共振光散射光谱法测定微量蛋白质

利用光吸收和共振光散射(RLS)光谱研究了铝试剂(ATA)与蛋白质在水溶液中的相互作用.在pH2.50时,蛋白质可使弱的ATA光散射信号曾强.基于这种现象,我们运用RLS技术,建立了测定纳克级蛋白质的方法.该方法简单、实用、灵敏.BSA的线性范围为0.010~27.4μg/mL,HSA的线性范围为0.010~30.5μg/mL.BSA的检测限为10.7 ng/mL,HSA的检测限为10.2 ng/mL.对实际人血清样品中的蛋白质进行了测定,其结果与临床方法一致.氨基酸、金属离子或其它共存化合物的干扰很小.     

三溴偶氮胂共振光散射法定量测定蛋白质

首次研究了三溴偶氮胂和蛋白质作用的共振光散射光谱．实验发现，在pH3．5～4．7的范围内，蛋白质的加入导致三溴偶氮胂共振光散射增强，并在345和410nm处产生两个增强峰，其强度与蛋白质的浓度成线性关系，据此建立了一种定量测定蛋白质的共振光散射新方法．采用五水平正交设计对反应参数进行选择．方法的线性范围为2．5～30．0μg／mL(BSA)和2．5～40．0μg／mL(HSA)，对应的检测限分别为46．5和43．8ng／mL．该方法已用于实际样品中蛋白质含量的测定，结果令人满意．     

萘铬绿与蛋白质作用的共振光散射光谱研究

在pH3 50的酸性介质中,萘铬绿与蛋白质发生静电作用产生以342 0nm为特征峰的共振光散射(RLS)增强光谱.在此波长下,蛋白质的浓度与增强共振光散射强度(ΔIRLS)呈线性关系,据此建立了痕量蛋白质的共振光散射分析法,对BSA和HSA的检测限分别为3 62ng/mL和3 33ng/mL.方法成功地应用于尿样中总蛋白质分析.     

酸性铬深蓝共振光散射光谱法测定蛋白质的研究

基于人血清白蛋白 (HSA)对酸性铬深蓝共振光散射的增强效应 ,拟定了一种新的测定HSA的共振光散射法 .在pH =3.78的B R缓冲溶液中 ,酸性铬深蓝与蛋白质结合 ,产生强烈的共振光散射 ,在λ =36 5nm处 ,共振光散射强度较大 ,且共振光散射强度与蛋白质的浓度成线性关系 ,线性范围为 0 .0～ 12 .0 μg mL ,检测限可达 0 .13μg mL .该法简便、快速 ,用于人体血清样品蛋白质的测定 ,结果令人满意 .     

变色酸2R共振光散射光谱法测定蛋白质

基于人血清白蛋白（HAS）对酸性偶氮染料变色酸2R的共振光散射的增强效应，拟定了一种新的测定HSA的共振光散射法。在pH=4.10的条件下，变色酸2R本身只有极弱的光散射，但它与蛋白质的结合物却有强烈的共振光散射作用，在λex=λcm=420nm处，光散射有最大的散射强度，并且光散射强度与蛋白质HSA的浓度成线性关系，线性范围为0．0－10．0μg/mL，检测限可达0．12μg/ml。该法简便、快速，用于人体血清样品蛋白质的测定并与考马斯亮蓝法比较，结果令人满意。     

锌试剂-蛋白质体系的共振光散射光谱研究

 在pH 3.0的B-R缓冲溶液中,锌试剂能与蛋白质结合形成复合物.此结合反应能显著加强锌试剂的瑞利光散射信号.详细研究了此结合反应的最佳反应条件,并以此反应为基础,利用共振瑞利散射光技术,建立了一个测定蛋白质的新方法.该方法对牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)以及免疫球蛋白测定的线性范围分别为0.25~12.5,0.10~15.0μg/mL和0.10~12.5μg/mL,检出限均小于0.05μg/mL,且大量的常见金属离子、氨基酸等共存物质不干扰测定.方法具有很高的灵敏度、很好的选择性及重现性.用于血清样品中蛋白质的测定,结果满意.     

