七叶皂苷钠对宫颈癌瘤株体内外增殖的抑制作用

为了考察七叶皂苷钠的抗肿瘤活性并探讨其机制,研究了七叶皂苷钠对小鼠宫颈癌U_（14）的体内增殖抑制作用和对人宫颈癌Hela细胞的体外增殖抑制作用．建立昆明种小鼠的U_（14）宫颈癌模型,腹腔注射不同剂量七叶皂苷钠,观察瘤重及胸腺和脾脏指数．用MTT法检测不同浓度七叶皂苷钠对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响,AO／EB双染色和流式细胞术检测细胞凋亡,同时考察了七叶皂苷钠对Hela细胞的细胞周期调控作用．结果表明,2．8（mg／kg）·d的七叶皂苷钠可明显抑制小鼠宫颈癌U_（14）的体内增殖（P〈0．01）,七叶皂苷钠对Hela细胞体外生长的抑制率呈时间和浓度依赖关系,细胞周期发生G1／S期阻滞并出现细胞凋亡．七叶皂苷钠能够抑制宫颈癌瘤株的体内外增殖,其可能机制是改变细胞周期分布并诱导细胞凋亡．     

总状蕨藻盾叶变种多糖对小鼠T细胞亚群及NK细胞免疫功能的调节

目的:观察总状蕨藻盾叶变种多糖对正常小鼠T细胞亚群及NK细胞的免疫调节作用.方法:腹腔注射总状蕨藻盾叶变种多糖溶液,用流式细胞仪检测血中免疫参数(CD3 ,CD4 ,CD8 T细胞亚群百分比)和脾脏NK细胞百分比,并测定胸腺、脾脏指数.结果:总状蕨藻盾叶变种多糖能明显降低小鼠血中CD3 ,CD4 ,CD8 百分比(P＜0.05),同时增强脾脏NK细胞百分比(P＜0.05),并显著降低胸腺指数(P＜0.05),增加脾脏指数(P＜0.05).结论:总状蕨藻盾叶变种多糖对小鼠T细胞亚群和NK细胞具有双向的免疫调节作用.     

3-MA 对阿霉素诱导 K562、K562 / ADM 细胞凋亡及其相关基因 mRNA 表达的影响

目的：通过自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）对阿霉素（ADM）诱导白血病K562细胞及K562／ADM细胞的细胞效应和自噬基因Beclinl、凋亡抑制基因SurvivinmR．NA表达的变化观察,探讨自噬在细胞凋亡中的作用和机制．方法：体外培养K562和K562／ADM细胞,采用MTT法分别检测ADM及3-MA预处理对K562、K562／ADM细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时RT—PCR法检测细胞自噬及凋亡相关基因（Beclinl、Survivin）mRNA表达的变化．结果：ADM可抑制K562与K562／ADM细胞增殖,且抑制作用呈现浓度与时间依赖性．ADM诱导组K562与K562／ADM细胞在24h、48h、72h细胞凋亡率均较空白对照组明显提高（P〈0．05）．在ADM诱导前,经3-MA预处理可使ADM诱导的K562与K562／ADM细胞抑制率和细胞凋亡率均较单用ADM显著提高（尸〈0．05）,Bedin1、SurvivinmRNA相对表达量均较单用ADM明显下降（P〈0．05）,呈正相关（r=0．827,P〈0．01）．结论：ADM可抑制K562、K562／ADM细胞的生长,并诱导细胞凋亡．3-MA通过抑制细胞的自噬可增强ADM诱导白血病细胞K562、K562／ADM的凋亡,其机制可能与下调BeclinlmRNA表达,而使Survivin表达受抑制有关．     

