大熊猫（Ailuropoda Melanoleuca）卵巢的年龄变化

对比观察了5只不同年龄大熊猫(包括青年、中年和老年)的卵巢皮质石蜡切片。可见皮质结构有较大的年龄变化。主要表现在:性成熟后,卵巢皮质的厚度随年龄的增长有减薄的趋势。成年的各级正常卵泡数量较少,初级和次级的更少;闭锁卵饱和间质腺较多,并呈现出随年龄增长而增多的动向。老年卵巢结构变化明显,皮质纤维化,卵泡全部消失,仅有较多囊泡,小动脉管壁增厚,管腔变小。老年卵巢的外形、体积和重量等方面与成年之间未见明显年龄变化。     

糖尿病心脏中血管损伤病理特征的研究

探讨糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)中各级血管的病理改变,对炎症、纤维化、凋亡等病理因素在其中的作用和特点进行深入的研究,以确定更为有效相关的血管损伤与保护病理评价指标。选用雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为正常对照(Control)组、DCM组。采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素构建DCM小鼠模型,模型建立成功12周后通过HE染色、Masson染色、免疫组织化学法、免疫荧光法、TUNEL染色法,EVG染色法等方法观察血管的结构病变、纤维化及胶原纤维collagen I,collagen III堆积情况、巨噬细胞和中性粒细胞炎性浸润程度,检测心脏组织中的细胞凋亡及血管壁弹力纤维环的破坏情况。DCM各级血管结构病变显著,血管壁增厚(P 0. 01),纤维化显著加重(P 0. 01),炎性细胞聚集浸润。胶原纤维中collagen I,collagen III均在血管壁明显增加,其中以collagen III更为显著;炎性细胞巨噬细胞特异性标记分子CD68、中性粒细胞特异性标记分子Ly6G显示两种炎性细胞均明显增多(P 0. 01),其中巨噬细胞增加更为明显且在血管壁大量浸润(P 0. 01); DCM血管弹力纤维环紊乱,不连续,DCM中细胞的凋亡显著增加(P 0. 01),但特异性发生于血管上的细胞凋亡并不明显。结论DCM中血管病变严重,是病变心脏组织中纤维化最明显、炎性细胞浸润为最严重的部位。血管壁结构紊乱,但与特异性发生于血管的细胞凋亡相关性不大,炎症反应和纤维化是其主要的损伤因素。其中,纤维化以collagen III增加最为显著,炎性细胞对血管的直接浸润以巨噬细胞为主。因此,胶原纤维collagen III和巨噬细胞浸润强度可作为DCM血管损伤与保护的有效评价指标。     

实验用成年与老年猕猴血液生理和生化指标的比较

目的比较实验用成年和老年猕猴血液生理和生化指标,为今后实验研究提供参考。方法随机选取健康成年猕猴20只、老年猕猴12只,雌雄各半,清醒状态下从后肢隐静脉抽取静脉血,行血常规和血生化检查,从股动脉抽血行血气分析检查。结果在血常规中,老年猕猴的平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)极显著高于成年猕猴(P0.01);血红蛋白(HCG)、血小板(PLT)、红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)等显著高于成年猕猴(P0.05);老年猕猴淋巴细胞计数(LYMPH~#)、嗜酸性粒细胞计数(EO~#)等极显著低于成年猕猴(P0.01);白细胞计数(WBC)显著低于成年猕猴(P0.05)。血生化中,老年猕猴的单胺氧化酶(MAO)、甘油三脂(TRIG)极显著高于成年猕猴(P0.01);丙氨酸转氨酶(ALT)、血糖(GLU)、乳酸脱氢酶(LDH)显著高于成年猕猴(P0.05);老年猕猴的超氧化物歧化酶(SOD)极显著低于成年猕猴(P0.01)。动脉血气中,老年猕猴的血乳酸(Lac)极显著高于成年猕猴(P0.01);老年猕猴的二氧化碳分压(PaCO_2)、碳酸氢根(HCO_3~+)、二氧化碳总量(TCO_2)、碱剩余(BE)等极显著低于成年猕猴(P0.01)。结论成年和老年猕猴某些血液学指标有显著性差异,进行生物医学研究时应予以充分考虑。     

