石杉碱甲对急性炎症小鼠室旁核和脑干c-Fos和GFAP表达的影响

目的:探讨石杉碱甲对急性炎症小鼠下丘脑室旁核和脑干神经元c-Fos和星形胶质细胞(astrocytes,AST)胶质原纤维酸性蛋白(glial fiberillany acidic protein,GFAP)表达的影响.方法:①采用蛋清致小鼠足趾肿胀模型,检测致炎后30min,1h,2h的小鼠足容积并计算肿胀度;②免疫组化技术检测孤束核、迷走背核及室旁核神经元c-Fos及星形胶质细胞GFAP的表达.结果:①与生理盐水组比较,不同浓度的石杉碱甲均可明显抑制蛋清致小鼠足肿胀(P<0.05或P<0.01).②与对照组相比,致炎组小鼠孤束核和室旁核内Fos免疫阳性神经元(Fos-immunoreactive neurons,Fos-IR)及GFAP免疫阳性星形胶质细胞(GFAP-immunoreactive astrocytes,GFAP-IR)数目均明显增多(P<0.01),而迷走背核增加不显著(P>0.05).与致炎组相比,石杉碱甲给药组孤束核、迷走背核及室旁核内Fos-IR神经元及GFAP-IR星形胶质细胞数目均明显增多(P<0.01).结论:石杉碱甲对蛋清致小鼠足肿胀有明显的抗炎作用;石杉碱甲能够显著增强急性炎症小鼠孤束核、迷走背核及室旁核内神经元和星形胶质细胞的活动.     

2种应激诱导大鼠迷走复合体神经元的Fos表达

将大鼠随机分为束缚浸水应激组、束缚应激组和对照组,经1 h应激处理后,采用免疫组化法标记迷走复合体中神经元的Fos基因表达,在亚区和亚核水平上进行组间比较,研究2种应激对大鼠迷走复合体神经元Fos表达的影响。结果表明:束缚浸水应激组迷走背核的吻、中和尾3段Fos阳性神经数量均显著增加(P0.01或0.05),而束缚应激组仅尾段Fos表达显著增加(P0.01);在孤束核的吻、中和尾3段,2种应激引起不同孤束亚核的神经元Fos表达的增加(P0.01);不同应激处理后迷走复合体的不同亚区或亚核神经元的活动会增强,可能与不同应激性胃肠机能障碍的表现密切相关。     

小鼠嗅鞘细胞的分离、纯化和免疫细胞化学特性

目的:对小鼠嗅鞘细胞的体外分离、纯化和免疫细胞化学特性进行研究.方法:分离新生小鼠嗅鞘细胞,综合运用差速贴壁法、阿糖胞苷抑制和丝裂原刺激等方法对其进行纯化,并用免疫细胞化学方法对其进行检测.结果:体外培养的新生小鼠嗅鞘细胞主要为双极或三极细胞.纯化培养后其纯度可以达到88.7%以上,污染细胞中有星形胶质细胞、神经元、少突胶质细胞和成纤维细胞.免疫组化结果提示,嗅鞘细胞呈P75和CNP免疫阳性,GFAP和Nestin阴性.结论:本研究对新生小鼠嗅鞘细胞的形态学和免疫细胞化学特性提供了部分数据.但不同的取材时间,不同的培养条件对嗅鞘细胞的影响尚需进一步研究.     

