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相似文献
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1.
总RNA提取方法的比较与分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
用TRIZOL法、CTAB法和改良的热硼酸盐法从水稻叶片中提取总RNA,结果表明用这三种方法提取总RNA的OD260nm/OD280nm值分别为1.896、1.992和1.657。琼脂糖电泳表明,用改良的热硼酸盐法提取的RNA降解严重,用TRIZOL法提取的总RNA有部分降解,而CTAB法提取的总RNA完整、未降解,可用于后续实验。因此CTAB法更适于从水稻叶片中提取总RNA。  相似文献   

2.
铁观音茶树不同生育时期叶片为材料,采用Tripure试剂法、申能博彩试剂盒与Tripure试剂相结合的方法提取茶树叶片总RNA。结果表明,Tripure试剂法比结合法更适宜提取铁观音茶树RNA,该方法提取的RNA 28S、18S和5S rRNA条带清晰明亮;OD260/OD280值在1.7~2.0之间,说明该方法提取的RNA完整性和纯度好,可用于进行后续分子生物学实验。  相似文献   

3.
采用Trizol法及试剂盒柱提法提取角倍蚜若虫及成虫总RNA,通过紫外分光光度法(OD260/OD280、OD260/OD230)及琼脂糖凝胶电泳检测,对所提取RNA的纯度、浓度及完整性进行了分析.结果表明,采用常规样品量两种方法提取的RNA均降解严重,分析认为角倍蚜富含内源性RNase.通过大幅降低样品量,优化提取步骤,缩短提取时间,有效消除了RNA降解现象.采用Trizol法获得了纯度高、完整性好的RNA样品,电泳显示清晰的28S、18S及5S三条带;试剂盒柱提法获得的RNA呈现较为特殊的带型,没有常规的5S条带,而在750bp~1 000bp之间有一明显条带.  相似文献   

4.
宋伟  魏书杰 《中国西部科技》2010,9(14):50-51,96
目的:比较四种不同样品处理方法对人胎盘组织总RNA提取的影响,为RNA提取时的组织处理方法提供实验依据。方法:将新鲜人胎盘组织按0.1g的重量分成相等的80份,按照随机原则分成4组,每组分别采取不同的处理方法后置于液氮罐中保存并于日后用Trizol法进行总RNA提取,通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计对RNA的浓度和纯度进行检测,所得数据进行统计学处理。结果:(1)提取成功率P0.05,差异无显著性意义;(2)琼脂糖凝胶电泳总RNA样品较为完整,基本无降解;(3)纯度(OD260/OD280值代表)P0.05,差异无显著性意义;(4)浓度P0.05,差异无显著性意义。结论:尚无足够的证据证明,不同的处理方法对用Trizol法从人胎盘组织中提取总RNA有影响,在实际工作中我们可以采取较为简便、节约的方法。  相似文献   

5.
仙鹤藓RNA提取不同方法比较   总被引:7,自引:0,他引:7  
用从雾灵山寒冷干燥生境中采集到的仙鹤藓,建立可控制的“干燥-复水”工作体系,用于寻找与耐旱相关的差异表达基因,为进行植物抗旱基因工程提供可以利用的目的基因.总RNA的分离是进行分子操作的关键和基础.然而,仙鹤藓材料以其组分的特殊性造成了提取组织总RNA的困难.同时干燥和复水处理过的材料,由于次生代谢物增多,严重的影响到总RNA的提取和质量.本文通过探索行之有效的材料处理方法,比较不同提取藓类植物总RNA方法的优劣,提供可供参考的总RNA提取方法.  相似文献   

6.
应用Trizol法从山羊子宫内膜中提取RNA,根据已获得的山羊IFN基因序列设计并合成引物,采用RT-PCR技术进行IFN基因的扩增。结果表明,所提取的RNA经琼脂糖凝胶电泳呈现出28S r RNA、18S r RNA 2条清晰的条带,其OD260/OD280值为1.91,RT-PCR得到的条带与目的片断大小一致,说明所提取的RNA纯度高、无降解,可进一步用于干扰素的分子生物学研究。  相似文献   

