卵巢内动脉血流搏动指数与卵子质量及卵泡发育的关系

目的:探讨卵巢内动脉血流搏动指数(PI)与卵子质量及卵泡发育的关系.方法:应用阴式彩色多普勒超声测定35例患者给予HCG日的卵巢内动脉血流搏动指数和穿刺取卵日的卵巢动脉血流搏动指数,获成熟卵率、卵泡液激素水平、颗粒细胞的凋亡率.结果:穿刺取卵日测得的PI与获成熟卵率成正相关(r=0.429,p=0.0126),和颗粒细胞的凋亡成负相关(r=-0.383,p=0.0278),和卵泡液的孕激素含量成负相关(r=-0.429,p=0.0126),仅给予HCG后PI与总获卵数成负相关(r=-0.393,p=0.0235).结论:穿刺取卵日的测到PI值与卵泡颗粒细胞凋亡及卵泡的发育成熟有显著相关性,可以作为衡量卵泡黄素化、氧化以及卵泡质量的一个很好的评估指标.     

D-半乳糖诱导青年树鼩卵巢衰老

目的 通过D-半乳糖诱导法建立树鼩衰老模型,为卵巢衰老的研究提供模型参考方案。方法 (1)筛选青年树鼩8只,随机分为对照组(n=4)与模型组(n=4)。(2)模型组按8 g/kg的剂量颈背部皮下注射D-半乳糖5个月,采集卵巢,液氮冻存以及4%多聚甲醛固定。(3)HE染色观测卵巢组织结构;免疫组织化学染色观测衰老相关标志分子蛋白表达;Ki67染色观测增殖活性;Tunel染色观测细胞凋亡。结果 (1)对照组树鼩卵巢组织髓质与间质界限明显,细胞排列整齐,可见原始、初级、次级和成熟卵泡,有少量闭锁卵泡;模型组树鼩卵巢组织结构散乱,局部只见原始、初级卵泡,有大量闭锁卵泡。(2)模型组衰老相关标志分子P53、P21、P16蛋白表达水平明显高于对照组。(3)模型组细胞增殖活性显著低于对照组。(4)模型组卵巢细胞凋亡率显著高于对照组。结论 D-半乳糖可诱导卵巢组织结构散乱,卵泡闭锁,使细胞增殖活性减弱,凋亡率增加。     

孕期高雄大鼠子代实验性多囊卵巢综合征模型构建

通过母体高雄环境建立子代实验性多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,并证明此模型大鼠存在卵巢局部胰岛素抵抗。方法是给孕16d的雌鼠皮下注射丙酸睾丸酮,诱导其子代雌鼠发生PCOS,观察子代大鼠体重、动情周期变化、性激素变化及糖代谢变化、卵巢重量和卵巢形态变化、肌肉组织蛋白印迹测定PI-3K和MAPK通路关键蛋白的表达、卵巢免疫组化和蛋白印迹测定PI-3K和MAPK通路关键蛋白的表达确定。结果显示:①动情周期失去规律变化,提示无排卵;②血清17-OHP,A2,T升高;③卵巢组织学检查可镜下看到早期发育的较多的小卵泡、闭锁卵泡,囊状扩张卵泡明显增加,颗粒细胞层数减少,黄体数量明显减少;④OGTT:1h血糖及胰岛素高于对照组,模型组存在着胰岛素抵抗;⑤卵巢局部PI-3K和MAPK途径关键蛋白有表达;⑥卵巢局部蛋白印迹测定PI-3K和MAPK途径关键蛋白IRS-1,P85,GLUT4降低,ERK1升高。由此表明:①此模型大鼠符合PCOS的诊断标准;②此模型大鼠存在卵巢局部胰岛素抵抗。     