水苏碱对肾纤维化大鼠肾组织CHOP、caspase-3作用

研究水苏碱对肾纤维化大鼠肾组织CHOP、caspase-3作用的研究.采用单侧输尿管梗阻(UUO)诱导大鼠肾间质纤维化动物模型,以依那普利为阳性对照药,将大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利组、水苏碱高、中、低剂量组.术后第14 d处死大鼠,收集血清测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);采用HE染色检测肾小管损伤指数,Masson染色对肾间质胶原相对面积进行半定量分析;采用免疫组织化学方法检测肾组织中内质网应激特异转录因子(CHOP)、细胞凋亡因子天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达.各治疗组与模型组比较大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质纤维化程度、血清Scr、BUN水平及肾组织CHOP、caspase-3蛋白表达有差异(P0.05;P0.01).水苏碱与依那普利组比较,大鼠肾组织CHOP、caspase-3表达降低(P0.05),肾小管间质损伤及肾间质纤维化程度明显降低(P0.05),肾功能Scr、Bun明显降低(P0.05).水苏碱可能通过下调内质网应激相关凋亡途径CHOP、caspase-3表达,干扰内质网应激特异转录因子的传导通路,抑制细胞凋亡的表达,从而减缓肾间质纤维化的发生和发展.     

3种邻苯二甲酸酯类塑化剂对大鼠的毒性研究

将邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DiBP)和邻苯二甲酸二异壬酯(DiNP)3种邻苯二甲酸酯类塑化剂分别按每只大鼠每天1/100LD50的剂量连续灌胃染毒20d,染毒后再继续观察20d。实验结束后测量各组大鼠器官与体重的比,结果发现DEP组大鼠的肝脏和3个实验组大鼠卵巢子宫的器体比与对照组有明显差异,其余脏器的器体比均未有明显差异。各实验组大鼠精子畸形率明显高于阴性对照组(P0.05),各实验组大鼠骨髓嗜多染红细胞微核率虽然高于对照组,但均差异不显著(P0.05)。各实验组组织病理切片结果显示,3个染毒组大鼠肝、肾、脾均有不同程度的损伤,其余脏器均未发现异常。     

热应激对 ICR 雌性小鼠超数排卵及卵泡发育的影响

摘要:目的 探讨短期热应激对小鼠超数排卵和卵泡发育的影响。 方法 取超数排卵处理后体质量近似的 7 ~ 8 周龄 ICR 雌性小鼠 20 只,随机分为对照组和热应激组,每组 10 只,饲养于屏障环境内。 热应激组小鼠放入 38 ℃ 的生化培养箱中,热应激处理 10 h,期间自由采食和饮水。 热应激结束后,将小鼠放回屏障设施内饲养,持续 6 d,6 d后,进行超数排卵处理并处死小鼠,获取小鼠输卵管内卵子以及卵巢。 结果 热应激组小鼠超排卵数高于对照组( P<0. 05) 。 对卵巢切片进行苏木素-伊红( HE)染色后,观察发现热应激组小鼠的总卵泡数和黄体数均明显高于对照组( P<0. 01) 。 热应激组小鼠的卵泡闭锁率高于对照组,但无明显差异( P> 0. 05) 。 结论 热应激严重影响小鼠的繁殖机能,尤其是卵泡的发育过程。     

卵巢切除小鼠冠状动脉封堵诱导心肌梗塞模型的建立与评估

摘要:目的 建立模拟绝经后妇女发生心肌梗塞( MI) 的小鼠模型。 方法 将雌性小鼠卵巢切除( OVX) 后进行左冠状动脉前降支封堵诱导心肌梗塞发生;通过超声、血流动力学、形态学分析、免疫组织化学和 TUNEL 染色评估小鼠心脏功能和心肌梗塞面积的变化及心肌纤维化的程度。 结果 卵巢切除联合心肌梗塞可加重心脏功能受损,显著增加心肌纤维化和心肌梗塞面积,可诱导细胞凋亡和 TGF-β1 表达,血清中促炎细胞因子 TNF-α 和 IL-10 水平显著增加。 结论 成功建立模拟绝经后女性发生 MI 的小鼠模型,并对其功能和组织学特征进行评估。     

