、钙、镁、磷、铁、锌、铜、硒、碘10种营养元素成分进行了分析测定。氨基酸的组成分析表明,中华猕猴桃含有18种氨基酸成分,其中8种人体必需氨基酸俱全。其浓缩果汁按50kg体重人体每日服用0.5kg剂量,对家兔持续6周喂养试验,具有明显提高家兔血液红细胞血红蛋白(Hemoglobin)的含量。当停服2周后,测定值出现下降,4周时接近原正常值范围。     

钛合金表面梯度掺锶透钙磷石涂层研究

通过2步电化学沉积工艺,以医用钛合金(Ti-6Al-4V)作为基板,制备梯度掺锶透钙磷石涂层,为涂层钛(合金)的临床应用与进一步实验研究提供有价值的理论参考.实验采用X线衍射仪(XRD)以及X线荧光光谱仪(XRF)检测试件涂层成分和掺锶量,场发射扫描电镜(SEM)观测微观形貌,溶血实验检测溶血率,初步判断其体外生物相容性.根据检测结果,按照n(Sr)/n(Sr+Ga)计算涂层掺锶量,结果显示成功在钛合金基板上制备锶的物质的量分数为10%、15%、20%的透钙磷石涂层,SEM观察涂层形态规则致密,检测溶血率均小于5%,符合医用材料相应要求(<5%).     

新型同种异体骨修复骨缺损动物实验研究

目的 探究新型同种异体骨修复骨缺损效果。方法 用雄性新西兰兔构建骨损伤动物模型,将60只兔随机分为实验组、对照组和空白对照组。麻醉,逐层切开,暴露股骨外侧面,在股骨近心端之外缘、大转子下缘1 cm处,用直径4 mm球头精密研磨机制备深度约为1 mm的骨缺损。同样的方法处理对侧股骨。在实验组和对照组每只兔的左股骨缺损区填充皮质骨粒,右股骨缺损区填充松质骨小块,轻压填紧,尽量使材料与孔密合,分层缝合。空白组动物进行上述同样手术,不填充任何材料。上述各组动物分别于术后1、4、8和12周,行影像学(X线)及病理组织学检查。结果 术后1周,3组动物骨缺损修复情况无差别;术后4、8和12周时,实验组动物骨组织修复速度优于对照组,显著优于空白对照组。结论 该型同种异体骨能够刺激间充质细胞分化为成骨细胞,推进骨细胞的形成及骨痂成熟,是较为理想的骨移植材料。     

牙髓干细胞在修复牙槽骨缺损的组织学观察

为探索牙髓干细胞(DPSCs)在兔牙槽骨缺损再生修复中的成骨效果,为临床上骨缺损的修复提供一定的理论基础。采用从新西兰幼兔前牙及磨牙牙髓组织中分离DPSCs进行体外培养;16只实验新西兰兔随机分为空白组,实验组两组,在动物下颌无牙区牙槽骨人工制备10 mm×4 mm×4 mm骨缺损,其中空白组骨缺损区填入浸有PBS溶液的0.25 g Bio-oss骨粉,实验组加入1×108/L的DPSCs和0.25 g Bio-oss骨粉;于术后第6周同期处死动物,无菌获取牙槽骨组织,制作石蜡切片,HE染色及免疫组化检测骨涎蛋白(BSP)。结果显示:光镜下传代培养的细胞与原代培养的细胞形态基本一样,幼兔牙髓细胞具有体外多次传代增殖能力;术后6周,空白组纤维结缔组织较稀疏,牙槽嵴塌陷,唇舌侧牙槽骨凹陷吸收,HE染色可见少量红细胞,未见明显新骨生成,骨涎蛋白免疫组化成弱阳性表现。实验组牙槽骨缺损区愈合良好,牙槽嵴饱满,可见部分未吸收骨粉颗粒,被新生组织包裹,新生组织与骨缺损周围嵌入良好,上附有部分纤维结缔组织,唇舌侧牙槽骨未见明显凹陷,大部分牙槽嵴宽度及高度与邻牙基本相平,骨缺损区质地较韧,HE染色提示炎性渗出明显吸收,可见新生骨组织,骨缺损区周围有大量成骨细胞,骨小梁较空白组致密,骨涎蛋白免疫组化成强阳性表达,与空白组有明显差异。由此可知,牙髓干细胞有向成骨分化能力,促进牙槽骨缺损的修复。     

