不同来源氨基移换酶等电点的预测

借助一个经过改进的可预测蛋白质及多肽等电点(pI)的数学模型,并辅以相应的计算机程序求解,我们已对多种蛋白质及酶的pI进行了计算或预测,计算结果和文献报道的pI实验测定值比较吻合。 氨基移换酶,又称转氨酶是一类催化转氨基反应的酶。本文以动物组织中天冬氨酸氨基移换酶(aspanate aminotransferasc)为重点,通过理论计算给出了12种天冬氨酸氨基移换酶及其他4种转氨酶的pI预测值,旨在为有关这些转氮酶的结构与功能研究及其分离、纯化工作提供有益的参考。     

蛋白质等电点的理论计算

蛋白质的等电点 pI 是蛋白质的重要理化性质之一。了解蛋白质的 pI,对蛋白质的分离纯化,鉴定小分子肽或酶的活性位点,预测不同蛋白质之间或蛋白质与其他大分子之间的离子相互作用,判断 pI 值对测定温度的依赖关系,设计由已知顺序的 DNA 合成的肽的纯化程序等都是很有意义的。蛋白质的 pI 值通常采用等电点聚焦或层析聚焦等实验方法测定。由于实验方法的灵     

同源蛋白质等电点的预测

应用一个依据蛋白质氨基酸组成可预测其等电点(pI)的数学模型,辅以自行设计的计算程序,计算了弹性蛋白酶(Elastase)、牛胰乳蛋白酶原(Bovine chymotrypsinogen)和α-胰凝乳蛋白酶(α-Chymotrypsin)的pI,计算值同实测值基本吻合。应用该模型还给出了4种精氨酸酶(Arginase)同功酶的pI理论预测值。     

平均配位数法求取蛋白质等电点

将蛋白质视为可连续电离出氢离子的多元弱酸,利用配合物体系配离子分布系数取最大值的条件-n=c,即蛋白质体系的平均配位数-n等于蛋白质中性离子中含有氢离子数目c时对应的pH值即为蛋白质等电点pI值,通过绘制蛋白质平均配位数-n对pH图或使用常用办公软件均可方便地找出pI值.考虑到蛋白质一般含有较多种类的由可电离游离基团电离形成的蛋白质离子,文章提出了忽略浓度较小蛋白质离子并简化-n计算的方法.     

双向电泳和肽质谱技术分析结核杆菌H37Ra感染巨噬细胞引致的差异表达蛋白

利用双向电泳及质谱技术对感染结核杆菌H37Ra株前后的巨噬细胞U937株的蛋白质组进行分离和比较分析．双向电泳后在分子质量20～200ku，等电点pI3～10范围内分离出1913个不同蛋白质斑点，肉眼可以明显看见4个蛋白质斑点在表达上的差异．对其中分子质量约75ku等电点约9．5的蛋白质斑点酶解后，进行质谱分析，鉴定为分子质量75．4ku、等电点9．52的蛋白DEAD／H Box Polypeptide 18．说明用蛋白质组学研究结核杆菌与巨噬细胞相互作用机理是可行的，所鉴定的蛋白质DEAD／H Box Polypeptide 18可能与巨噬细胞防御系统有关．     

乙醇酸氧化酶研究进展

概述乙醇酸氧化酶研究存在的问题和进展，指出乙醇酸氧化酶被认为只含单种亚基，但该观点难于解释不同植物乙醇酸氧化酶为何等电点（pI）相差较大。首次介绍乙醇酸氧化酶 是种至少有GOI(pI≈7.4)、GOⅡ(pI≈9.4)和GOⅢ(pI≈8.3)的同工酶，以及GOⅠ只含单种亚基，GOⅡ和GOⅢ则可能含两种亚基的新观点。     

一种新型血栓溶酶的分离纯化及其性质

中国根霉23＃的发酵液经离心除菌、硫酸铵分级盐析、SephadexG-25凝胶过滤、SephdexG-75凝胶过滤层析、DEAE-纤维素柱层析等步骤，得到一种凝胶电泳均一的血栓溶酶。通过等电聚焦实验测得其等电点pI＝4.2。该酶在pH7.0～8.0较稳定。50 ℃保持30 min血检溶酶活力无明显变化。     