爵床提取物抗炎镇痛作用的实验研究

目的探讨爵床提取物的抗炎镇痛作用。方法采用致炎剂二甲苯引起小鼠耳肿胀、新鲜蛋清引起大鼠足跖肿胀2种急性炎症模型以及棉球引起大鼠肉芽肿慢性炎症模型,研究爵床提取物灌胃给药对急慢性炎症的作用。采用热板法、醋酸扭体法和甲醛法致痛,研究爵床提取物灌胃给药的镇痛作用。结果与纯化水对照组相比,爵床醇提取物和水提取物高、低剂量组对致炎剂二甲苯所引起的小鼠耳廓肿胀抑制显著(P 0. 01,P 0. 05),对蛋清所引起的大鼠足跖肿胀抑制显著(P 0. 01),对大鼠棉球肉芽肿抑制显著(P 0. 01)。爵床醇提取物和水提取物高、低剂量组给药后对热板所引起的小鼠痛阈值明显提高,与纯化水对照组和自身给药前比较差异明显(P 0. 01,P 0. 05);爵床醇提取物和水提取物高、低剂量组对致痛剂醋酸所引起的小鼠扭体反应次数明显减少,也明显抑制甲醛所引起的早期(0～5 min)和晚期(15～30 min)小鼠足痛反应,与纯化水对照组比较差异显著(P 0. 01)。爵床醇提取物的抗炎镇痛作用比水提取物强(P 0. 01,P 0. 05)。结论爵床提取物灌胃给药具有一定抗炎、镇痛作用,且醇提取物强于水提取物。     

辣椒素对束缚-浸水应激大鼠DMV和NTS神经元c-fos蛋白表达和胃溃疡的影响

目的观察辣椒索对束缚-浸水应激大鼠脑于迷走运动背核(DMV)和孤束核(NTS)c-fos蛋白表达和胃溃疡的影响,并探讨c-fos蛋白在DMV和NTS表达与胃溃疡的关系.方法大鼠皮下注射辣椒素,束缚-浸水应激,免疫组织化学技术检测原癌基因c-fos在脑干的DMV和NTS的蛋白表达,计算胃溃疡的指数.结果与盐水对照组相比,注射辣椒索组DMV和NTS中c-fos阳性细胞数显著减少(P<0.01),胃溃疡指数明显降低(P<0.05).结论辣椒素抑制束缚-浸水应激大鼠DMV和NTS神经元c-fos蛋白表达和胃溃疡的,DMV,NTS及辣椒素敏感传入神经可能参与应激性胃溃疡的形成.     

大叶胡枝子根皮提取物抗炎镇痛作用研究

目的探讨大叶胡枝子根皮提取物灌胃给药的抗炎镇痛作用。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀、蛋清致大鼠足跖肿胀2种急性炎症模型以及大鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型,研究大叶胡枝子根皮提取物灌胃给药对急慢性炎症的作用。采用热板法和醋酸扭体法致痛,研究大叶胡枝子根皮提取物灌胃给药的镇痛作用。结果与模型组相比,大叶胡枝子根皮水提物和醇提物高、中、低剂量组显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀(P 0.01),明显抑制蛋清所致大鼠足跖肿胀(P 0.01),明显抑制大鼠棉球肉芽肿(P 0.01)。大叶胡枝子根皮水提物和醇提物高、中、低剂量组给药后明显提高热板所致小鼠的痛阈值,与模型组和自身给药前比较差异显著(P 0.05、0.01);大叶胡枝子根皮水提物和醇提物高、中、低剂量组明显减少醋酸所致小鼠扭体反应次数,与模型组比较差异显著(P 0.05、0.01)。大叶胡枝子根皮水提物的抗炎镇痛作用强于醇提物(P 0.05、0.01)。结论大叶胡枝子根皮提取物灌胃给药具有一定抗炎、镇痛作用,且其水提物强于醇提物。     

爵床煎剂对小鼠镇痛抗炎作用初探

目的探讨爵床的镇痛、抗炎作用。方法采用热板法、扭体法致痛,观察高、中、低剂量爵床水煎剂的镇痛作用;采用耳肿法、足肿法致炎,观察高、中、低剂量爵床水煎剂的抗炎作用。结果爵床水煎剂高、中、低剂量对热板法所致小鼠痛阈值有明显的提高,与生理盐水对照组比较差异极显著(P0.01);爵床水煎剂高、中剂量给药后与自身给药前比较,差异显著(P0.01),爵床水煎剂低剂量给药后15、30、60 min与给药前比较差异显著(P0.01);爵床水煎剂高、中、低剂量对醋酸所致扭体反应数均有明显抑制作用,与生理盐水对照组比较差异显著(P0.01)。爵床水煎剂高、中、低剂量对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀均有明显抑制作用,与生理盐水对照组比较差异显著(P0.01,P0.05);爵床水煎剂高、中、低剂量对蛋清所致小鼠足跖肿胀均有明显抑制作用,与生理盐水对照组比较差异极显著(P0.01)。结论爵床水煎剂具有一定镇痛、抗炎作用。     