7.
香蕉不同组织中总RNA提取方法的研究   总被引:9,自引:0,他引:9  
针对香蕉组织中多糖、多酚等次生物质含量高的特点,以香蕉根、茎、叶、果实为试材,对其总RNA提取进行研究.比较了SDS法、改良SDS法、改良CTAB法和Trizol试剂盒法提取总RNA的效果,结果分析表明:改良SDS法能从香蕉根、茎、叶中获得质量高、完整性较好的总RNA,而改良CTAB法对果实的提取效果较佳,所得A260/A280均高于1.8,A260/A230大于2,0,28 S rRNA带的亮度约是18 S rRNA的2倍.其产率在根、茎、叶中均在400μg·g^-1以上,果实中可达49.34μg·g-^1.以上2种方法所得的总RNA均能满足RTPCR、Northern blot和cDNA文库建立等分子生物学研究,且具有快速、简便易行、成本较低的特点,适合于富含多糖、多酚的植物材料.  相似文献   

8.
以白芥为材料,分别采用柱式植物总RNA抽提纯化试剂盒法、RNAisoPlus法和CTAB-异丙醇法3种方法提取白芥叶片总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计及RT-PCR反应进行检测,最后对3种方法得到的结果进行分析比较.结果表明,RNAisoPlus法提取出的总RNA条带与其他方法相比更为清晰,A260/A280比值介于1.9~2.1之间,该方法更适合用于白芥叶片总RNA的提取.  相似文献   

9.
库尔勒香梨总RNA的快速提取方法   总被引:2,自引:1,他引:2  
以库尔勒香梨花、芽、茎尖、叶片和皮层为材料,对总RNA提取方法进行了改进,从而筛选出适合库尔勒香梨总RNA的提取方法。采用该方法可以在3-4h内得到纯度高、含量高、完整性好的梨总RNA,并获得了逆转录活性较强的病毒RNA,同时使提取成本降低。此方法对苹果、葡萄、桃等果树总RNA的提取均适用。  相似文献   

10.
以超积累生态型、非超积累生态型东南景天(SedumalfrediiHance)的嫩叶为材料,采用CTAB法、SDS法、尿素法、柠檬酸钠法提取DNA,比较不同方法提取DNA的效率.结果表明,采用4种方法提取超积累生态型东南景天和非超积累生态型东南景天的DNA,其OD260/OD280的比值在1.8~2.0之间;除柠檬酸钠法外,其余3种方法提取的DNAOD26。/OD230的比值均大于2.0;其DNA浓度和得率都是尿素法〉CTAB法〉SDS法〉柠檬酸钠法,从琼脂糖凝胶电泳图来看,也是尿素法效果最好.因此,认为尿素法适合于超积累生态型和非超积累生态型东南景天DNA的提取.  相似文献   

11.
介绍了基于介质阻挡放电的氯化氪(KrCl*)准分子灯的光谱、输入功率以及222 nm的辐射效率.KrCl*准分子灯为同轴结构,内管和外管的内/外径分别为14/16,37.6/40 mm.灯内总气压为200 hPa,其中含2 hPa氯气和198 hPa氪气.KrCl*准分子灯由正弦电源驱动.测定辐照度后,通过Keitz公式计算222 nm的辐射功率,而灯的功率则通过示波器结合高压探头和电流互感器来测量.结果表明,KrCl*准分子灯在正弦电源频率48.4 kHz,输入功率150 W时222 nm辐射的最佳效率为5.3%.  相似文献   

12.
宇宙大爆炸及宇宙演化   总被引:7,自引:1,他引:6  
 给出了宇观天体和微观粒子质量、半径的统一计算式,计算结果与实验基本相符.认为宇宙大爆炸是“超微黑洞”(即前宇宙)的大爆炸,否定了点大爆炸的传统观点.爆炸后的宇宙背景是光子热平衡态和引力束缚态共存的系统,平衡态占优势则宇宙必然膨胀.暗物质、暗能量的本质是什么?它们会怎样左右宇宙的命运?最后也阐明所谓的“大沙漠”区并非一无所有,它分布着三代费米子的超对称伴子——三代玻色型粒子成员.  相似文献   

