甜瓜原生质体培养及胚状体发生的初步探讨

以甜瓜无菌苗子叶为供试材料游离原生质体,原生质体在1/2MS培养基附加2,4-D1.0mg/L、6—BA0.5mg/L中做液体浅层培养。4～5天细胞第1次分裂,两周后形成小细胞团,添加低渗培养基继续培养,产生大量愈伤组织和部分胚状体。     

正交设计法探讨茯苓原生质体的最佳制备条件

应用正交设计法研究了不同因素对茯苓原生质体制备的影响.实验结果表明，渗稳剂的种类和酶解时间对茯苓原生质体产量的影响最显著；培养5 d的菌丝体在30 mg/L溶壁酶＋20 mg/L蜗牛酶的酶液中，以0.6 mol/L的蔗糖作为渗稳剂，30℃酶解1 h，茯苓原生质体的产量最高.     

百合两个品种植株再生能力的比较

供试百合为DameBlanche和Mediterranee两个品种,结果表明：Medeterranee的再生能力比Dame Blanche强,DameBlanche和Mediterranee的最佳培养基分别为MS附加BA1．0mg/L,IAA0.5mg/L,NAA0.5mg/L和MS附加BA1．5mg/L,IAA0.5mg/L,NAA1.0mg/L.     

凤尾兰花瓣组织培养初报

将凤尾兰花瓣接种于MS基本培养基上,培养基附加2.4—D0、5mg/l、NAA0.5—1mg/l、6—BA2mg/l、水解乳蛋白500mg/l及蔗糖3％诱导愈伤组织的形成。MS培养基附加6—BA2mg/l,NAA0.5mg/l及蔗糖3％诱导愈伤组织分化。值得注意的是在培养过程中,花瓣小片以及愈伤组织的颜色有几次转变。在愈伤组织上首先分化出小根,逐渐分化出小苗。     

荨麻青霉(Penicillium urticae)原生质体的制备与再生

对荨麻青霉原生质体的高效制备以及再生方法进行了探索.结果显示荨麻青霉较为适合的原生质体制备及再生条件的组合:菌龄为28 ℃恒温下培养20～22 h,DTT预处理0.5 h,以7 mg/mL的纤维素酶,7 mg/mL蜗牛酶,5 mg/mL溶菌酶为混合酶,0.6 mol/L的NaCl作为渗透压稳定剂,28 ℃恒温酶解3.5 h,PDA高渗双层培养基再生.该组合制备原生质体形成量达到1.59×107～1.89×107/mL,其再生率达到16.24%～19.25%.     

拟南芥叶肉细胞原生质体分离及影响因素

通过对拟南芥(Arabidopsis thaliana)叶肉细胞原生质体分离条件的研究,探讨了酶解法制备拟南芥叶肉细胞原生质体的分离条件和影响因素.在不同纤维素酶质量浓度、山梨醇质量浓度、酶解液pH值、酶解时间下,测定了拟南芥叶肉细胞原生质体的产量.结果表明,在20 g/L纤维素酶、140 g/L山梨醇、pH=5.8的酶解液中,酶解时间为1.5 h,原生质体产量最高.同时,在相同分离条件下测定了拟南芥幼叶和老叶的原生质体产量,结果表明,幼叶原生质体产量显著高于老叶.     

木质素降解菌L1原生质体的形成和再生

从自然界筛选出一株降解木质素高的白腐真菌 L1,对其原生质体的形成和再生进行了研究。在 OS培养基中生长的菌丝体 ,原生质体数量较高。在液体培养条件下 ,于 OS培养基中培养 60 h的菌丝体 ,用 0 .3% β-巯基乙醇与酶液同时处理菌丝体 ,采用 p H5 .0的混合酶 (蜗牛酶∶纤维素酶∶溶菌酶的最佳浓度比为 5∶ 4∶ 1 ) ;在 30℃酶解 4h;用 0 .4mol/L NH4Cl,1 0 mmol/L Mg SO4作渗透压稳定剂时 ,原生质体数量达到 4.32× 1 0 5个 /mg。 OS双层再生培养基最适于原生质体再生     

金盏菊叶片组织培养再生植株

金盏菊离体叶片培养采用MS培养基,诱导愈伤组织时,附加2,4—D0.5mg/l、NAA0.5—1mg/l、6—BA2mg/l、水解乳蛋白500mg/l。诱导愈伤组织分化时则附加6—BA2mg/l、NAA0.5mg/l。诱导根生成时,附加IBA2mg/l。所有培养基的蔗糖浓度均为3％,PH5.8—6.0。经一段时间培养后获得金盏菊再生植株。     

一株耐盐性酵母的原生质体化及再生条件的优化研究

对一株耐盐性酵母Zygosaccharomyces rouxii的原生质体化及再生条件进行了实验研究.结果表明:用0.5 mg/mL(10 unit/mL)细胞壁溶解酶zymolyase20T在1.0~1.5 mol/L山梨糖醇渗透压调节剂的浓度范围内,原生质体化率可达99%以上,再生率在2%~11%之间,而且用磷酸钾缓冲液比用Tris-HCl缓冲液再生率高.在山梨糖醇浓度1.5 mol/L,zymolyase20T浓度0.5 mg/mL,磷酸钾缓冲液0.1 mol/L(pH6.0)时,30℃、60 min,再生率达30%以上.     

桂竹香花托诱导再生植株的研究

用桂竹香带子房花托,在附加6-BA2.00～3.00mg/L+NAA0.1～0.5mg/L的MS培养基上诱导出愈伤组织后,转接到附加6-BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L的MS培养基上,分化出的丛生芽状态最佳,丛生芽在附加NAA0.5mg/L的1/2MS培养基中可诱导出多而粗壮的根.