仙客来种苗球茎胚性愈伤的诱导及体胚的发生

为了建立仙客来稳定的快繁增殖体系,以仙客来种苗为试材,接种于含不同浓度激素组合的I／2MS培养基上,经过初培养和多次继代培养,诱导产生胚性愈伤,结果表明：球茎是较好的诱导胚性愈伤的材料,1／2MS＋6-BA0．2mg／L＋2,4-D2mg／L＋蔗糖30g／L＋琼脂6．5g／L＋肌醇100mg／L＋酪蛋白100mg／L是较好的诱导配方,将胚性愈伤转接到不含激素的1／2MS基本培养基上,诱导产生大量球形胚和鱼雷胚,2—3周后正常成熟的体胚萌发,表明此研究可以为仙客来的快速繁殖提供技术参考．     

风车草的组织培养与快繁体系的建立

本实验以风车草（Graptopetalum paraguayense）的叶片为材料,研究其快繁成功．结果表明：正面叶片接种于琼脂或者MS培养基上,其无菌苗培养出苗率最高;疏松愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基分别为：MS＋6-BA0．5mg／L＋2,4-D0mg／L;MS＋6-BA0．5＋2,4-D2．0;疏松愈伤芽诱导以及生根分别以：MS＋6-BAO．5m∥L＋NAAO．5m∥L;MS＋IBA0．5mg／L＋NAA0．5mg／L最适．各培养基pH5．8,附加0．7％的琼脂,3％蔗糖．炼苗和移栽的适当方案为：蛭石：珍珠岩=3：1灭菌培养基质中保湿培养;蛭石：珍珠岩=5：1未经灭菌的培养基质中炼苗培养．     

金线莲丛生芽的增殖和壮苗生根

通过对不同培养基的培养效果进行对比分析后筛选出适宜金线莲的生长的培养基分别是：丛生芽增殖最佳培养基为MS＋6-BA3mg/L＋NAA0.8mg/L,两个月的增殖系数达到4.5;壮苗最佳培养基为MS＋NAA2mg/L＋6-BA1mg/L＋香蕉汁20%;生根最佳培养基为1/2MS＋IBA1mg/L＋NAA1mg/L＋香蕉汁20%＋Ac0.8g/L,生根率达100%.     

一品红愈伤组织不定芽的分化

以MS培养基为基本培养基,用一品红花序轴培养产生的愈伤组织为材料,比较了不同浓度6-BA NAA组合和6-BA IBA组合处理对一品红愈伤组织分化芽特性的影响。结果表明:综合芽分化及生长状况,在6-BA与NAA两类激素组合中,以MS 2.0 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA培养基最好,MS 1.6 mg/L6-BA 0.1 mg/L NAA和MS 0.8 mg/L 6-BA 0.2 mg/L NAA次之,而在6-BA与IBA组合中,MS 2.0 mg/L 6-BA 0.2 mg/L IBA和MS 2.0 mg/L 6-BA 0.4 mg/L IBA培养基较好,MS 2.0 mg/L 6-BA 0.1 mg/L IBA次之。     

猪笼草离体培养及植株再生研究

以猪笼草的幼嫩茎段为外植体进行离体组织培养及植株再生,研究结果表明：以液体培养基1／2MS＋6-BA1．0mg／I．＋NAA0．1mg／L对芽的初始诱导以及固体培养基1／2MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．1mg／L对不定芽的增殖效果最好,增殖率达419％;生根培养基以1／4MS＋IBA0．5mg／L＋活性碳（0．01％）为最佳,生根率可达100％．     

蒜头果组织培养再生系统的初步研究

以蒜头果（Malania oleifera）种子萌发获得的无菌苗进行离体培养的初步研究．结果表明：MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．1mg/L激素组合能够较好地诱导芽的初始分化和增殖；适宜的继代增殖培养基为MS＋6-BA1．0mg/L＋NAA0．2mg/L；采用1／2MS＋IBA0．5mg/L为生根培养基，生根率为45．0％；移栽到河沙的生根苗成活率为52．5％．     