大熊猫核糖体蛋白L34基因cDNA克隆与蛋白特性

为进一步研究RPL34的结构基因,也为更深入开展大熊猫分子生物学研究积累科学资料,本研究采用RT-PCR方法,首次成功克隆了大熊猫的核糖体蛋白L34基因的cDNA序列,对克隆序列进行了测序及初步分析,并利用RPL34蛋白构建系统树.结果表明:大熊猫RPL34基因的表达序列全长为379 bp,ORF为354 bp,编码117个氨基酸的蛋白质,该蛋白分子量为13.292 9 kD,等电点(pI)为11.48,含有5种类型共11个功能位点.进一步分析发现,该基因与已报道的人、牛、褐家鼠、小家鼠、非洲爪蟾和斑马鱼等物种的编码序列及其编码的氨基酸序列同源性很高,蛋白质分子量、pI非常接近,功能位点基本相同,说明核糖体蛋白L34基因及其编码蛋白在进化过程中非常保守;进化树分类结果与传统分类一致,表明L34蛋白能很好的反映物种间的进化关系.     

背角无齿蚌酸性磷酸酶的部分性质及功能基团研究

作者在对背角无齿蚌外套膜中分离提纯到的一种酸性磷酸酶（ACPase）的部分酶学性质进行研究的基础上，测定了该酶的亚基分子量为61，800D，等电点（pI）为6.12(25℃），并对其氨基酸组成进行了分析，对ACPase的二级结构的圆二色谱（CD）分析显示，酶分子中α－螺旋占31.8%，β-折叠占42.6%，β－转角17.9%，对ACPase进行了化学修饰研究，初步认为组氨酸、丝氨酸、色氨酸和半胱氨酸有可能是该酶的功能基团，二硫键也对维持酶的活性中心构象极为重要。     

一种蛋白质等电点的简便计算方法

从多元酸分步电离的角度提出了计算蛋白质等电点的简便公式：pH=（pKm＋pKm＋1＋lgs1-lgs2）/2,其中m为蛋白质可结合质子基团数，s1=1＋2[H]/km-1＋3[H]^2/Km-1Km-2＋…,s2=1＋2 km＋2/[H]＋3 Km＋2Km＋3/[H]^2＋…。选取任意pH值作为试探初始值，以后下一次试探值为上一次试探值与公式计算值的均值，当试探值与计算值相等时的pH值即为pI值，一般仅需试探几次即可得到满意结果．文章还讨论了忽略浓度较小蛋白质离子的方法．     

菠菜中不同等电点的乙醇酸氧化酶的提取和特性

从不同批次的菠菜绿叶中可纯化出5种不同活性和等电点（pI）的乙醇酸氧化酶（CO）．SDSPAGE表明它们均有40kD亚基,它们的比活会随蛋白浓度的增加而上升．第一种CO的pI〈8．3,比活为0．47U／mg,PAGE测定其全酶相对分子量（Mr）为280kD,280kD较稳定．第二种CO的pI〈8．3,但比活为3．44U／mg,PACE测定其Mr为560kD,但很快解聚为280kD．解释了前人报告CO的Mr大多为280kD．第三种CO的pI≈8．3,比活为8．4U／mg,放置后pI会下降至〈8．3,此时用PAGE测出其Mr为560kD．第四种CO的pI〉8．3,比活为27．8U／mg,放置pI也会下降为8．3．第五种CO的pI〉10．2,活性高达113U／mg,放置后其pI也会下降至〈8．3,由于CO的pI会下降,暗示低pI的CO可能并不存在于植物体内,而是实验中的娇作物．     

科研院所绩效评价方法初探

本文提出了一种独立科研院所绩效评价的方法。该方法将科研院所分公益性和开发性两大类,采用3个层次的23个指标对其运行绩效进行评价,评价方法具有科学合理、客观真实、简便易行的特点。     

两自由度函数综合仪的类型综合

本文应用杆组综合理论,在杆组外副上併接输入构件及机架的方法进行两自由度函数综合仪的类型综合。结果得到七杆机构的结构型式1种,九杆机构的结构型式17种;与文献[2]用八杆机构增加一个构件的方法综合九杆两自由度机构所得结果相同。文中所述杆组综合的步骤与方法,将是杆组的运动分析及力计算的基础,这三者组成一个多杆多自由度机构分析与综合的理论体系。     

原始功能评价值确定方法的改进

本文概述了功能评价值的确定方法之一,即功能比重分配法的基本原理,详细地分析了这一传统方法存在的不足之处,并提出了有效的改进方案,修改后的功能比重分配法既保留了原始方法的优点,又克服了原方法存在的不足.     