内质网应激相关蛋白在肾纤维化大鼠肾组织中的表达

探究内质网应激(ERS)相关蛋白在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化中表达的调节。将大鼠随机分为假手术组及UUO模型组,UUO组行左侧输尿管结扎术,于术后3、7和14d Masson染色观察肾脏病理变化;眼底静脉丛取血,分离血清测定血尿素氮及肌酐;Masson染色对肾间质胶原相对面积进行半定量分析;免疫组化法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA);Western blot检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、内质网源性转录因子(CHOP)、凋亡相关蛋白半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)及caspase-12蛋白表达。模型组与对照组比较大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质纤维化程度、血清Scr、BUN水平及肾组织CHOP、caspase-3蛋白表达有差异(P0.05;P0.01)。与假手术组相比,UUO模型组可见:1)肾小管扩张和肾间质纤维化程度随输尿管梗阻时间延长而渐进性加重;2)GRP78、CHOP、caspase-3及caspase-12蛋白表达在术后3d均有上调,随着梗阻时间延长,上述蛋白表达更显著(P0.01)。内质网应激相关标志性蛋白在UUO大鼠肾间质纤维化的早期即存在表达上调,可能促进了肾间质纤维化不断进展。有望通过干扰内质网应激特异转录因子的传导通路,抑制细胞凋亡的表达,从而可减缓肾间质纤维化的发生和发展。     

自发性糖尿病小鼠C57BL/KsJ-db/db某些脏器组织病理学观察

目的观察自发性糖尿病C57BL/KsJ-db/db小鼠胰腺、肾脏、睾丸和卵巢的常规病理变化。方法取血糖高于10.1 mmol/L的2、7、12月龄db/db纯合仔小鼠,摘眼球放血后取胰腺、肾、睾丸、卵巢放入10%福尔马林溶液中,HE染色,常规病理切片。结果 7、12月龄胰腺见淋巴细胞浸润,部分胰岛体积较大,小导管样病变有增生扩张及潴溜;小鼠肾脏见部分肾小球细胞数增多,系膜细胞增生,系膜基质增多;卵巢较小,卵泡较少,未见黄体;睾丸生精功能弱。结论 C57BL/KsJ-db/db小鼠的自发性糖尿病会在一定程度上出现胰腺、肾脏、睾丸和卵巢等脏器发生病理改变。     

STAT3在新生大鼠高氧肺损伤肺组织中的表达及意义

目的:了解信号转导和转录活化因子3(STAT3)在新生大鼠未成熟肺高氧损伤过程中的表达规律及其与早产儿慢性肺疾病的内在联系.方法:取22 d胎龄足月新生SD大鼠,随机分为实验组(高氧组)与对照组(空气组),每组各8只大鼠,实验组生后立即置入体积分数＞95%持续氧环境中饲养;对照组则在空气中饲养.两组新生大鼠于生后第3、7、14天随机抽取后处死并取其肺组织,HE染色观察肺组织病理变化,Masson三色染色判断肺组织纤维化程度,免疫组化测蛋白含量,逆转录和聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织STAT3 mRNA的表达.结果:空气组生后第3、7、14天各亚组未见肺损伤的病理性改变,也没有胶原沉积增多现象;高氧组生后3 d肺泡内炎症反应及胶原纤维的沉积均不明显;第7天时可见大量炎细胞浸润,胶原沉积开始增多;第14天时炎细胞浸润减少,纤维化程度更加显著.第3、7、14天高氧组STAT3在肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、肺血管内皮细胞及炎症细胞等的表达明显增强,与同时期的空气组相比均显著增高,在高氧组中,以第7天时表达最强.第7、14天高氧组中肺组织的STAT3 mRNA的相对表达量明显高于对照组,其中以第7天高氧组的相对表达量最高,而两组的第3天亚组并未见明显差别.结论:高氧可造成新生鼠肺组织明显的病理损伤,早期为炎性反应阶段,后期纤维化程度逐渐增强.高氧暴露早期STAT3在肺组织中的表达随着暴露时间的延长而增加,提示STAT3主要在早期的急性炎症阶段起作用,在后期纤维化阶段呈逐渐降低趋势,未证实其与高氧肺损伤后期的纤维化有相关性.     