黄连素对脑缺血再灌注小鼠胸腺细胞的保护作用

目的:研究黄连素(Ber)对脑缺血再灌注(MCAO/R)小鼠胸腺细胞的保护作用.方法:用线栓法建立小鼠脑缺血再灌注(MCAO/R)模型,缺血1h,再灌注24h,实验动物共分为3组:正常组、手术组和给药组(腹腔注射黄连素质量分数为5 mg/kg),缺血0.5h和再灌注12 h各给药1次.24h后取小鼠胸腺计算其胸腺指数,并取胸腺细胞利用SYTOX Green染色法联合荧光酶标仪检测细胞活性;AFM检测细胞形貌的变化;流式细胞仪结合Calcein/CoCl2或JC-1染色检测早期细胞凋亡率.结果:MCAO/R可引起胸腺明显萎缩;SYTOX Green染色结果显示MCAO/R损伤引起细胞高死亡率(P ＜0.05);AFM结果表明细胞表面形态发生显著变化(细胞高度差显著减小(P＜0.01);粗糙度变大(P＜0.05);Calcein/CoCl2和JC-1结果显示脑缺血再灌注后小鼠胸腺细胞的凋亡率显著增高(P＜0.01),而黄连素能显著改善胸腺的萎缩(P＜0.01),降低细胞的死亡率(P＜0.05),改善MCAO/R引起的细胞高度(P＜0.01)、粗糙度的变化(P＜0.05)和降低细胞的凋亡率(P＜0.05).结论:黄连素可能通过抑制胸腺细胞的凋亡而发挥对脑缺血再灌注的保护作用.     

17—β—雌二醇诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中信号转导的初步研究

研究了17β－雌二醇（17β－雌二醇（17β－E2）诱导的小鼠细胞凋亡与第二信使分子Ca^2 ／CaM的关系,17β－E2能诱导胸腺细胞亡,用EGTA螯合细胞外Ca^2 时,17β－E2所诱导的细胞凋亡则受到抑制;17β－E2能导致胸腺细胞内游离Ca^2 的浓度声速而持久地升高;相对正常对照组而言,17β-E2处理细胞内CaM含量显著下降,结果表明：17β－E2诱导小鼠胸腺细胞凋亡过程中,可能是通过Ca^2/CaM这个信号转导途径发挥作用。     

依地福新抑制Jurkat细胞生长机制的研究

目的观察依地福新对体外培养的Jurkat细胞的生长抑制作用,并进一步探讨其作用机制。方法应用MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞周期分布;Annexin V—FITC染色法检测细胞凋亡率。结果不同浓度依地福新处理Jurkat细胞24～96h后,细胞增殖显著受到抑制,并呈现浓度及时间依赖性;1．0μmol／L、5．0ymol／L、10．0μmol／L依地福新处理72h后,Jurkat细胞G0／G1期细胞数量显著增加,S期细胞数量显著降低（P〈0．01）;各浓度组细胞凋亡率均显著增加（P〈0．01）。结论依地福新对Jurkat细胞具有生长抑制作用,其机制与阻滞细胞周期及诱导凋亡有关。     

齿密螺旋体免疫抑制现象与T细胞凋亡的关系

用凝胶电泳DNA梯度图谱定性分析T淋巴细胞凋亡率;感染齿密螺旋体后不同时间的小鼠脾脏CD4^ 和CD8^ 细胞,用流式细胞仪动态检测CD4^ 和CD8^ 细胞的比值;两种细胞体外经齿密螺旋体超声破碎提取液刺激后,用流式细胞仪动态检测CD4^ 和CD8^ T细胞的凋亡率．结果显示：(1)齿密螺旋体可诱导小鼠脾细胞凋亡;(2)实验组小鼠脾脏CD4^ ／CD8^ T细胞的比值发生改变;(3)小鼠脾脏CD4^ 和CD8^ T细胞于体外经齿密螺旋体超声破碎提取液刺激后,小鼠CDFT细胞的凋亡率随时间的延长而明显增加;CD8^ T细胞的凋亡率低下,且不随感染时间的延长而变化．通过对齿密螺旋体免疫抑制现象与T细胞凋亡的关系的研究表明：齿密螺旋体与宿主免疫功能减退、CD4^ ／CD8^ T细胞的比值下降密切相关,其机制可能与齿密螺旋体超声破碎提取液含具有能引起T细胞凋亡的成分有关．     

地塞米松对LPS诱导的小鼠24p3 mRNA表达的影响

采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法研究了脂多糖（lipopolysaccharide ,LPS）诱导的炎症中小鼠免疫器官脾脏和胸腺中24p3 mRNA含量的变化以及糖皮质激素地塞米松（DEX）对它的影响.结果表明,应急时相反应蛋白24p3不仅能被促炎症因素LPS还能被抑炎症因子DEX诱导,并且两者都呈时间依赖性的诱导24p3 mRNA的表达,但两者作用机制以及反应时间不同,DEX的作用较LPS缓慢.LPS和DEX共同作用时DEX起了主导作用,即24p3 mRNA的表达与地塞米松单独作用时趋势一致     