rhBMP-2对陈旧性兔关节软骨缺损的修复作用

利用注射型活性材料重组骨形态发生蛋白-2（recombinant human bone morphogenic protein 2,rhBMP-2）修复兔关节软骨,观察其治疗效果.将12只8周龄成年大白兔随机分为2组,均行手术切开双膝髌股关节面制备全层软骨缺损模型,缝合创口后分笼饲养4周,使之成为陈旧性关节软骨缺损模型.再次手术切开关节腔,清除原缺损区纤维组织,钻通骨髓腔.2组分别接受如下治疗：A组应用rhBMP-2纤维蛋白胶,B组单纯生物蛋白胶治疗.分别于10、14、18周处死动物,观察大体和形态学特征,组织学评分.结果A组于10、14周时,软骨缺损被白色半透明坚硬组织平滑修复,富有光泽,与正常软骨边界清楚,18周时修复组织与正常软骨边界模糊,质地坚硬,表面平滑光润;B组于10、14、18周时均未见软骨修复.组织评分A组明显优于B组（P〈0.01）.结论：rhBMP-2可以有效修复兔关节软骨的缺损,为组织工程化软骨的临床应用提供了实验依据.     

利塞膦酸盐对磷硅酸钙理化及生物性能的影响

将利塞膦酸盐(0.5%和1.0%)与含有磷硅酸钙的骨水泥粉末混合后进行水化反应,测定骨水泥固化时间及抗压强度,并分析其载药前后的微观结构变化.通过细胞毒性与基因表达水平检测分析了骨水泥的生物性能.结果表明:在0.5%药物水平下,骨水泥促进成骨细胞增殖与分化效果最佳.药物可延缓骨水泥固化,但骨水泥的气孔率会随之降低且晶体结构会更加紧密.载有利塞膦酸的磷硅酸钙骨水泥具有与松质骨相似的力学强度及良好的生物相容性,作为骨组织修复材料具有很好的应用价值.     

一氧化氮供体在牵张成骨中对骨形成速率的影响

目的探讨外源性一氧化氮供体(硝酸甘油悬浊液)对兔牵张成骨过程中骨形成速率的影响.方法日本大耳白兔60只,随机分为假手术组(SO组)、手术组(DO组)和手术给药组(NG组),每组20只.各实验组兔子分别于牵张术后1 d、1周、2周、4周、6周处死,每个时点处死4只.处死后的兔游离下颌骨行骨密度测量和钙含量测定,利用SPSS 19.0统计软件分析各组骨密度和钙含量的差异,并进行相关性分析,建立回归方程.结果在牵张术后1 d,DO组与NG组骨密度比较差异无统计学意义(P0.05),其余各组比较差异具有统计学意义(P0.05);牵张术后1周、2周、4周时,各组间比较差异均具有统计学意义(P0.05);牵张术后6周,各组间比较差异无统计学意义(P0.05).钙含量变化与骨密度变化整体趋势相同,牵张术后1 d时,DO组与NG组比较差异具有统计学意义(P0.05).骨密度与钙含量呈正相关(r=0.869,P0.01),建立回归方程:Y钙含量=-1233.97+3 794.986X骨密度-4 122.103X3骨密度.结论外源性NO供体可以加快牵张成骨新骨的形成速率,缩短手术周期,可根据回顾方程骨密度的变化趋势来推测钙含量的变化.     