中药复方液对麻黄素损伤小鼠卵巢的保护作用

为了研究中药对麻黄素损伤小鼠卵巢的影响,将60只受孕小鼠随机分为对照组、麻黄素组与中药组.对照组腹腔连续注射生理盐水,麻黄素组与中药组均腹腔注射0.2mL 6g·L-1麻黄素溶液,中药组在注射麻黄素溶液1h后灌胃0.3mL的中药复方液.在处理15、20、25d后,分别用ELISA法测定小鼠血浆中肾上腺素(EPI)、雌二醇(E2)含量的变化,用比色法检测卵巢组织SOD活性及MDA含量的变化,称量卵巢重量,用生物显微技术观察卵巢组织的显微结构,计数次级卵泡与闭锁卵泡数量,测量次级卵泡直径,用免疫组织化学法检测Bax蛋白在卵巢组织中表达的变化.结果显示,麻黄素组小鼠血浆EPI浓度升高,E2浓度降低,卵巢组织SOD活性降低,MDA含量升高,次级卵泡与闭锁卵泡数量增多,次级卵泡直径减小,卵巢组织受损,结构紊乱,颗粒细胞排列松散、降解,黄体细胞核固缩,Bax蛋白的表达增强.与麻黄素组相比,中药组小鼠血浆中EPI浓度降低,E2浓度升高,卵巢组织SOD活性明显升高,MDA含量降低,卵巢结构清晰,次级卵泡数量减少,颗粒细胞排列紧密整齐,崩解减少,Bax蛋白的阳性表达明显减少.研究结果表明,中药复方液对麻黄素损伤小鼠卵巢有一定的保护作用,这可能与SOD活性和Bax蛋白的表达有关.     

猕猴从幼年到老年的卵巢组织学变化

摘要:目的 观察猕猴的卵巢组织从幼年到老年的变化情况,探索猕猴的卵巢随着年龄增长发生变化的机制,为卵巢衰老的研究提供组织学参考。 方法 (1)筛选幼年猕猴 3 只,青年猕猴 3 只,老年猕猴 3 只。 ( 2) 安乐死处理猕猴,取卵巢组织,电子天平称质量并拍照,横向切成 4 份,置于 4%多聚甲醛固定。 (3) HE 染色观察卵巢组织各级卵泡与结构变化;Masson 染色观察卵巢组织纤维化程度;Tunel 染色统计分析卵巢细胞的凋亡率;免疫组织化学染色统计血管个数。 结果 (1)幼年猕猴的卵巢脏器指数与青年猕猴的无显著差异,都高于老年猕猴的卵巢脏器指数。(2)幼年与青年猕猴的卵巢组织中可见原始、初级、次级,成熟卵泡;老年猕猴的卵巢局部只见闭锁卵泡,大部分被脂肪组织填充。 (3)幼年猕猴的卵巢纤维化程度高于青年猕猴,老年猕猴纤维化程度最高。 ( 4) 幼年猕猴卵巢细胞凋亡率与青年猕猴的无显著差异,都显著低于老年猕猴。 (5)幼年猕猴血管个数最多,青年猕猴多于高于老年猕猴。 结论 随着年龄增长,猕猴卵巢组织中卵泡数量逐渐减少、髓质被大量脂肪组织填充、间质排列散乱,这一生物学过程与卵巢纤维化程度增强、卵巢细胞凋亡率增加、血管个数减少相关。     

大鼠怀孕及哺乳期铅暴露致子鼠海马c-JUN表达的变化

通过观察大鼠怀孕期及哺乳期铅摄入致子鼠海马回c-jun的变化。用RT-PCR的方法分别检测大鼠怀孕期铅暴露后子鼠和母鼠哺乳期铅暴露后子鼠(子鼠出生早期经乳汁染铅后)脑海马组织的c-jun的变化。结果:大鼠怀孕早期和晚期铅暴露,子鼠出生2 d时海马的c-jun的表达明显受到抑制,出生后经哺乳低剂量铅暴露子鼠c-jun的表达受到明显抑制,而高剂量暴露的却增加了c-jun的表达,达对照组的3倍。子鼠出生4 d海马的c-jun的表达与对照组比较略高,且与出生2 d相比均有所增加。而出生后经哺乳高剂量铅暴露子鼠c-jun的表达依然明显高于对照组,达对照组的4倍。子鼠出生10 d海马的c-jun的表达较4 d时下降,但怀孕早期高剂量暴露组和晚期各暴露剂量均高于对照组。而出生后经哺乳暴露鼠c-jun的表达呈增多趋势,其中高剂量铅暴露子鼠c-jun的表达依然明显高于对照组,达对照组的近10倍。子鼠生后20 d时海马的c-jun的表达均显著增加,各剂量组呈现剂量效应,即随剂量增加表达增多,但表达量均低于对照组。结论:大鼠不同的铅暴露时间和强度对子鼠脑海马c-jun的表达变化不同,同时建立了RT-PCR的检测方法并在毒理学实验中进行了初步应用。     

