抗癌药物阿霉素的荧光发射光谱分析

利用蒽环类抗癌药物阿霉素的自发荧光可反映药物在细胞中的分布和相对剂量,利用特异性荧光探针Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２（Ｈｏ．３３３４２）可标记活细胞ＤＮＡ,从而反映细胞所处周期时相及染色体的形态变化,但是在阿霉素和Ｈｏ．３３３４２共存在的细胞中,用ＭＰＶＩＩ型显微荧光分光光度计对药的的自发荧光和Ｈｏ．３３３４２的发射芝光进行光谱分析的结果表明：在紫外激发下,药物自我荧光与Ｈｏ．３３３４２荧光之间存在干     

冷却型科学级CCD荧光影像系统对细胞多参数的研究

应用冷却型科学级ＣＣＤ摄像式显微荧光影像系统对受精后２０ｄ（Ｓ２０）的红莲子叶细胞进行了ＤＮＡ,ＲＮＡ和总蛋白相对质量含量的多参数相关测量。     

吖啶橙—细胞DNA荧光抑制法初步筛选抗癌药物的研究

以二倍体鼠肝细胞为标准细胞用荧光探针吖橙示踪药物／细胞ＤＮＡ的作用而提出了一种用Ｈａｄａｍａｒｄ变换显微荧光图象分析法初步筛选抗癌药物的新方法。对Ｄ－氨基葡萄糖的３ｄ过渡金属的配合物，Ｄ－氨基葡萄糖与β－萘酚醛有Ｓｃｈｉｆｆ碱及其与３ｄ过渡金属的配合物和它们分别与甘氨酸形成的混配物共四个系列２２种化合物与细胞ＤＮＡ的作用进行了研究，结果表明：Ｃｏ，ＮＧ，Ｃｏ，ＮＧ，ＣｕＧｌｕ，ＮｉＮＧＣｕＧｌＧ，     

抗阿霉素中国仓鼠卵巢上皮细胞的聚合微管蛋白和F…

运用显微光度技术（ＭＰＶＩＩ），研究抗阿霉素（ＡＤＲ）的中国仓鼠卵巢上皮细胞（ＣＨＯ）抗药株（ＲＣＬ）的细胞骨架，同时测定单细胞的ＤＮＡ和聚合微管蛋白相对含量，ＤＮＡ和Ｆ－肌动蛋白相对含量，发现ＲＣＬ聚合微管蛋白含量测定减低，Ｆ－肌动蛋白含量增加都与ＣＨＯ有显著性差异，与ＣＨＯ相比，ＲＣＬ的Ｆ－肌动蛋白除含量增加外，排列较紊乱，并局部解聚，类似于转化细胞的形状，这表明，细胞骨架与多药抗药性有关，但     

抗阿霉素中国仓鼠卵巢上皮细胞的聚合微管蛋白和F－肌动蛋白的含量变化

运用显微光度术（ＭＰＶⅡ），研究抗阿霉素（ＡＤＲ）的中国仓鼠卵巢上皮细胞（ＣＨＯ）抗药株（ＲＣ１）的细胞骨架，同时测定单细胞的ＤＮＡ和聚合微管蛋白相对含量、ＤＮＡ和Ｆ－肌动蛋白相对含量，发现ＲＣｌ聚合微管蛋白含量减低，Ｆ－肌动蛋白含量增加，并都与ＣＨＯ有显著性差异。与ＣＨＯ相比，ＲＣｌ的Ｆ－肌动蛋白除含量增加外，排列较紊乱，并局部解聚，类似于转化细胞的形状。这表明，细胞骨架与多药抗药性有关，但是否直接或间接相关还有待于进一步研究。     

DNA与抗癌药物道诺霉素相互作用的研究

该文采用荧光光谱法并用溴化乙锭（ＥＢ）作为荧光探针研究了道诺霉素（ＤＲＮ）与ＤＮＡ相互作用的方式。结果表明：ＤＲＮ的生色团能够嵌入ｄｓＤＮＡ双螺旋结构的碱基对之间,ＤＲＮ与ＤＮＡ的主要作用位点是碱基Ｇ、Ｃ;ＤＲＮ插入ｄｓＤＮＡ碱其对中,不会破坏碱基对中氢键,不会影响ＤＮＡ的复性;ＤＮＡ与ｓｓＤＮＡ仅仅存在弱的相互作用。     