13.
以正交试验测取的多项结果指标,采用分组统计的方法,进行F方差检验证明:发酵液中残留还原糖、菌体数量(OD680nm值)和丙三醇之间存在着极显著相互制约关系.在本实验条件下,当控制菌体增长浓度为OD680nm值0.622,还原糖质量分数为1.67%时,丙三醇产生量最多.  相似文献   

14.
以沙葱种子和沙葱幼叶为材料,分别用RNAiso Plus试剂法、RNAiso Plus醋酸钠改进法、CTAB-异丙醇法、CTAB-LiCl法4种不同的方法提取沙葱总RNA,经琼脂糖凝胶电泳,采用紫外分光光度法测定总RNA纯度并进行RT-PCR检测.结果表明,沙葱不同组织总RNA提取的最优方法有所不同.采用CTAB-LiCl法能有效地提取出沙葱种子高质量、完整性好而且无胶状不溶物的RNA,没有明显的蛋白和基因组DNA的污染.采用RNAiso Plus醋酸钠改进法能有效地去除沙葱幼叶中多糖的干扰,所提取的RNA条带清晰,完整性好,是沙葱幼叶总RNA提取的有效方法.  相似文献   

15.
Number size distributions (NSDs, 10--487 nm) and composition of nanoparticle emitted from an engine fueled with ordinary diesel (OD) and low sulfur diesel (LSD) fuel were comparatively studied. The results indicate that, compared with the OD, the LSD was found to slightly decrease the mass concentration, and significantly reduce the number concentration of the total particles (10--487 nm), and the reduction of number increased with the speed and load of engine. The NSD for the two fuels showed a similar bimodal structure under all test engine conditions. Under the same engine conditions, the nucleation mode for LSD fuel was significantly lower than that of ordinary diesel. However, the accumulation mode for the two fuels showed little difference. The elements composition of exhaust particles included C, O, Cl, S, Si, Ca, Na, AI and K. The S element was not detected in LSD fuel case. The main component of soluble organic fraction (SOF) of exhaust particles for the two fuels included saturated alkane (C15-C26), ester and polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs). However, PAHs were not found in LSD fuel case.  相似文献   

16.
在对传统CTAB法进行改进的基础上,提取了沙藏珙桐休眠期去中果皮种子高质量基因组DNA,琼脂糖电泳及紫外分光光度分析,表明其OD260nm/OD280nm在1.8—2.0之间,用所提取的基因组DNA作为模板,S17为引物,进行RAPD扩增,获得了清晰的扩增图谱.  相似文献   

17.
为探索香花槐各组织总RNA提取的最佳方法,以实验苗圃中的香花槐为实验材料,在比较了Trizol试剂法和常规CTAB法的基础上,建立了香花槐不同组织的最适提取方法.改良CTAB法利用高质量浓度的β-巯基乙醇和合适质量浓度的聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)来防止RNA提取过程中多酚的氧化,然后增加苯酚/氯仿抽提次数来去除香花槐叶片和茎皮过多蛋白质.改良Trizol试剂法在根皮中加PVP研磨成白色粉末,可以有效地防止反应液褐化.各组织优化方法经琼脂糖凝胶电泳检测,所提取的总RNA的28S、18S条带清晰明亮,无降解;其A260nm/A280nm值为2.0,表明提取的总RNA质量较好.  相似文献   

18.
以普通山银花作对照,采用紫外分光光度法,测定"雷雨一号"山银花及其培育亲本叶片和花蕾提取物中绿原酸的吸光值,并根据标准溶液回归曲线计算样品中绿原酸含量.结果表明,绿原酸浓度在0.02~0.10 mg/mL范围内与吸光度线性关系良好(R2=0.999 1);加样回收率平均值为99.98%(n=9),RSD=1.48%;"雷雨一号"、砧木亲本、接穗亲本干燥花蕾绿原酸含量分别为7.69%,4.75%,12.58%,均高于对照药材绿原酸含量4.43%.  相似文献   

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