两种观赏石蒜的离体快速繁殖

探讨了两种石蒜双鳞片快速繁殖条件,结果表明：（1）红花石蒜（Lycoris radiate）在16h800～12001x光照下比黑暗条件下出芽率略高;（2）黄花石蒜（Lycoris aurea）在MS＋NAA0．2mg／L＋6-BA4mg／L下出芽率为220％,红花石蒜在MS＋NAA0．2mg／L＋6-BA2mg／L下出芽率为108％;（3）NAA比IBA有利于石蒜生根;（4）硅藻土显著提高黄花石蒜双鳞片出芽率,活性炭起抑制作用;（5）6％蔗糖浓度有利于红花石蒜小鳞茎增重,MS＋6．BA4mg／L＋NAA0．5mg／L培养基有利于小鳞茎增殖,切割一刀比切割两刀有利于小鳞茎增殖．     

宜兴百合的组织培养和快速繁殖

以组织培养获得的宜兴百合小鳞茎为试验材料，研究了不同基本培养基、NAA与6-BA的配比、矮壮素（CCC）、2，4-D、活性炭、蔗糖及悬浮培养方法对小鳞茎增殖和膨大的影响．结果表明，最佳诱导培养基为MS培养基，有利于提高分化率的最佳配方为：MS＋0．15mg／LNAA＋2．0mg／L6-BA，小鳞茎膨大增重的最佳培养基为：MS＋0．15mg／LNAA＋2．0mg／L6-BA＋0.1mg／L CCC＋6—8％蔗糖，培养方式为液体振荡培养优于固体培养．     

Alyssum maritimum(L.) Lam.的组织培养研究

将Alyssum maritimum（L．）Lain．的种子灭菌后,分别接人培养基MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L、MS＋6-BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L、MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L、MS＋6-BA2．5mg／L＋NAA0．2mg／L中,得到无菌苗．取20d的无菌苗叶子切成3minx2mm的小块,接人同样的培养基中诱导芽,在MS＋6-BA2．5mg／L＋NAA0．2mg／L培养基上分化得到芽,将芽转入不同NAA浓度MS培养基上生根,实验表明,A．maritimum（L．）Lam．芽诱导最适合的培养基是MS＋6-BA2,5mg／L＋NAA0．2mg／L．     

蒲苇愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以蒲苇成熟种子为外植体,MS为基本培养基并附加不同激素组合,筛选出诱导蒲苇愈伤组织产生和分化的最佳培养基,成功建立蒲苇的再生体系．试验结果表明：蒲苇种子最佳灭菌方式是将种子灭菌前用无菌水浸泡24h左右,然后用75％酒精消毒20s,再用0．1％（W／V）氯化汞消毒灭菌10min．愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2,4-D3．0mg/L＋6-BA0．1mg／L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS＋6-BA 2．0mg／L＋NAA 0．1mg/L分化继代的最佳培养基为MS＋6-BA 1．5mg／L＋NAA 0．2mg/L;生根最佳培养基配方为1／2MS＋NAA 0．8mg/L＋6-BA 0．2mg／L＋（0．02％）AC．     

红皮云杉体胚发生体系优化和超低温保存技术研究

【目的】通过对红皮云杉(Picea koraiensis)体细胞胚胎发生条件的筛选和超低温保存技术研究, 建立其完整的体胚发生体系及超低温保存条件,为红皮云杉优良种质资源的大量繁殖及保存提供基础。【方法】以红皮云杉合子胚为外植体,以两种基本培养基、6种植物生长调节剂组合为培养条件,筛选胚性愈伤组织诱导的适宜条件。并将获得的胚性愈伤组织进行超低温保存和体胚发育与成熟萌发试验,以3种脱落酸(ABA)和Gelrite浓度以及4种基本培养基为培养条件,筛选出体胚成熟和萌发的适宜培养条件。【结果】①两种基本培养基相比较,改良RJW(诱导率为30.00%)优于1/2 LV(诱导率为22.50%)基本培养基。当萘乙酸(NAA)质量浓度为3.0 mg/L、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)质量浓度为0.5 mg/L时胚性愈伤组织诱导率最高为50.00%;② 胚性愈伤组织增殖培养3个月后进行超低温保存试验,经恢复培养10 d 左右可以清晰地观察到成活的胚性愈伤组织,3个细胞系的胚性愈伤组织均可成活;③ 体胚发育阶段,改良RJW培养基添加Gelrite 6.0 g/L和ABA 20 mg/L时,3个细胞系体胚数量均较高,但是畸形胚比例也偏高,特别是HY-1细胞系畸形胚比例高达77.14%;当Gelrite质量浓度增加到8.0 g/L时,3个细胞系畸形胚比例均降低, 其中HY-2细胞系体胚数量为396.00个/g,畸形胚比例为10.33%;④ 红皮云杉体胚成熟培养两个月进行体胚萌发,在1/2 LM上体胚萌发能力最弱,其次是LM基本培养基,改良RJW体胚萌发能力最佳。不同细胞系体胚萌发能力也不同,体胚萌发能力最高为65.00%。【结论】① 胚性愈伤组织诱导的适宜培养基为改良RJW基本培养基,适宜的激素组合为NAA 3.0 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L;② 本试验进行超低温保存的细胞系均可成活;③ 体胚发育与成熟适宜的ABA质量浓度为20 mg/L,适宜Gelrite质量浓度为8.0 g/L;④ 体胚萌发的适宜基本培养基为改良RJW基本培养基。本研究建立了红皮云杉体胚发生体系并成功进行胚性愈伤组织的超低温保存条件,该技术体系可用于红皮云杉优良种质的快速繁殖。     