Restoration of rat calvarial defects by poly（lactide-co-glycolide）/ hydroxyapatite scaffolds loaded with bone mesenchymal stem cells and DNA complexes

A composite construct comprising of a bone mesenchymal stem cell (BMSC) sheet, plasmid DNA, encoding human bone morphogenic protein-2 (hBMP-2), and poly(lactide-co-glycolide)/hydroxyapatite (PLGA/HA) sponge was designed and employed in the restoration of rat calvarial defects. To improve gene transfection efficiency, a cationic chitosan derivative, N,N,N,-trimethyl chitosan chloride (TMC), was employed as the vector. The TMC/DNA complexes had a transfection efficiency of 13% in rat BMSCs, resulting in heterogeneous hBMP-2 expression in a 10-d culture period in vitro. In vivo culture of the composite constructs was performed by implantation into rat full-thickness calvarial defects, using constructs lacking pDNA-hBMP-2 or BMSC sheets as controls. Significantly higher heterogeneous expression of hBMP-2 was detected in vivo at 2 weeks for the cell sheet/DNA complex/scaffold constructs, compared with the constructs lacking pDNA-hBMP-2 or BMSC sheets. New bone formation was evident as early as 4 weeks in the experimental constructs. At 8 weeks, partial bridging of calvarial defects was observed in the experimental constructs, which was significantly better than the constructs lacking pDNA-hBMP-2 or BMSC sheets. Therefore, the combination of the PLGA/HA scaffold with BMSC sheets and gene therapy vectors is effective at enhancing bone formation.     

羟基磷灰石基生物材料培养破骨细胞研究现状

骨重建是新骨组织替换旧骨或受损骨的生理过程，在无瘢痕骨愈合和受损骨再生中起着必要的作用。骨重建主要是骨形成细胞如成骨细胞（osteoblast，OB），骨吸收细胞如破骨细胞（osteoclast，OC），和巨噬细胞（macrophage，MP）等细胞之间的相互协调活动。OC作为生物体内唯一多核细胞，负责生物体内骨质的脱钙与骨基质的吸收。自然骨具有一定硬度、韧性，良好的生物活性，保证骨重建中细胞的增殖、分化、骨形成或骨再吸收等活性。以羟基磷灰石（hydroxyapatite，HA）为主的磷酸钙（HA-CaPs）是自然骨中矿物质的主要成分，具有优异的生物性能而被广泛应用于骨组织修复领域。总结了HA-CaPs物相成分、表面形貌等对OC等骨吸收细胞增殖、分化和骨吸收活性的影响，并通过OC对于骨修复材料体内吸收机制及细胞活性调控机制等探讨HA-CaPs与细胞间相互关系，以期为磷酸钙人工骨替代材料更加广泛的生物应用作理论参考。     

BMSCs过表达BMP-4复合同种异体骨修复软骨缺损

目的 针对关节软骨损伤后修复困难,采用腺病毒(Ad)载体介导骨形态发生蛋白(BMP-4)修饰骨髓间充质干细胞(BMSCs),并复合同种异体骨软骨柱支架,以期实现关节软骨有效再生.方法 制备同种异体骨软骨柱,BMSCs过表达BMP-4复合同种异体骨修复关节软骨损伤,膝关节标本取材大体观察及分析,HE、番红固绿、Masso...     

应用新西兰白兔验证可降解网状微孔球囊联合钙盐骨水泥治疗骨折的作用

摘要: 目的通过观察新西兰白兔股骨内植入材料的降解及血液指标的变化验证可降解网状微孔球囊联合钙盐骨水泥治疗骨折的作用。方法根据植入物不同分为实验组( 植入可降解网状微孔球囊及钙盐骨水泥) 和对照组( 植入钙盐骨水泥) ,对术前、术后1,3,6个月的血液指标进行组间及组内比较,并通过影像学及病理学对植入物降解和骨组织生长匹配情况进行对比分析。结果实验组和对照组血液指标无明显改变; 在体内无明显免疫反应; 骨组织均可伸入到骨水泥间隙内,取代降解的骨水泥,形成规则的骨小梁结构; 实验组骨小梁较对照组粗大致密、分布规则。结论通过新西兰白兔验证了可降解网状微孔球囊联合钙盐骨水泥对活体无明显免疫反应,并利于骨折的修复愈合。     