山丹黄参多糖对四氯化碳损伤小鼠肝形态结构和TNF-α表达的影响

研究山丹黄参多糖对四氯化碳(CCl4)致小鼠肝损伤的影响.对40只小鼠先灌胃山丹黄参多糖(12.5,25,37.5g·L-1)和等量的生理盐水,然后腹腔注射0.2%的CCl4橄榄油溶液,称量小鼠体重、肝重变化,解剖观察小鼠肝脏的形态变化,显微镜观察肝组织结构的变化,免疫组织化学法检测TNF-α在肝组织表达的变化.研究显示,CCl4组小鼠体重明显减轻(P0.01),肝重明显增大(P0.01),肝脏明显肿胀,肝表面粗糙,有大量脂滴附着,肝脏周围亦有脂状物堆积;肝组织结构不清,细胞炎性坏死,TNF-α蛋白阳性表达明显增强(P0.01);山丹黄参多糖各组与CCl4组相比体重显著或极显著增加(P0.05或P0.01),肝重明显减小(P0.05),肝脏肿胀明显减轻,肝形态正常,肝脏表面脂滴减少,肝组织结构清晰,TNF-α蛋白阳性表达明显减少(P0.01).结果表明,四氯化碳对肝组织有明显的损伤效应,山丹黄参多糖具有减少脂质沉着、抑制肝脏肿胀、促进肝脏机能稳定、抑制细胞过度凋亡等作用,能有效减轻四氯化碳对肝组织的损伤.     

肝X受体α在小胶质细胞激活致神经元损伤中的作用研究

[目的]研究肝X受体alpha(LXRα)在小胶质细胞激活致神经元损伤中的作用.[方法]小鼠小胶质细胞株(BV2细胞)置于6孔培养板培养,分为对照组、Aβ组、干扰组、干扰+Aβ组、假干扰+Aβ组.应用倒置显微镜观察各组BV2细胞的形态学变化,Western blot方法检测LXRα蛋白表达变化,ELISA检测各组上清液中COX-2、iNOS的表达水平.收取BV2细胞上清液作为条件培养基用来培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞),并通过CCK-8和免疫荧光法检测SH-SY5Y细胞的存活率和凋亡蛋白Bax表达情况.[结果]与对照组相比,Aβ组及干扰组的BV2细胞表现为胞体变圆变大,细胞突起减少,呈阿米巴样活化状态,LXRα蛋白水平明显下调(P0.05),细胞上清液COX-2,iNOS的表达含量明显升高(P0.05),Aβ处理组和干扰组的细胞上清液明显引起SH-SY5Y细胞存活率降低、凋亡蛋白Bax表达增加(P0.05).与假干扰+Aβ组相比,干扰+Aβ组的细胞胞体变大,突起减少,LXRα蛋白表达减少,COX-2,iNOS的表达增加,干扰+Aβ组的细胞上清液导致SH-SY5Y细胞存活率降低,Bax表达增加(P0.05).[结论] LXRα参与调控Aβ诱导的小胶质细胞激活及炎症因子的释放,在AD的炎症机制中发挥重要作用.     