百合远缘杂交及其杂种鉴别研究

百合种间远缘杂交的不亲和性和杂交后代鉴别,影响着百合杂交育种效率。以东方百合杂交品种‘康斯坦萨’(Lilium var.‘Constanta’)为母本,我国的特有野生百合岷江百合(Lilium re-gale Wilson)为父本,采用直接授粉法、切柱法、切柱加柱头液法3种方法在温室栽培条件下进行授粉实验;子房发育至20 d以后,采集不同处理的子房经过表面灭菌处理,横切为0.3 cm的子房薄片,接种于MS+6-BA(0.01 mg/L)+NAA(0.1 mg/L)的培养基上进行胚拯救培养;用SRAP分子标记对拯救获得的再生植株进行杂种鉴定。结果表明:3种不同授粉方法中,采用直接授粉法子房生长情况最好,切柱加柱头液法次之,切柱法最差。通过胚拯救培养获得一批杂种后代株系。分子检测结果显示,后代中7个株系均具有典型的父本及母本条带。因此可以认为,‘康斯坦萨’和岷江百合远缘杂交的障碍为受精后障碍,通过子房切片胚拯救培养获得的7个株系均为杂种。     

大雪兰种子的共生培养研究

 为了促进大雪兰种子的快速萌发,筛选能有效促进大雪兰(Cymbidium mastersii Griff. ex Lindl.)种子共生萌发的菌根真菌,在兰-菌共生培养条件下,开展了共生种子萌发后的生物量、菌株重分离、三维菌丝网光学和电子显微镜观察,以及TTC种子活力等方面的测定.经研究表明:经过150 d兰-菌共生培养,2种春兰和墨兰根部的菌根真菌CLB111、MLX102均对大雪兰种子共生萌发有明显的促进作用,萌发率与对照均达到极显著差异.经共生培养后从种子中重分离获得原接种菌株;共生萌发种子经光镜及电子显微镜观察到大量菌丝侵入并在胚细胞中形成三维菌丝网,胚开始分化,种子表现出明显的活性;而对照组种子经重分离未获得原接种菌株、未发现菌丝侵入种子,且种子活力极低.由此,筛选出促进大雪兰种子萌发的有效菌株为CLB111、MLX102.大雪兰成株的菌根真菌与其种子共生萌发的菌根真菌是一致的,这与天麻不同;同时,能有效促进大雪兰种子萌发的菌根真菌有2种.试验表明,大雪兰的菌根真菌与促进种子共生萌发的菌根真菌不是绝对专一的,在一定条件下,不同的菌株对同一种大雪兰种子有明显的促进萌发作用.对于不同的生态条件下是否存在有差异性的问题,有待进一步研究探讨     

Germination of embryo in soybean anther culture

A large number of experiments about induction of callus, embryo and germination of regeneration plants were done in soybean anther culture. Screening for genotypes, low_temperature pretreatment for floral buds, constituent of hormone in medium and effects of different temperatures on induction rate of callus and embryo were studied. It was found that the TDZ played an important role in embryo induction and germination. 28 genotypes had reaction competent to the anther culture in all 110 genotypes. Induction rate of callus was 26%-68.1%. Plant differentiation rate was 0.5%-2.0%.     