烟草薄层培养早期细胞核形态与核DNA含量变化的研究

通过应用ＤＮＡ专一性活体荧光染色剂Ｈｏｅｃｈｅｓｔ３３２５８对烟草茎表皮细胞薄层培养物的细胞核进行活体染色，发现在培养早期，细胞核发生了明显变化，由分化时的一般扁圆形和靠壁的位置逐渐变成圆形和居中的位置；核体积增大；染色质结构由致密变得疏松；而后染色质凝缩，发生无丝分裂；经数次分裂之后，细胞形态较一致，通过单细胞核内ＤＮＡ含量的测定，发现细胞分裂之前，核ＤＮＡ含量不增加；而最初几次分裂之后，含量减     

氯化钠介质中核酸对铈（Ⅲ）的荧光猝灭特性及其分布应用

在ｐＨ〈６．２的ＮａＣｌ介质中，Ｃｅ的荧光为核酸所猝灭。２０℃时小牛胸腺ＤＮＡ，鱼精子ＤＮＡ和酵母ＲＮＡ对Ｃｅ的荧光猝灭在０－６．０μｇ／ｍｌ的浓度范围内符合方程ｌｎ（Ｆ０／ｆ）＝ｋｃ＋ｂ，在３．０－８．０μｇ／ｍｌ范围内却符合主程Ｆ０／Ｆ＝ｋｃ＋ｂ。     

精子核DNA和赖氨酸定量测定及有关分析

用显微分光光度计测定了人及大鼠附睾精子核ＤＮＡ和赖氨酸含量，发现不育者精子核ＤＮＡ含量高于正常者，附睾头部精子核赖氨酸含量为１左右，而尾部精子核赖氨酸含量接近于零。提示精子核蛋白异常可能是某些男性不育的原因之一。     

氯化钠介质中核酸对铈(Ⅲ)的荧光猝灭特性及其分析应用

在ｐＨ＜６．２的ＮａＣｌ介质中，Ｃｅ（Ⅲ）的荧光（λｅｘ２５４．０ｎｍ和λｅｍ３５０．０ｎｍ）为核酸所猝灭．２０℃时小牛胸腺（ｃｔ）ＤＮＡ、鱼精子（ｆｓ）ＤＮＡ和酵母（ｙ）ＲＮＡ对Ｃｅ（Ⅲ）的荧光猝灭在０～６．０μｇ／ｍｌ的浓度范围内符合方程ｌｎ（Ｆ０／Ｆ）＝ｋｃ＋ｂ，在３．０～８．０μｇ／ｍｌ范围内却符合方程Ｆ０／Ｆ＝ｋｃ＋ｂ，而在３．０～６．０μｇ／ｍｌ浓度范围内同时遵守上述二方程．猝灭过程与碱基的摩尔吸光系数大小有关．应用核酸对Ｃｅ（Ⅲ）的这种荧光猝灭特性可以灵敏的测定各种核酸     

大鼠肝再生中肝细胞基因表达与DNA裸露的相关性研究

为了解大鼠肝再生中肝细胞的基因表达与DNA裸露的相关性,分离大鼠肝细胞,提取裸露DNA,用SOLEXA方法对DNA测序,用BWA软件拼装测序片段,用IPA软件分析拼装的基因种类和作用,用Rat Genome230 2.0芯片检测基因的转录情况.研究表明,大鼠肝再生的12h(PH后12h),肝细胞的裸露DNA涉及16 912个基因,1 701个基因发生了有意义裸露量变化.其中,25个基因的裸露量上调,1 676个基因的裸露量下调.与Rat Genome 230 2.0芯片的检测的基因转录比对表明,肝细胞的AKR7A3,BMYC,CDC25B等26个基因的裸露量和表达量均下调,表明大鼠肝再生12h时,这些基因的表达可能受染色体结构调控.     