间甲酚紫-DNA体系共振光散射法测定DNA

建立了溴代十六烷基吡啶（CPB）存在下，用间甲酚紫（CP）为探针测定核酸的新方法，在HMTA－HCl缓冲溶液（pH=4.5）中，DNA的加入使CP－CPB体系的共振光散射（RLS）增强，此RLS信号与DNA浓度成正比,fsDNA和ctDNA的线性范围分别为0．1－20μg/mL和0．1－50μg/mL，检出限分别为10ng/mL和26ng/mL。     

邻苯二酚紫共振散射法测定蛋白质含量

基于人血清白蛋白(HSA)对邻苯二酚紫的共振散射的增强效应,拟定了一种新的测定HSA的共振散射法．在pH=4．20的条件下,邻苯二酚紫只有极弱的光散射,但它与蛋白质的结合物却有强烈的共振散射作用,在λ562nm处,光散射有最大的散射强度,并且光散射强度与蛋白质HSA的浓度成线性关系,线性范围为0．0～10．0mg／L,该法简便,快速,用于人血清样品蛋白质的测定,并与用CPA-pA-Ba法测定的结果相比较,结果令人满意．     

达旦黄-OP体系共振瑞利散射法测定蛋白质

研究了达旦黄与蛋白质的结合反应．在乳化剂OP存在下及pH1．6的酸性介质中，蛋白质与达旦黄形成复合物，使最大波长460nm的共振光散射光谱得到加强，根据其共振光散射的增强程度，可用于蛋白质的定量测定．乳化剂OP的加入，使灵敏度提高1．7倍．牛血清白蛋白、人血清白蛋白、卵白蛋白、γ-球蛋白的线性范围分别为0．03～1．0、0．04～1．1、0．05～1．4、0．05～1．3mg／L，检测限分别为13．1、13．9、17．1、16．2μg／L．用于人血清、牛奶、豆浆、尿液中蛋白质的测定，结果与经典的考马斯亮蓝法一致．     

5-Br-PADAP共振光散射法测定水中镉

建立了一种快速、准确测定水中镉含量的共振光散射(RLS)方法。在pH=9.0的氨-氯化铵缓冲介质及表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)存在下,镉(II)与2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚(5-Br-PADAP)可形成复合物,导致体系共振光散射强度显著增加,据此建立了利用共振光散射技术测定镉含量的分析方法。在优化条件下,依次加入0.40 mL的pH=9.0的NH_3-NH_4Cl缓冲溶液,0.10 mL的1.0 mmol/L 5-Br-PADAP溶液,适量镉(II)标准使用液,以及0.40 mL的1.0 mmol/L SDS水溶液,并定容至10.0 mL,于室温下反应10 min,在最大散射峰604 nm处测定共振光的散射信号。结果表明,共振光散射强度与镉(II)质量浓度在5.3～200.0μg/L范围内呈线性关系,检出限(3S_d/K)为0.1μg/L。     

四磺基铜酞菁共振光散射法测定人血清白蛋白

研究了四磺基铜酞菁与人血清白蛋白作用的共振光散射光谱，pH=1.0～3.0的范围内，人血清白蛋白的加入导致四磺基铜酞菁共振散射的增强，在407nm处存在一共振光散射强峰，其强度增加值与人血清白蛋白的浓度呈线性关系，据此建立了一种用共振光散射光谱测定人血清白蛋白的方法，该方法的线性范围为0～17mg/L，检出限为0.050mg/L(n=6，RSD为1.8%）。     

TiO_2纳米粒子共振光散射法测定血清白蛋白

以六偏磷酸钠(SHMP)为修饰剂,制备TiO2纳米粒子.研究TiO2纳米粒子与人血清白蛋白(HSA)的相互作用,建立共振光散射法测定微量白蛋白的新方法.在最佳实验条件下,该方法的线性范围是0.2～65.0 mg/L,检出限为0.168 mg/L.此方法用于人血清样品中白蛋白的测定,回收率为99.3%～100.6%.     