红豆杉离体胚培养快速育苗研究

采用Ｂ５和ＭＳ相组合的ＢＭ基本培养基和适宜浓度的激素（２,４－Ｄ,６－ＢＡ和ＧＡ３）能解除红豆杉种胚的休眠．单因子试验和不同组合的正交试验结果显示：单独使用２,４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ,６－ＢＡ２ｍｇ／Ｌ和ＧＡ３２ｍｇ／Ｌ均在一定程度上促使红豆杉种胚的萌发,萌发率分别为７０％,５５％和２８．６％;最佳正交组合为６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ＋２,４－Ｄ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＡＣ４ｇ／Ｌ,萌发率达８１％．     

葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅱ)——接种时间及处理方法对胚培养的影响

选用花后35￣60d的巨峰、里扎马特和无核白葡萄,取其幼胚接种于不同激素水平M S培养基上,进行胚培养,以研究接种时间及处理方法对胚培养的影响.结果表明对花后60d的里扎玛特和巨峰的幼胚进行胚培养,其发芽率和成苗率显著高于层积处理后催芽播种的种子的发芽率与出苗率.低温和横切处理能有效地促进葡萄幼胚的萌发.花后60d的巨峰和里扎马特的发育率和成苗率最高;花后60d的无核白的幼胚发育率最高,花后50d的幼胚成苗率最高.     

五种常见蔬菜种子萌发期耐盐碱能力的比较

采用纸上萌发的方法研究了五种蔬菜（小白菜、红菜苔、茼蒿、萝卜和胡萝卜）萌发期耐盐碱胁迫的能力,从发芽势、发芽率、发芽指数、盐害指数、胚芽长、胚根长和胚鲜重等指标比较了五种蔬菜的抗盐性。结果表明,胡萝卜的耐盐性最强,萝卜和茼蒿其次,小白菜和红菜苔耐盐性较差。     

春剑种子无菌萌发过程的显微观察

【目的】春剑(Cymbidium tortisepalum var. longibracteatum)种子在自然环境下难以萌发,大约只有百万分之一的萌发率。分析春剑种子萌发机制,可为春剑种子的高效萌发和共生萌发提供参考。【方法】通过无菌播种技术对春剑种子进行萌发试验,并用体式显微镜和扫描电镜对各发育阶段春剑种子形态变化进行观察。【结果】Hyponex(花宝1号)3 g/L + 6-BA 0.50 mg/L + NAA 0.50 mg/L培养基上种子萌发效果最佳,种子萌发率为30.33%;从播种到形成幼苗需400 d。观察发现,春剑种子萌发的主要途径为种胚膨大并从种子一侧突破种皮但未从种皮中脱落,种胚突破种皮后经光合作用变绿并分化成原球茎,原球茎伸长生长形成根状茎最后形成幼苗。【结论】添加适宜浓度的6-BA和NAA能有效促进春剑种子的萌发;春剑种子的发育阶段分为:未萌发、种胚吸水膨大、种皮破裂露出种胚、形成原球茎、形成根状茎、形成幼苗6个阶段。     

滇越金线莲快速繁殖技术研究

通过滇越金线莲种子无菌诱导和茎诱导芽以及丛生芽增殖、生根等试验，得出结论：滇越金线莲种子在不含激素的Hyponex 1培养基上有较好萌发率，并且在添加10％椰乳后原球茎能分化出健壮的苗。外植茎在Hyponex 1＋6-BA 1mg／L＋NAA 0．01／L培养基上诱导产生芽的几率最高；最佳增殖培养基是Hyponex 1＋BA 0．5mg／L＋NAA 0．1mg／L；生根培养基是Hyponex 1＋6-BA0．05mg／L＋NAA0．1mg／L。     

国兰优良品种杂交及种子无菌萌发研究

选取国兰传统优良品种春兰:黄梅(父本)×黄荷(母本)、建兰:君荷(父本)×市长红(母本)、蕙兰:315梅(父本)×庆华梅(母本)进行杂交,通过改良培养基配方,进行无菌播种繁殖,观察不同成熟度果荚的种子萌发和杂交后代生长情况。结果显示,授粉后150～180 d的杂交F_1代种子,播种后可获得理想的无菌萌发效果,种子萌发率达60%以上。试验成功获得生长健壮的杂交后代完整植株,为今后的新品种选育提供了育种材料。