过表达 miRNA-320 对顺铂诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响

摘要:目的 探讨过表达 miRNA-320 对顺铂诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响。 方法 选择清洁级 SD 雌性大鼠32 只,随机分为 4 组:正常对照组、模型组、阴性对照组和 miRNA-320 过表达组,每组 8 只。 在实验过程中,每天观察各组大鼠饮食、活动和体毛等外在表现的差异。 采用 ELISA 检测各组大鼠血清中 E2、FSH、LH 的含量;采用 HE染色,光镜下观察各组大鼠卵巢组织形态学变化;采用 PCR 检测各组大鼠卵巢组织 miRNA-320、PGRMC1、BMP15的表达水平;采用 Western blot 检测各组大鼠卵巢组织中 PGRMC1、BMP15 的蛋白表达水平。 结果 与正常对照组相比,模型组大鼠活动迟缓、无精神、反应迟钝、食欲下降、体质量下降以及体毛暗淡无光泽;组织形态学分析表明,卵巢组织明显萎缩、皮质变薄、闭锁卵泡数目多以及间质纤维组织增多;血清 FSH、LH 显著升高,而血清 E2 及卵巢组织中 PGRMC1、BMP15 的蛋白和 mRNA 表达水平均降低,差异具有统计学意义( P< 0. 05) 。 与阴性对照组相比,miRNA-320 过表达组大鼠活动量增加、反应较为敏捷、进食增多、体毛逐渐有光泽;间质纤维化明显减轻、成熟卵泡数量明显增加、黄体数增多;血清 E2 的含量、卵巢组织中 PGRMC1、BMP15 的蛋白和 mRNA 的表达水平均升高,而FSH、LH 的含量降低( P<0. 05) 。 结论 顺铂可诱导卵巢早衰大鼠卵巢功能障碍,过表达 miRNA-320 可改善顺铂诱导的卵巢早衰大鼠的卵巢功能。     

一例老年恒河猴消化系统疾病诊断

摘要:本实验室人工饲养的一只老年恒河猴出现以腹泻、排脓样便、消瘦为主要体症的急性疾病。为研究老年恒河 猴消化器官病变的发生情况并进行诊断,本实验采用临床体征结合常规HE 染色对其消化系统进行组织学观察,结 果发现恒河猴的消化系统组织存在不同程度的病变,包括各种炎性细胞浸润,杯状细胞减少及黏液分泌减少,消化 道黏膜的变性、坏死,消化腺的萎缩等,诊断该老龄猴为生理性衰老。     

中国恒河猴MHC Ⅰ型部分等位基因的分析

目的对中国恒河猴主要组织相容性复合体（MHC）I型部分基因进行携带情况调查与分析。方法采用序列特异性引物（PCR-SSP）分型方法对华南灵长类动物研究中心繁殖的30只谱系清晰的中国恒河猴（Macacamulatta）的32个MHC I型分子位点进行检测。结果采用的32对引物中,中国恒河猴可检出携带23个MHC I等位基因,但基因携带频率存在很大的差异,由3.57%至82.14%不等。结合遗传谱系分析,判断A1＊21和A2＊05之间以及B＊04和B＊30之间可能就是连锁的。结论中国恒河猴携带能控制病毒复制的MHC I型基因位点的频率较高,其基因携带频率与已发表的印度恒河猴携带频率存在明显差异。本研究为促进中国恒河猴在AIDS研究中的应用,以及为建立携带特定MHC I基因实验猴小种群提供了依据。     

Live birth after ovarian tissue transplant

Radiation and high-dose chemotherapy may render women with cancer prematurely sterile, a side-effect that would be avoided if ovarian tissue that had been removed before treatment could be made to function afterwards. Live offspring have been produced from transplanted ovarian tissue in mice and sheep but not in monkeys or humans, although sex steroid hormones are still secreted. Here we describe the successful transplantation of fresh ovarian tissue to a different site in a monkey, which has led to the birth of a healthy female after oocyte production, fertilization and transfer to a surrogate mother. The ectopically grafted tissue functions without surgical connection to major blood vessels and sets the stage for the transplantation of cryopreserved ovarian tissue in humans.     

Effect of recombinant soluble CD4 in rhesus monkeys infected with simian immunodeficiency virus of macaques

The CD4 molecule is a high-affinity cell-surface receptor for the human immunodeficiency virus (HIV-1) and a soluble truncated form of CD4 produced by recombinant DNA technology is a potent inhibitor of HIV-1 replication and HIV-1-induced cell fusion in vitro. Rhesus monkeys infected with the simian immunodeficiency virus of macaques (SIVMAC), a virus closely related to HIV-1, develop an AIDS-like syndrome, and so provide an important model for the evaluation of potential AIDS therapies. We have assessed the therapeutic effect of recombinant soluble CD4 in SIVMAC-infected rhesus monkeys. Virus was readily isolated from peripheral blood lymphocytes and bone marrow cells of these animals before starting treatment with soluble CD4, but became difficult to isolate soon after treatment had begun. Moreover the diminished growth of both granulocyte-macrophage and erythrocyte progenitor colonies from the bone marrow of these monkeys rose to normal levels during treatment. These findings indicate that soluble CD4 could prove valuable in the treatment of AIDS.     