PM_(10)暴露诱导大鼠心肌损伤效应研究

对大鼠进行了采暖期不同浓度PM10染毒处理,然后对大鼠心脏组织的病理学变化及炎症相关因子iNOS和凋亡相关因子p53的mRNA表达进行了研究;接着使大鼠暴露于浓度均为10mg/kg不同季节PM10下,检测了大鼠心脏组织中炎症相关因子IL-1β、ICAM-1、COX-2和iNOS的mRNA表达变化。HE染色观察表明,高浓度PM10暴露可以诱导大鼠心脏组织炎症反应发生,iNOS和p53mRNA表达增加与这一结果相吻合,且春季冬季效应显著。上述结果提示,PM10暴露可能通过炎症反应造成心肌损伤,且其损伤效应与浓度和季节有关。     

c-fos和CYP17对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞雄激素分泌过多的影响及机制

 为研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞中c-fos 及CYP17 基因表达的变化,探讨c-fos 及CYP17 基因对PCOS 卵巢颗粒细胞雄激素分泌的影响及可能的作用机制,对拟行IVF/ICSI-ET 的PCOS 患者及非PCOS 患者分为对照组(非PCOS 患者)和PCOS 组(PCOS 患者),两组患者的卵巢颗粒细胞进行体外培养48 h,利用放射免疫法检测细胞上清液中的雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)的水平;利用2-NBDG 标记葡萄糖检测颗粒细胞的葡萄糖摄取能力;采用免疫蛋白印迹(WesternBlot)法分别评估颗粒细胞中c-fos 及CYP17 基因的表达变化。结果发现,PCOS 组患者与对照组患者相比,颗粒细胞培养上清液中睾酮水平升高(P<0.05)、孕酮水平降低(P<0.05)、雌二醇水平无明显变化(P>0.05),且颗粒细胞对2-NBDG 标记葡萄糖摄取明显降低(P<0.05),提示PCOS 患者卵巢颗粒细胞雄激素分泌异常增高,并存在糖代谢异常。与对照组患者相比,PCOS组患者颗粒细胞CYP17 基因表达升高(P<0.05),c-fos 基因表达降低(P<0.05),提示颗粒细胞c-fos 基因异常低表达,可能降低了对CYP17 基因的抑制作用,使CYP17 高表达,可能是卵巢颗粒细胞雄激素分泌增加的原因之一。     

不同地方种群黄鳝暴露在亚硝酸钠环境中对其免疫、抗氧化和肌肉生长能力的影响

亚硝酸盐是自然界和人工养殖环境中常见的含氮化合物,对水产养殖动物具有毒害作用.本文利用亚硝酸钠对江西鄱阳湖(PYH)、湖南洞庭湖(DTH)、安徽巢湖(CH)、江苏洪泽湖(HZH)和太湖(TH)野生黄鳝(Monopterus albus)种群进行暴露,检测其肝脏组织中MHC-2A、Hepcidin、COX、5-PO和HSP等免疫炎症相关基因的表达水平,肝脏组织抗氧化系统中的SOD和CAT酶活性、GSH和GSSG及氧化应激标志LPO和MDA含量,以及肌肉中MYF5、MYOD1、MRF4和MYOG等生肌调节因子相关基因的表达水平.结果表明不同地方黄鳝种群暴露在亚硝酸盐环境中,PYH群体和DTH群体的免疫能力相对更高;PYH、CH和HZH群体炎症反应较轻;早期暴露中PYH群体和CH群体抗氧化能力较强;CH群体具有更好的肌肉生长分化能力.说明不同地理黄鳝群体在环境压力下生理功能存在差异,可为人工选育抗压性强的黄鳝品系提供技术支持.     

miR-96对牦牛颗粒细胞凋亡和增殖的影响

为研究牦牛卵巢组织内miR-96对颗粒细胞凋亡、增殖及激素分泌的影响,本试验通过采集成年牦牛卵巢内颗粒细胞,分离培养后将其分为4个处理组,分别转染miR-96模拟物(mimics)和抑制物(inhibitor)及两者的阴性对照(NC)后培养并检测颗粒细胞受到的影响。使用流式细胞术和CCK-8法对细胞凋亡和增殖情况进行检测,采用qPCR和Western Blot检测凋亡相关基因表达情况,ELISA检测转染后类固醇激素分泌情况。结果表明：miR-96-mimics使颗粒细胞凋亡发生抑制促进细胞增殖,并促使凋亡相关基因Bcl-2表达极显著升高,Bax表达极显著降低;ELISA检测类固醇激素水平变化显示,与mimics NC组相比miR-96-mimics组细胞培养液中孕酮(P4)分泌水平极显著降低,雌二醇(E₂)分泌水平极显著升高;与inhibitor NC组相比miR-96-inhibitor组孕酮(P4)分泌水平极显著升高,雌二醇(E₂)分泌水平显著降低。miR-96可促进颗粒细胞增殖并抑制凋亡,同时会对生殖激素分泌产生影响,从而参与调控牦牛卵...