胆碱能神经元和P物质样、脑啡肽样纤维在人胎脊髓中间带的发育与定位

收集死亡人胚胎40例,妊娠龄5—40周。取脊髓胸段,恒冷箱切片,厚25—35μm,分别以Kamovsky—Roots法和PAP法显示脊髓中间灰质带含乙酰胆碱酯酶(AchE)的胆碱能神经元和P物质样(SP—L)、脑啡肽样(ENK—L)纤维的定位分布。结果发现AchE阳性神经元,最早见于第5周中间带外侧核本部(ILP)。6～8周,阳性神经元则明显见于侧索核(ILF)、中介核(IC)和中介核室管旁部(ICPE)等各核群。AchE阳性神经元的活性反应强度随胎龄增长而增强。SP—L和ENK—L阳性纤维最早见于第8周中间带的外侧份,位于套层与缘层之间,相当于ILP的原基部。9～13周,阳性纤维亦向内延伸。至14周,阳性纤维在ILP、ILF和IC等部位已有明显的增加。26周,上述核群和ICPE均见阳性纤维网织成丛状分布。实验证明,人胎脊髓中间带的AchE阳性神经元和SP—L、ENK—L肽能纤维,均出现于胚胎早期,且AchE神经元的出现要比SP—L、ENK—L肽能纤维大概早1/10孕期。     

银消片合用银消软膏主要药效学研究

目的:观察银消片合用其软膏的主要药效学作用,为该药临床治疗银屑病提供药理学依据.方法:采用体内外抗真菌、消炎、抗自由基、细胞免疫和体液免疫等试验.结果:银消片合用其软膏具有下述作用:(1)对粉小孢子菌和石膏样小孢子菌等常见皮肤真菌具有显著抑制作用.(2)明显抑制二甲笨所致小鼠耳壳肿胀.(3)抑制角叉莱胶诱发的小鼠足跖肿胀.(4)明显抑制小鼠和大鼠棉球肉芽组织生成.(5)提高小鼠血液中性粒细胞的吞噬葡萄球菌的功能.(6)抑制2.4-二硝基氯苯诱导的小鼠迟发型超敏反应.(7)明显抑制酵母多糖激活的小鼠腹腔巨噬细胞产生的活性氧.(8)提高小鼠胸腺和脾脏的抗氧化功能,降低活性氧对免疫器官的脂质过氧化损伤.(9)显著提高豚鼠的致痒阈.(10)对SRBC诱导的小鼠血清溶血素、脾空斑生成细胞溶能力和小鼠血清IgM、IgG含等没有明显影响.体外实验:(1)银消片对粉小孢子菌、石膏样小孢子菌、红色毛癣菌等三种真菌有明显抑制作用.(2)有效的清除体内的O2、OH、H2O2、O21等多种活性氧.结论:银消片合用银消软膏具有抗真菌、消炎、止痒、抗氧化功能、增强机体的非特异性免疫及抑制细胞免疫等功能,而对体液免疫的影响不明显.这为银消片舍用其软膏治疗银屑病等多种皮肤病提供了药理学依据.     

党参水提物对D-半乳糖致衰老小鼠肝脾形态结构和Bax蛋白及VEGF表达的影响

为研究党参水提物对D-半乳糖致衰老小鼠肝脏和脾脏组织结构及Bax蛋白及VEGF表达的影响,将100只昆明小鼠随机分为对照组、D-半乳糖致衰老模型组、低、中、高剂量党参干预组.连续处理42d,随时监测小鼠的体重变化,处理结束后,称取脏器质量,观察组织显微结构,并用免疫组织化学法检测Bax蛋白和VEGF在肝脏和脾脏组织的表达.结果显示衰老组小鼠肝脏和脾脏指数明显下降(P0.05).多数肝细胞水肿,胞浆空淡,呈气球样变.脾窦明显扩张,红髓范围扩大,脾小梁明显增生.Bax蛋白表达明显增强,VEGF蛋白表达显著减少.与衰老组相比,党参干预高剂量组的脏器指数明显增加(P0.05),肝小叶结构清楚,肝细胞体积增大,肝细胞水肿明显减轻.白髓红髓清楚,红髓范围减小,脾小梁增生不明显.Bax蛋白表达明显减少,VEGF蛋白表达明显增加.表明党参水提物可以稳定肝脾的组织结构,抑制细胞凋亡,促进血管生成,对衰老小鼠的肝脏和脾脏组织有一定的保护作用.