健康恒河猴心电图研究

目的研究健康恒河猴在清醒状态下的心电图特点。方法选择60只2-3岁健康恒河猴,体重2-3．5kg; 雌雄各30只;在环境安静、动物清醒状态下,测定I、Ⅱ、Ⅲ、aVR、aVL、aVF六个导联的心电图变化,并计算平均心 率,平均心电轴,P波、QRs波群和T波的振幅,PR间期、QT问期等指标。结果60只恒河猴均为窭性心律,并发 现在肢体Ⅱ导联中,P波均为向上直立波,Ⅱ、Ⅲ、aVF导联中大部分恒河猴没有s波,aVR导联中大部分恒河猴没 有Q波。雌性恒河猴R波电压平均值明显高于雄性恒河猴平均值(P<0．005)。恒河猴P波较尖,QRs波群多样 化,QT问期的K值范围是0．298 4-0．030,ST段位于等电位线,T波以圆滑为主,Ⅱ导联中绝大部分为直立。结论 此研究建立了恒河猴心电图相关基础数据,为相关的研究提供了参考。     

中国恒河猴MHC I型部分等位基因的分析

摘要：目的对中国恒河猴主要组织相容性复合体(MHC)l型部分基因进行携带情况调查与分析。方法采用序 列特异性引物(PCR—SSP)分型方法对华南灵长类动物研究中心繁殖的30只谱系清晰的中国恒河猴(Macaca mulatta)的32个MHC I型分子位点进行检测。结果采用的32对引物中,中国恒河猴可检出携带23个MHC—I等 位基因,但基因携带频率存在很大的差异,由3．57％至82．14％不等。结合遗传谱系分析,判断A1·21和b．2睾05 之间以及B·04和B·30之间可能就是连锁的。结论中国恒河猴携带能控制病毒复制的MHC I型基因位点的 频率较高,其基因携带频率与已发表的印度恒河猴携带频率存在明显差异。本研究为促进中国恒河猴在AIDS研 究中的应用,以及为建立携带特定MHC I基因实验猴小种群提供了依据。     

ELISA方法检测恒河猴血清中抵抗素

目的用ELISA检测试剂盒,探索一种恒河猴血清抵抗素（Resistin）定量的快速检测方法,初步建立各年龄段恒河猴血清抵抗素的正常参考值。方法选择用于人抵抗素检测的ELISA定量检测试剂盒,对恒河猴血清进行抵抗素的测定;按年龄段将实验猴分组,幼年组、成年组和老年组,每组10只,制备血清,检测抵抗素,并进行统计分析,初步建立各年龄段恒河猴血清抵抗素的正常参考值。结果用ELISA定量检测试剂盒测定恒河猴血清抵抗素数值稳定,幼年组、成年组和老年组的血清抵抗素正常参考值分别为（6 510±1 730）pg/mL、（5 880±1 250）pg/mL和（1 760±920）pg/mL,有随年龄增长而逐步降低的趋势,老年组极显著低于幼年组和成年组（P〈0.01）。结论人抵抗素ELISA检测试剂盒可以作为一种对恒河猴血清抵抗素定量的临时快速的检测方法,且随着年龄的增长其血清抵抗素正常参考值有逐步降低趋势。     

Impact of caloric restriction on health and survival in rhesus monkeys from the NIA study

Calorie restriction (CR), a reduction of 10–40% in intake of a nutritious diet, is often reported as the most robust non-genetic mechanism to extend lifespan and healthspan. CR is frequently used as a tool to understand mechanisms behind ageing and age-associated diseases. In addition to and independently of increasing lifespan, CR has been reported to delay or prevent the occurrence of many chronic diseases in a variety of animals. Beneficial effects of CR on outcomes such as immune function, motor coordination and resistance to sarcopenia in rhesus monkeys have recently been reported. We report here that a CR regimen implemented in young and older age rhesus monkeys at the National Institute on Aging (NIA) has not improved survival outcomes. Our findings contrast with an ongoing study at the Wisconsin National Primate Research Center (WNPRC), which reported improved survival associated with 30% CR initiated in adult rhesus monkeys (7–14?years) and a preliminary report with a small number of CR monkeys. Over the years, both NIA and WNPRC have extensively documented beneficial health effects of CR in these two apparently parallel studies. The implications of the WNPRC findings were important as they extended CR findings beyond the laboratory rodent and to a long-lived primate. Our study suggests a separation between health effects, morbidity and mortality, and similar to what has been shown in rodents, study design, husbandry and diet composition may strongly affect the life-prolonging effect of CR in a long-lived nonhuman primate.