重组骨形成蛋白—2与珊瑚人工骨复合物应用于拔牙窝修复的动物实验研究

目的：探讨重组骨形成蛋白－2（recombinant human bone morphogenetic protein rhBMP-2)/珊瑚人工骨复合物（复合骨）与珊瑚人工骨（珊瑚骨）在拔牙窝修复中的作用,方法：12只成年狗作为实验动物,拔除两侧上颌 第2及第3切牙,并去除牙槽窝之间的牙槽间 ,一侧随即植入复合骨,对侧植入珊瑚内作为对照,于并植骨后4,8,。12周取材,采用组织学观察及计算机图像分析方法,观察比较两种植入材料在拔牙窝内的骨修复能力及修复效果,结果：复合骨具有较强的骨修复作用,植入牙槽窝后,材料被逐渐降解吸收,新骨不断形成,12周后,植入材料完全被成熟的骨组织取代,图像分析结果显示复合骨组新生骨形成的比值明显高于珊瑚骨组,两组比较均有显著性差异（P＜0．05）,结论：复合骨在拔牙窝中的骨修复能力和修复效果明显优于珊瑚骨。     

Bone morphogenetic protein 2 improves patellar tendon healing by promoting migration and proliferation of tenocytes

The repair of injured tendons remains a great challenge because of the poor intrinsic healing capacity of tendons. In this study, we examined the spatiotemporal expression pattern of the bone morphogenetic protein 2 (bmp-2) gene in normal and experimentally injured rat patellar tendons. We also investigated the ability of exogenously applied BMP-2 to promote patellar tendon healing. In situ hybridization with bmp-2 and alk-6 (bmp-2 receptor) antisense riboprobes revealed that both genes were normally expressed at low levels in intact rat tendons. However, bmp-2 expression was significantly upregulated in tenocytes found in the wound site at 7 d and later following tendon injury. In addition, it was found that bmp-2 was expressed in cultured patellar tenocytes. Appli- cation of exogenous BMP-2 to the tendon wound site significantly enhanced tendon repair. Moreover, in vitro and in vivo studies further demonstrated that BMP-2 enhanced tenocyte proliferation and migration to the wound site. The detectable amount of BMP-2 in normal tendons suggests that a basal level of bmp-2 expression was likely present to maintain the normal functions of the patellar tendon. Injury to the tendon induced increased bmp-2 expression intrinsically, but the expression level was insufficient for proper tendon repair. Our findings indicate that it is possible to significantly improve tendon healing by applying exogenous BMP-2 to the wound site, inferring that this protein could be developed as a potential therapeutic reagent for the treatment of damaged tendons.     

珊瑚／胶原／重组人骨形成蛋白-2复合人工骨修复兔颅骨缺损

为评价珊瑚／ 胶原／ 重组人骨形成蛋白２ 复合人工骨（ 简称复合骨） 的骨修复能力,将复合骨植入兔颅骨直径１５ｍ ｍ 的圆形缺损,以单纯珊瑚植入作对照;术后６ 周、１２ 周取材,通过组织学观察和计算机图像分析,评价其骨修复能力．发现复合骨植入区形成的骨组织量明显多于同期的珊瑚植入区（ Ｐ＜ ０ ．０１） ;术后１２ 周,复合骨完全被成熟的骨组织取代,其骨修复效果明显优于单纯的珊瑚．说明复合骨具有骨传导和骨诱导活性,骨修复能力较强,是一种较为理想的新型生物性植骨材料