Human hepatopoietin augmenter of liver regeneration──A hepatotrophic factor for liver regeneration, and its potential antihepatitis effect in vivo

The effect of human hapatopoietin i.e. augmenter of liver regeneration (hALR) was determined on hepatocyte DNA synthesis, and on CCl 4-induced hepatitis in animal in vitro and in vivo. It is found that ALR could directly stimulate DNA synthesis of hepatocytes in primary culture in a dose-dependent manner. In 30% hepatectomied rats, significant DNA synthesis occurred in control rats ; even so, exogenous hALR gene encoding protein increased DNA synthesis of regeneration liver by 2.3 fold compared with control rats. A lower dose of CCl 4 was administrated in rats and the effect of ALR on DNA synthesis of regenerating liver 48 h after CCl 4 administration was analyzed. Few Budr-labeled hepatocytes were visible in control rats. However, exogenous hALR markedly increased the number of labeled cells in a dose-dependent manner. Statistical analysis showed that 10 or 40 μg·kg -1 ALR protein stimulated DNA synthesis by 1.7 and 4.8 fold respectively. In addition to enhancing cell growth, adiministration of hALR achieved a significant improvement in reversing the lethality of rat hepatic failure when compared with that of control group; the elevation of cytosolic enzymes was dramatically suppressed by exogenous hALR in CCl 4-treated mice in vivo and in vitro; histologically, hepatocytes around the central vein were necrotic, and the degree of hepatocyte necrosis in control mice was more prominent than that in the mice given 40 μg·kg-1 hALR 48 h after CCl 4 administration. We also noted that hALR had a strong antihepatitis effect in vitro which was determined with primary cultured rat hepatocytes. These findings suggest that hALR protects the integrity of hepatocytes against severe hepatitis, and indicate that ALR may be an important regulator of liver regeneration and play a major role in liver injury repair. It proves ALR adminstration to be a useful treatment to accelerate liver regeneration and to prevent the onset of hepatitis or intrahepatic cholestasis induced by toxin.     

大鼠再生肝中糖元及双核细胞变化的研究

正常大鼠肝细胞中存有大量糖元.肝大部分切除12小时后,肝糖元下降至零或仅少量。手术后24小时,肝糖元开始上升,至2l天呈现正常水平. 再生肝的双核肝细胞减少,由正常的10.6％降至5.6％.大部分肝切除21天后,双核肝细胞的百分率回升到正常水平,同时再生作用也完成.     

大鼠再生肝8种细胞的嘌呤核苷酸代谢基因转录谱预示的代谢活动

为了解大鼠肝再生中肝细胞、胆管上皮细胞、卵圆细胞、星形细胞、窦内皮细胞、库普弗细胞、陷窝细胞、树突状细胞等8种肝脏细胞的嘌呤核苷酸代谢基因转录谱及预示的代谢活动,按张丽君[1]等方法分离大鼠部分肝切除后10个恢复时间点大鼠再生肝的上述8种细胞,用RatGenome2302.0芯片等检测嘌呤核苷酸代谢基因在上述细胞中表达变化,用Excel等软件及生物信息学和系统生物学等方法分析它们的表达模式、预示的生理活动等.结果表明,85个嘌呤核苷酸代谢基因在大鼠肝再生中发生了有意义表达变化,8种细胞的相应基因数为40,43,30,42,22,26,36和48.上调、下调、上/下调的基因个数为49、11、31,相应细胞的基因数为27、20和1,31、4和1,15、7和3,12、10和0,23、15和3,19、7和2,39、3和1,33、6和0.其中,催化DNA合成的DNA聚合酶基因和催化RNA合成的RNA聚合酶基因在肝再生的多个时间点和多种细胞中表达增强,胆管上皮细胞和星形细胞的腺苷酸合成相关基因表达增强.肝细胞、卵圆细胞和星形细胞的核苷酸分解相关基因、肝细胞、星形细胞和树突状细胞的嘌呤核苷分解相关基因表达减弱.预示大鼠肝再生与嘌呤核苷酸代谢密切相关.     