IL－10与放线菌酮诱导K562细胞凋亡

目的：研究IL－10对放线菌酮（CHX）诱导K562细菌凋亡所产生的调节作用。方法：采用碘化丙啶（PI）染色流式细胞仪分析，形态学观察及DNA凝胶电泳检测K562细胞。结果：CHX组K562凋亡细胞达58．3％，CHX加IL－10组达75．8％。结论：（1）CHX能诱导K562细胞凋亡。（2）IL－10和CHX联合作用诱导K562细胞凋亡的作用增强。     

白藜芦醇诱导人T淋巴瘤Jurkat细胞凋亡的研究

用荧光染色、透射电镜、Wright-Giemsa染色方法检测人T淋巴瘤Jurkat细胞在白藜芦醇（resveratrol，Res）诱导凋亡时的形态学变化情况，并用流式细胞仪对其进行定量分析，Westblot检测部分凋亡信号分子分泌的变化情况．发现白藜芦醇能明显诱导该细胞凋亡，显现出典型的凋亡现象，且凋亡有明显的药物依赖性．流式细胞仪检测发现，各药物处理组（0．125，0．25，0．5，1．0，2．0μL／mL）的凋亡率（3．01％，8．93％，17．97％，22．45％，32．88％）和对照组的凋亡百分率（0．91%）比较有显著性差异．West Blot检测则发现，Ras降低了bcl-xl，bax的表达，以至不能进一步产生bcl-2／bax和bcl-2／bcl-xL二聚体来抑制细胞凋亡，即减除了这些凋亡抑制因子对细胞凋亡的抑制，从而使细胞顺利进入caspase介导的凋亡途径．     

vvIBDV诱导幼鸡免疫细胞凋亡的研究

为研究超强毒传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)感染的致病机理，在3-6周龄SPF幼鸡法氏囊、脾脏、胸腺细胞培养体系中加入vvIBDv，以流式细胞术(FcM)、DNA琼脂糖凝胶电泳技术检测vvIBDV诱导的细胞凋亡，结果表明，在本实验的体外培养体系中，vvIBDV可直接和迅速引起幼鸡法氏囊细胞凋亡，对脾脏或胸腺细胞并无明显的作用．     

实验性免疫应激雏鸡胸腺T细胞研究

用ND（新城疫）I系疫苗大剂量肌肉注射2周龄雏鸡的方法建立实验性免疫应激模型，检测胸腺中CIM＋、CD8＋T细胞动态变化以及超微结构变化．结果显示：免疫应激前期（1—5d）表现为CIM＋T细胞数目减少，CD8＋T细胞数目增加的趋势；部分T细胞发生凋亡，并且是一个逐渐加剧的过程，呈现从凋亡到坏死的病理学变化过程．     

束缚浸水应激对大鼠白细胞数量的影响

探讨束缚浸水应激对大鼠外周血白细胞数量的影响．采用大鼠束缚浸水应激模型,观察大鼠束缚浸水、切断迷走神经、阿托品和酚妥拉明对白细胞数量的影响．与正常对照组相比,束缚浸水应激组白细胞、中性粒细胞以及淋巴细胞的数目显著减少（P〈0．05）;与不切断迷走神经相比,切断迷走神经组中自细胞和嗜酸性粒细胞的数目显著降低（P〈0．05）,中性粒细胞与单核细胞数目非常显著减少（P〈0．01）;与束缚浸水应激相比,注射阿托品组中,各免疫细胞数目无明显差异;注射酚妥拉明大鼠淋巴细胞显著减少（P〈0．05）,白细胞数量虽然升高,但不明显．束缚浸水应激能显著降低外周血的白细胞、中性粒细胞及淋巴细胞的数目,迷走神经和交感神经参与了束缚浸水应激过程,且可能影响免疫细胞的数目     