微胶囊膜厚的测定及其对释放速率的影响

膜厚是微胶囊重要性能之一,直接影响芯料释放速率,较为难测。本文提出一种测定膜厚的新方法——光学显微镜二次聚焦法,即用光学显微镜二次聚焦直接测出微胶囊内、外径而得膜厚。计算发现微胶囊等光程曲线连续而不光滑(即有拐点),从光学原理上证明此法可行;观察二次聚焦的光学显微图象,发现存在贝克线、从实验结果上间接证明此法可行;此法测定的膜厚与经典法测定的膜厚相比,结果基本一致,证实此法准确。在上述理论基础上,采用相分离法制备一系列不同工艺的微胶囊,分别测出膜厚及芯料释放速率,从而揭示微胶囊膜厚对芯料释放速率的影响规律。     

习语译法忠实程度比较研究

纽马克认为翻译时信息总会有不同程度的丢失，而根据信息丢失的多少，我们可以断定习语译法的忠实程度的高低。在不引起误解的前提下，直译不仅复制了习语的修辞语义，而且复制了其字面语义和修辞手段，是忠实程度最高的译法。意译的忠实程度最低。     

镉对大麦幼苗生长、淀粉酶活性及姐妹染色单体交换的影响

本文以大麦为实验材料，用不同浓度的镉溶液处理，通过对幼苗生长、淀粉酶活力及姐妹染色体单体交换（ＳＣＥ）等的研究表明，不同浓度的镉溶液可不同程度地抑制幼苗的生长．实验组的主胚根、最长侧根的长度、苗高以及根系体积均低于对照．镉还使胚乳中淀粉酶活性降低，这种抑制作用随镉浓度的增加而加强．此外，镉溶液可导致细胞有丝分裂指数的降低，细胞分裂减缓．ＳＣＥ作为一种灵敏的方法被用于检测诱变剂对ＤＮＡ的损伤，本文使用这一技术检测了镉对ＳＣＥ的影响，结果表明，实验组和对照组差异极为显著．     

逐个加入初始向量的Ritz向量法

本文综合了子空间迭代法和 Ritz 向量法的优点,采用多个初始向量逐个加入迭代的方式,提出了一种计算大型结构部分模态的改进方法.该法仍保持单个向量反选代的特点,在计算量上与 Ritz 向量法相同,而比子空间迭代法少得多,精度也不低于子空间迭代法.由于在理论上保证对重特征值的收钦性,因此在相同的迭代次数下,本法的精度优于一般的 Ritz 向量法和 Lanczos 法.     

消去开关刀节点的开关电容电路分析法

本文介绍一种旨在减少电路变量的线性开关电容电路(简称SC电路)的分析方法。这种方法借消去所谓开关刀节点(Pivot nodes)而使电路变量数显著减少。与文[1]中的方法相比,该法所减少的电路变量的个数为SC电路中单刀双掷开关的个数。为在计算机上自动形成消去开关刀节点后的电路的时域方程,在描述SC电路时,将采用以下4种电路元件模型:1.一般电容(它的两个极板永久地与某两节点相连);2.开关电容(它的一个或两个极板通过开关与电路中某些节点相连);3.独立电压源(表示电路的激励信号);4.电压控制电压源(表示运算放大器)。用本文所介绍的方法所导出的SC电路的时域方程与以节点电压为变量的时域方程具有完全相同的形式,但方程的变量数却显著地减少,从而使电路分析所需的计算时间明显减少。文中介绍的方法不仅适用于SC电路的时域分析、频域分析,而且结合文献[2]的基本思想还能方便地实现灵敏度分析。