模板甲基化水平对鼠肝RNA聚合酶体外转录活性的影响

利用３Ｈ－ＵＴＰ同位素参入法，研究了大鼠肝细胞ＲＮＡ聚合酶在核内外的转录活性，结果表明：在细胞核内的转录活性明显低于在无核抽提物中的转录活性。利用自身的ＤＮＡ模板，优于利用外加的ＤＮＡ模板。并比较了不同ＤＮＡ甲基化水平的模板对ＲＮＡ聚合酶体外转录活性的影响，发现模板的甲基化水平与其体外转录水平呈反相关。     

改进的大鼠肝实质细胞的快速分离及鉴定方法

介绍一种分离、鉴定肝实质细胞的新方法.采用恒流泵、不锈钢滤网等简易灌流装置,对成年大鼠进行原位灌注分离肝实质细胞;并根据肝实质细胞能组成型表达6-磷酸葡萄糖酶这一特性,采用酶细胞化学技术鉴定肝实质细胞.经本实验改进的肝实质细胞分离方法具有简便、快捷、可靠的特点,为进一步研究肝实质细胞的各种功能奠定了基础.     

永生化胚胎肝细胞生物学特性及功能研究

研究永生化胚胎肝细胞的生物学特性及功能,研究并观察永生化胚胎肝细胞的形态及结构特征,测定其生长曲线,观察克隆形成能力并作软琼脂试验,对细胞染色体进行核型分析,同时对细胞合成白蛋白、尿素及细胞色素P450能力进行检测。结果显示永生化胚胎肝细胞克隆形成率为31.2%,染色体核型分析表明细胞核型无明显异常,软琼脂集落形成试验表明细胞在软琼脂中不能生长。细胞已在体外传56代仍保持正常肝细胞的形态特征,而且具有合成白蛋白、尿素及细胞色素P450的功能。说明该永生化胚胎肝细胞可以成为生物人工肝及肝细胞移植研究中的理想细胞材料。     

Molecular cloning and expression of human hepatocyte growth factor

Hepatocyte growth factor (HGF) is the most potent mitogen for mature parenchymal hepatocytes in primary culture, and seems to be a hepatotrophic factor that acts as a trigger for liver regeneration after partial hepatectomy and liver injury. The partial purification and characterization of HGF have been reported. We have demonstrated that pure HGF from rat platelets is a new growth factor effective at concentrations as low as 1 ng ml-1. The effects of HGF and epidermal growth factor (EGF) are additive. The activity of HGF is not species-specific, although it does not stimulate growth in Swiss 3T3 fibroblasts. HGF has a relative molecular mass (Mr) of 82,000 and is a heterodimer composed of a large alpha-subunit of Mr 69,000 and a small beta-subunit of Mr 34,000. Here we report the amino-acid sequence of human HGF determined by complementary DNA cloning and the expression of biologically active human HGF from COS-1 cells transfected with cloned cDNA. The nucleotide sequence of the human HGF cDNA reveals that both alpha- and beta-chains are contained in a single open reading frame coding for a pre-pro precursor protein of 728 amino acids.     

大鼠肝细胞的快速分离和原代培养

本文介绍一种快速分离大鼠正常肝细胞的方法,从刺杀动物到接种肝细胞总共只需用二小时。接种培养后,在有地塞米松的培养基内,肝主质细胞能存活到一周左右。从32例大鼠分别取材的肝细胞培养中,11例(34%)两周内出现克隆性增殖上皮细胞集落,其中的8例(25%)四周内长成汇合状态。所有能长成汇合状态的细胞群体都来源于150g以下的大鼠。本文对肝细胞的两种主要类型以及它们的亲缘关系进行了讨论。     

七种脊椎动物肝细胞核质比例研究

本文研究了从鱼类到哺乳类七种脊椎动物肝细胞,探索了不同动物肝细胞及同种动物不同发育时期肝细胞的大小、核的大小、细胞体积、核的体积、核质指数相应的变化。这种变化反映了细胞的形态和机能矛盾的统一是生物进化的原因之一。