沙眼衣原体抑制宿主细胞凋亡的研究

目的探讨沙眼衣原体D血清型感染对宿主细胞凋亡的影响。方法沙眼衣原体D血清型感染的Hela229细胞经凋亡诱导剂依托泊苷（etoposide）作用后,Hoechst33．258染色、荧光显微镜观察核浓缩和凋亡小体,流式细胞仪检测凋亡率。结果经依托泊苷作用后,未感染的Hela229细胞有凋亡形态学特征,沙眼衣原体感染的Hela229细胞则无明显凋亡形态学改变,两者的凋亡率比较有统计学意义（P〈0．05）。结论沙眼衣原体感染后能抑制诱导剂诱导的宿主细胞凋亡。     

六亚甲基二乙酰胺对粘液表皮样癌细胞P21和P53基因的转录激活作用

为了研究分化诱导剂六亚甲基二乙酰胺（hexamethylene bisacetamide,HMBA)在体外诱导人粘液表皮样癌细胞（MEC－1）时P^21（cip1/waf1),P^53基因调控的机理，从而为临床治疗提供理论依据。选用0．002mol/L HMBA和0．001g/L5-FU对培养的MEC－1细胞外诱导72h，分别采用光镜，TUNEL染色，免疫组化，图像分析等方法进行凋亡细胞的检测及P^21(cip1/waf1),P^53表达的定量分析，结果表明HMBA诱导的MEC－1细胞P^21(cip1/waf1)表达强度显著高于对照组（P＜0．01），P^53的表达强度显著低于对照组（P＜0．01），提示HMBA通过激活转录因子P^21(cip1/waf1)，P^53的表达而发挥对粘液表皮样品部细胞诱导分化，促进凋亡的作用。     

类叶牡丹根茎水煎剂抗炎作用研究

类叶牡丹的根茎水煎剂可显著减轻巴豆油引起的小鼠（15g／kg）耳肿胀（P＜0．01），对醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性亦有抑制作用（P＜0．01）。     

类叶牡丹根茎水煎剂镇痛作用研究

类叶牡丹的根茎水煎剂可显著延长热板法所致小鼠痛阈值（P＜0．01），对醋酸引起小鼠躯体疼痛亦有显著抑制作用（P＜0．01）。     

人参皂甙对大鼠缺血再灌注心肌保护作用的研究

研究人参皂甙对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的拮抗作用及其对缺血再灌注心肌保护作用的机制。用电镜观察心肌细胞的超微结构变化,TUNEL法原位标记凋亡的心肌细胞,免疫组化技术和图像分析技术检测心肌细胞内Bcl-2蛋白的表达。缺血再灌注组电镜观察发现,心肌细胞出现典型凋亡结构特征。TUNEL染色结果表明：用人参皂甙保护后的心肌细胞凋亡指数明显下降（P＜0．01）,而心肌细胞内Bcl-2蛋白表达明显升高（P＜0．01）。     

28例哮喘性支气管炎患儿的免疫功能测定及其意义

目的：通过对28例喘支患儿外周血T细胞亚群和血清免疫球蛋白及补体C3的测定，分析喘支患儿细胞免疫和体液免疫功能的变化。方法：（1）T细胞亚群（CD3＋，CD4＋，CD8＋）的测定，采用APAAP法。（2）血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM及补体C3用免疫比浊法检测，结果：（1）喘支患儿CD8＋细胞比例明显低于正常对照组（P＜0．01），CD4＋，CD8＋细胞比值明显高于正常对照（P＜0．05），（2）喘支患儿血清中IgA明显降低（P＜0．05），结论：T细胞免疫调节功能紊乱，在喘支的发生中起着一定的作用，为临床上喘支的防治及免疫调节剂的应用提供了理论依据。     

三氧化二砷对原代恶性淋巴瘤细胞的作用

目的：研究不同浓度的三氧化二砷对原代淋巴瘤细胞的影响，方法：采用台盼蓝拒染法观察细胞的活力，原位末端标记法（TUENL）检测凋亡细胞，流式细胞仪检测细胞的DNA含量，结果：0．5－2．0umol/L三氧化二砷能显著地抑制原代淋巴瘤细胞的活力，并能诱导原代淋巴瘤细胞凋亡，结论：三氧化二砷有可能用于恶性淋巴瘤的治疗。