富勒醇/镱(Ⅲ)体系共振光散射法测定核酸

基于核酸对富勒醇/镱Ⅲ体系共振光散射强度的增强作用,建立了一种新的测定核酸的分析方法.富勒醇的水溶液表现出弱的共振光散射性质,但是当三价镱离子存在时,它的共振光散射强度显著增强,形成了一种稳定的富勒醇/镱Ⅲ共振光散射体系.鱼精DNA的加入使得该体系的共振光散射强度进一步增强.在优化条件下,0 -20.0μg/mL浓度范围内,共振光散射强度的增强值与鱼精DNA的浓度呈线性关系,检出限可达13.3 ng/mL.该法用于合成样品的分析,结果令人满意.     

染料分子与牛血清蛋白相互作用的研究

应用定量结构-性质关系技术,通过对染料分子与牛血清蛋白的增强共振散射光谱的分析,研究了它们之间的相互作用.经过遗传算法对染料分子结构描述符的筛选,针对最大散射波长及其强度,分别采用了3个及6个染料分子结构描述符建立了两个定量结构-性质关系模型,进而推测染料分子与牛血清蛋白主要为分子间非化学键作用,染料分子被吸附于牛血清蛋白的表面.     

偶氮胭脂红G分光光度法测定蛋白质的研究

 偶氮胭脂红G在酸性介质中与蛋白质迅速结合,生成一紫红色复合物,该复合物在570nm处有最大吸收,且其吸光强度与牛血清蛋白(BSA)、人血清蛋白(HSA)、免疫球蛋白(IgG)的质量浓度至少在15.0μg/mL范围内有线性关系.依此建立的测定蛋白质的光度分析新方法不受蛋白酶和大部分其它共存物质的影响,具有较好的选择性和较宽的线性范围,同时方法快速、稳定,用于人血清样品中总蛋白含量的测定,所得结果与测定蛋白质的经典方法考马斯亮蓝G-250法基本一致.     

Interaction of APT with BSA or HSA

1 Introduction In the past few years, a series of saturated, unsatu- rated fatty hydrocarbon and aryl substituted thiourea compounds have been synthesized and successfully used in analytical chemistry[1―4]. N-n-amyl-N'-(sodium p-aminobenzenesulfonate) thiourea (APT) is one of these newly synthesized reagents. As a kind of drug, thiourea compounds exhibit various biological activi- ties such as antiviral and antifungal[5]. They can be used as insecticides, herbicides and plant-growth regula-…     

基于功能性CuS纳米粒子共振光散射法测定蛋白质

基于蛋白质的加入使功能性CuS纳米粒子的共振光散射明显增强,建立了定量测定蛋白质的新方法.最佳实验条件下,对人血清球蛋白的线性范围为0.1-7.0 μg ml-1,检出限为13 ng ml-1,对人血清白蛋白的线性范围为0.25-11.0 μg ml-1,检出限为26 ng ml-1.该方法成功用于人血清样品的测定,方法简单、灵敏、稳定、选择性好.     

吡啰红Y共振光散射法测定纳克级核酸

研究了二苯并吡喃类染料吡口罗红Y(PY)与核酸作用的共振光散射光谱,在pH11.5～12.0Tris-NaOH缓冲溶液中,1.75×10-5mol/L的PY溶液加入核酸后,体系的共振光散射增强,在364.0nm处,存在一共振光散射增强峰,其增强强度(△IRLS=I-I0)与核酸浓度呈线性关系,据此建立了一种测定纳克级核酸的简便灵敏的方法.对于fsDNA,方法的线性范围为27.0～625ng/mL,检出限为8.1ng/mL;对于ctD NA,方法的线性范围为39.0～500ng/mL,检出限为11.7ng/mL;对于yRNA,方法的线性范围为59.0～375ng/mL,检出限为17.7ng/mL.建立的方法已用于六种合成样品的测定,结果令人满意.